山东省烟台市二中2021-2022学年高二4月月考生物试题

高2020级生物月考试题一、单选题1.发酵食品在我国传统饮食文化中占有重要地位。下列关于家庭制作果酒、果醋的叙述，错误的是（）A.果酒制作要选择新鲜葡萄冲洗后除去枝梗，再榨汁备用B.果酒制作过程中为防止杂菌污染，只能拧松发酵瓶盖而不能打开瓶盖C.果酒中的酒精可以作为醋酸菌发酵的碳源和能源D.果酒制成后只需要将装置移至温度略高的环境中就能酿成果醋【答案】D【解析】【分析】果酒和果醋制作过程中的相关实验操作：（1）材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄进行冲洗，除去枝梗。（2）灭菌：榨汁机要清洗干净，并晾干，发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒。（3）榨汁：将冲洗除枝梗的葡萄放入榨汁机榨取葡萄汁。（4）发酵：①将葡萄汁装入发酵瓶，要留要大约1/3的空间，并封闭充气口。②制葡萄酒的过程中，将温度严格控制在18℃25℃，时间控制在1012d左右，可通过出料口对发酵的情况进行及时的监测。③制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在30℃~35℃，时间控制在前78d左右，并注意适时通过充气口充气。【详解】A、为避免除去枝梗时葡萄皮破损，增加杂菌污染的机会，故果酒制作要选择新鲜葡萄冲洗后除去枝梗，再榨汁备用，A正确；B、果酒制作过程中为防止杂菌污染，不能打开发酵瓶盖，但为及时排出发酵过程中产生的二氧化碳气体，应拧松发酵瓶盖，B正确；C、果酒中的酒精的元素组成为C、H、O三种元素，可以作为醋酸菌发酵的碳源和能源，不能做氮源，C正确；D、果酒制成后除需要将装置移至温度略高的环境中外，还应持续通入无菌空气才能酿成果醋，D错误。故选D。2.如图表示工业上利用苹果制备果酒、果醋的流程图。下列叙述不正确的是（）A.过程①、②所需的最适温度不相同B.过程②需要在有氧气的条件下进行C.若过程①人工接种酵母菌可以缩短苹果酒的酿制时间D.整个发酵过程都必须在严格无菌条件下才能正常进行【答案】D【解析】【详解】①是果酒发酵、②是果醋发酵。①所用的生物是酵母菌，其生长的温度是1825℃，②所用的生物是醋酸菌，其生长的最适温度是3035℃，A项不符合题意；②果醋发酵需要醋酸菌，醋酸菌是需氧型生物，故果醋发酵要在有氧条件下进行，B项不符合题意；果酒发酵若人工接种酵母菌，菌种的纯度高，产生果酒的效率高，故可以缩短苹果酒的酿酒时间，C项不符合题意；发酵前所有的器具和用品都要进行无菌处理，接种酵母菌或醋酸菌后在无菌培养箱中培养，不能在严格无菌条件下培养，因为会杀死酵母菌和醋酸菌，D项符合题意。【名师点睛】解答本题的关键是明白果酒发酵和果醋发酵的菌种、原理和条件。3.豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。为了研究影响豆豉发酵效果的因素，某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟大豆中并混匀，再将两者置于适宜条件下进行发酵，并定期取样观测发酵效果。以下推测不合理的是A.该实验的自变量是菌种，温度属于无关变量B.大豆发酵过程中部分蛋白质转变为多肽，形成豆豉的独特风味C.若容器内上层大豆发酵效果优于底层，则发酵菌为厌氧菌D.煮熟大豆使蛋白质变性，有利于菌体分泌酶作用于蛋白质【答案】C【解析】【详解】根据题干信息分析，该实验的自变量是菌种的种类（甲乙两种菌种），而温度属于无关变量，A正确；大豆发酵过程中部分蛋白质转变为多肽，形成豆豉的独特风味，B正确；若容器内上层大豆发酵效果优于底层，说明发酵菌为需氧型，C错误；煮熟大豆使蛋白质变性，有利于菌体分泌酶作用于蛋白质，D正确。4.解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲，乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深蓝色，乙菌菌落周围不变色，下列说法错误的是（）A.甲菌属于解脂菌B.实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源C.可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比D.