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文档简介

第第页中瑞祥紫外可见分光光度注意事项操作方法仪器构成操作方法分光光度计已经成为现代分子生物试验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。仪器重要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统构成。原理分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光线透过测试的样品后,部分光线被汲取,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质汲取的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,其关系如下式:A=lg(I/I0)=lgT=kLc式中:A为吸光度;I0为入射的单色光强度;I为透射的单色光强度;T为物质的透射率;k为摩尔汲取系数;L为被分析物质的光程,即比色皿的边长;c为物质的浓度;物质对光的选择性汲取波长,以及相应的汲取系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在肯定条件下的汲取系数后可用同样条件将该供试品配成溶液,测定其汲取度,即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区,除某些物质对光有汲取外,很多物质自身并没有汲取但可在肯定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定,故又称比色分析。由于显色时影响呈色深浅的因素较多,且常使用单色光纯度较差的仪器,故测定时应用标准品或对照品同时操作操作方法1.接通电源,打开仪器开关,掀开样品室暗箱盖,预热10分钟。2.将灵敏度开关调至“1”档(若零点调整器调不到“0”时,需选用较高档。)3.依据所需波长转动波长选择钮。4.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处,用擦镜纸擦清外壁,放入样品室内,使空白管对准光路。5.在暗箱盖开启状态下调整零点调整器,使读数盘指针指向t=0处。6.盖上暗箱盖,调整“100”调整器,使空白管的t=100,指针稳定后渐渐拉出样品滑竿,分别读出测定管的光密度值,并记录。7.比色完毕,关上电源,取出比色皿洗净,样品室用软布或软纸擦净注意事项1.该仪器应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止电灯泡灯丝发亮不稳定。2.使用本仪器前,使用者应当首先了解本仪器的结构和工作原理,以及各个掌控旋钮之功能。在未按通电源之前,应当对仪器的安全性能进行检查,电源接线应坚固,通电也要良好,各个调整旋钮的起始位置应当正确,然后再按通电源开关

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