该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶能力【答案】B【解析】【分析】选择培养基：根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率。鉴别培养基：依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计。【详解】A、根据题干信息“甲菌菌落周围呈现深蓝色”，说明甲可以分泌脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸，脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色，因此甲菌属于解脂菌，A正确；B、乙菌落周围没有出现深蓝色，说明乙菌落不能产生脂肪酶，不能利用脂肪为其供能，但乙菌落也可以在培养基上生存，说明该培养基不是以脂肪为唯一碳源，B错误；C、可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比，更加直观，C正确；D、可以利用该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力，观察指标可以以菌落周围深蓝色圈的大小，D正确。故选B。【点睛】5.为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验。同学甲进行过程④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。下列叙述错误的是（）A.步骤③与步骤②中培养基成分的最大区别是步骤③的培养基中石油是唯一碳源B.步骤⑤振荡培养的目的是提高培养液溶氧量，同时使菌体与培养液充分接触C.图B培养基的结果可能是由于涂布不均匀造成的D.步骤⑤后取样测定石油含量的目的是筛选出能分解石油的细菌【答案】D【解析】【分析】1．微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。2．分析图B：图B采用的是稀释涂布平板法，但涂布不均匀。【详解】A、该实验的目的是为了分离和纯化高效分解石油的细菌，因此步骤③与步骤②中培养基成分相比，最大的区别是石油是唯一碳源，A正确；B、步骤⑤需要振荡培养，原因是提高培养液中（溶解）氧的含量，通过振荡可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率，B正确；C、图B采用的接种方法是稀释涂布平板法，出现图B结果（菌落分布不均匀）可能的操作失误是涂布不均匀，C正确；D、步骤⑤后取样测定石油含量的目的是筛选出分解石油能力最强的细菌，D错误。故选D。【点睛】6.下图为微生物的实验室培养的有关操作，相关叙述错误的是（）A.步骤①中，需将接种工具灼烧至变红，以杀灭杂菌B.步骤②中，将接种工具冷却时不宜距酒精灯火焰太远C.图中接种方法的目的是使菌种逐渐稀释，经培养后获得单个菌落D.接种后应将培养皿倒置培养，培养后可以根据结果进行微生物计数【答案】D【解析】【分析】微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详解】A、图1步骤①中，接种前灼烧接种环至变红，目的是杀灭接种环上可能引起污染的微生物，A正确；B、步骤②中，将接种工具冷却时不宜距酒精灯火焰太远，防止受到杂菌污染，B正确；C、所示的接种方法是平板划线法，目的是使接种的菌种逐渐稀释，经培养后获得由单个细菌繁殖而来的菌落，C正确；D、图示的平板划线法不能用于微生物的计数，D错误。故选D。7.我国规定1L自来水中大肠杆菌数不得超过3个。某兴趣小组利用滤膜法（如右图）对校内自来水中大肠杆菌数量进行检测。下列有关叙述错误的是（）A.取样水龙头应用火焰灼烧，打开水龙头一段时间后再取样B.滤膜的孔径应小于大肠杆菌，过滤水样应足量C.伊红—亚甲蓝培养基属于选择培养基，培养基中含有琼脂D.进行细菌培养的同时需进行未接种培养基的培养【答案】C【解析】【分析】欲测定自来水中大肠杆菌数目，将已知体积的水过滤后，将滤膜放在伊红美蓝培养基上，大肠杆菌的菌落呈现黑色，注意滤膜与培养基完全贴紧，不能有气泡；可根据培养基上菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数目。【详解】A、为避免杂菌污染，取样水龙头应用火焰灼烧，打开水龙头一段时间后再取样，是为了防止温度过高杀死目的菌，A正确；B、用滤膜过滤待测水样，滤膜的孔径应小于大肠杆菌，这样水样中的细菌才会留在滤膜上，B正确；C、伊红—亚甲蓝培养基属于鉴别培养基，且该培养基属于固体培养基，培养基中含有琼脂，C错误；D、进行细菌培养的同时需进行未接种培养基的培养，起对照作用，D正确。故选C。8.我国科研人员利用大鼠、小鼠两个远亲物种培养出世界首例异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs），过程如图所示。该细胞可分化成各种杂种体细胞，为研究不同物种性状差异的分子机制提供了模型。下列相关叙述错误的是（）A.单倍体囊胚1最可能由小鼠的卵细胞经体外诱导培养获得B.体外培养AdESCs需向培养液中添加动物血清等天然成分C.该项技术突破了物种界限，获得了哺乳动物远亲物种的杂种细胞D.AdESCs的染色体组数与大鼠小鼠体细胞融合的杂种细胞的相同【答案】D【解析】【分析】分析题图：小鼠的卵细胞体外培养到囊胚时期，取内细胞团细胞培养成孤雌单倍体胚胎干细胞，取大鼠的精子体外培养到囊胚时期，取内细胞团细胞培养成孤雄单倍体胚胎干细胞，两种胚胎融合成异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs)。【详解】A、由单倍体囊胚1可获得孤雌单倍体胚胎干细胞，因此单倍体囊胚1最可能由小鼠的卵细胞经体外诱导培养获得，A正确；B、血清等天然成分与细胞在体内需要的成分接近，含丰富的营养物质及各种生长因子等，因此体外培养AdESCs需向培养液中添加动物血清等天然成分，B正确；C、由于物种间存在生殖隔离，因此自然情况下，哺乳动物远亲物种间的配子往往无法完成受精作用，或者即便能完成也不能继续发育成个体，该项技术突破了物种界限，获得了哺乳动物远亲物种的杂种细胞，C正确；D、该AdESCs是杂合二倍体胚胎干细胞，故含有2个染色体组，但小鼠大鼠杂种细胞由体细胞融合产生，通常含有4个染色体组，因此两者染色体组数不同，D错误。故选D。9.品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，另一远缘植物乙的细胞质中存在抗除草剂基因，欲将乙细胞质中的抗性基因引入甲中。相关叙述错误的是（）A.过程A中取顶芽细胞进行体细胞杂交有利于获得脱毒苗B.过程B中常用PEG诱导原生质体融合C.过程C中只有融合细胞具有完整的细胞结构，可以正常生长D.杂种植株的抗除草剂基因遵循孟德尔遗传定律【答案】D【解析】【分析】题图分析：该图为体细胞杂交过程，其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可以酶解法，B为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇处理，融合的杂种细胞应该具备乙品种细胞质中的抗性基因和甲品种的控制多种优良性状的核基因。【详解】A、顶端分生组织几乎不带毒，因此，过程A中取顶芽细胞进行体细胞杂交有利于获得脱毒苗，A正确；B、流程中A处理可使用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞获得原生质体，B处理可使用聚乙二醇促融，B正确；C、过程C中只有融合细胞活性部位互补，具有完整的细胞结构，才正常生长，然后将获得的杂种细胞进行组织培养获得杂种植株，C正确；D、抗除草剂基因不一定插入到细胞核内的染色体上，所以杂种植株的抗除草剂基因不一定遵循孟德尔遗传定律，D错误。故选D。10.CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1．6~5倍，导致吞噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如下流程进行了实验。下列叙述错误的是（）A.多次进行步骤①的目的是获得更多已免疫的B淋巴细胞B.经两次筛选可得到既能大量增殖又能产生抗CD47抗体的细胞C.实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需放入CO2培养箱D.对照组中吞噬细胞的吞噬指数显著高于实验组可验证上述推测【答案】D【解析】【分析】单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠体内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。【详解】A、步骤①是向免疫小鼠体内注射特定的抗原，多次进行步骤①的目的是获得更多已免疫的B淋巴细胞，A正确；B、第一次筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选出能产生专一抗体的杂交瘤细胞，故经两次筛选可得到既能大量增殖又能产生抗CD47抗体的细胞，B正确；C、CO2可维持pH的稳定，实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需放入CO2培养箱，C正确；D、根据单一变量原则可知，应设置不加单克隆抗体的巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系为对照，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，没有抗体抑制，CD47对巨噬细胞有抑制作用，对照组中吞噬细胞的吞噬指数显著低于实验组可验证上述推测，D错误。故选D。11.运用动物体细胞杂交技术可实现基因定位。研究发现：用人体细胞与小鼠体细胞进行杂交得到的杂种细胞含有双方的染色体。杂种细胞在持续分裂过程中仅保留鼠的染色体而人类染色体则逐渐丢失，只剩一条或几条。下图是人的缺乏HGPRT酶突变细胞株（HGPRT－）和小鼠的缺乏TK酶细胞株（TK－）融合后并在HAT培养液中培养的过程，结果表明最终人的染色体在融合细胞中仅存有3号染色体或17号染色体或两者都有。已知只有同时具有HGPRT酶和TK酶的融合细胞才可在HAT培养液中长期存活与繁殖，从图示结果看，可以确定人的TK酶基因位于（）号染色体上。A.3 B.17 C.3和17 D.无法确定【答案】B【解析】【分析】根据题意可以看出，该技术可以对人的TK酶基因进行定位。该技术中利用了细胞融合、动物细胞培养等技术。【详解】从培养结果可以看出，培养获得的细胞中均具有鼠的全部染色体，但是只有含人的17号染色体的细胞存活下来，由此可得，人的TK酶基因位于17号染色体，B正确。故选B。12.人血清白蛋白（HSA）在临床上的需求量很大，通常从人血中提取。但由于艾滋病病毒（HlV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。应用基因工程和克隆技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳汁生产血清白蛋白，既提高了产量，又有了安全保障。下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，相关叙述不正确的是（）A.图中①一般经胰蛋白酶处理可以得到③B.在②进入③之前要用限制酶、DNA连接酶和运载体等工具来构建基因表达载体C.一般情况下，用雌性激素处理良种母牛可以获得更多卵母细胞D.⑥是⑤生出的后代，但⑥的遗传性状和荷斯坦奶牛最相似【答案】C【解析】【分析】析题图：①～③是动物细胞培养过程，需要先用胰蛋白酶将细胞分散成单个细胞；①是目的基因（血清白蛋白基因）；②～③表示采用转基因技术，将目的基因（血清白蛋白基因）导入受体细胞的过程；④是形成重组细胞。a是早期胚胎培养形成囊胚；然后进行胚胎移植，⑤～⑥是代孕母牛产出转基因小牛的过程，并从成体转基因母牛乳汁提取人类血清白蛋白。【详解】A、用胰蛋白酶处理动物组织，可以获取单个细胞，A正确；B、将目的基因导入受体细胞之前，要构建基因表达载体，需要使用限制酶、DNA连接酶和运载体等工具，B正确；C、一般情况下，用促性腺激素处理良种母牛可以获得更多卵母细胞，C错误；D、⑥是⑤生出的后代，⑥不含⑤的遗传物质，⑥的遗传性状和（供核一方）荷斯坦奶牛最相似，D正确。故选C。【点睛】本题结合利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，综合考查基因工程、动物体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植、要求考生识记基因工程的原理及操作步骤；识记动物细胞核移植和动物细胞培养的原理；识记胚胎移植的生理学基础及基本程序，能准确判断图中各过程的名称，再结合所学的知识答题。13.早期胚胎细胞异常凋亡是目前克隆猪成功率低的主要原因。用实时荧光逆转录PCR技术（RTqPCR）检测细胞凋亡抑制基因Bc12的表达水平，有助于了解胚胎发育不同时期Bcl2表达水平与细胞凋亡的关系。下列说法错误的是（）A.对重组细胞进行培养时需加入血清等天然成分B.卵母细胞采集后，一般要在体外培养成熟再去核作为受体细胞C.根据RTqPCR荧光强度可计算出基因Bcl2在相应细胞中的翻译水平D.胚胎在受体子宫发育过程中，其遗传特性不受影响【答案】C【解析】【分析】1、动物细胞核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体．用核移植的方法得到的动物称为克隆动物；

2、动物细胞核移植的原理：动物细胞核的全能性；

3、动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。原因：动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难；【详解】A、对重组细胞进行培养时需加入血清、血浆等天然成分，A正确；B、卵母细胞采集后，要在体外培养成熟再去核，作为核移植受体细胞，B正确；C、根据RTqPCR最终的荧光强度不可能可计算出基因Bcl2在相应细胞中的翻译水平，只有在荧光信号指数扩增阶段，PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系，我们可以选择在这个阶段进行定量分析，C错误；D、胚胎在受体子宫发育过程中，其遗传特性不受影响，受体子宫只不过提供了一个发育的场所，D正确。故选C。14.科学家已能运用基因工程技术，让羊合成并由乳腺分泌抗体，相关叙述中正确的是（）①该技术将导致定向变异；②DNA连接酶把目的基因与运载体黏性末端的碱基对连接起来；③蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供资料；④受精卵是理想的受体。A.①②③④ B.①③④ C.②③④ D.①②④【答案】B【解析】【分析】基因工程可将控制特定性状的外源基因导入受体细胞，从而定向改造生物的性状，而且操作过程不受亲缘关系远近的制约，即克服远缘杂交不亲合的障碍。在基因工程操作程序中，所用的DNA连接酶连接的不是目的基因与黏性末端的碱基对，而是目的基因与载体的DNA两条链的骨架，即脱氧核糖与磷酸的连接，也就是说，DNA连接酶只能催化断开的DNA双链重新形成磷酸二酯键。由蛋白质中的氨基酸序列可推知相应的mRNA中的核苷酸序列，进而可推测相应基因中核苷酸的排序，从而可以用化学合成方法人工合成目的基因。转基因羊的乳腺细胞最终是来自于受精卵的有丝分裂，且受精卵体积大，操作方便，全能性高，能够发育成动物个体，也能保障发育成的个体的所有细胞都能含有外源基因。【详解】①基因工程可将控制特定性状的外源基因导入受体细胞，从而定向改造生物的性状，导致定向变异，①正确；②DNA连接酶把目的基因与载体黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来，②错误；③人工合成目的基因的常用方法有逆转录法和化学合成法，化学合成法就是利用氨基酸序列可为合成目的基因提供资料，③正确；④受精卵体积大，操作方便，全能性高，能够发育成动物个体，因此是动物基因工程中的理想受体细胞，④正确。ACD错误，B正确。故选B。15.图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。若图1中虚线方框内的碱基对被TA碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子Dd分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有几种不同DNA片段？若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，应选用哪种限制酶？()A.4；MboⅠ B.3；MboⅠ C.4；BamHⅠ D.3；BamH【答案】C【解析】【详解】（1）据图可知，基因D会被SmaⅠ切割形成三个片段（长度分别为537bp、790bp、661bp），若图中虚线方框内的碱基对被TA碱基对替换，则基因D就突变为基因d，且基因d只有一个SmaⅠ的酶切位点，因而基因d会被SmaⅠ切割形成两个片段（长度分别为1327bp、661bp）．所以，从杂合子（Dd）中分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有4种不同长度的DNA片段（537bp、790bp、661bp、1327bp）；（2）由图可知，目基因D两侧都是限制酶BamHI的识别序列，因此应选用限制酶BamHI切割。故选C。16.下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述，错误的是A.用同样方法从等体积兔血和鸡血中提取的DNA量相近B.DNA析出过程中，搅拌操作要轻柔以防DNA断裂C.预冷的乙醇可用来进一步纯化粗提的DNAD.用二苯胺试剂鉴定DNA需要进行水浴加热【答案】A【解析】【分析】DNA粗提取选材的标准：DNA含量高，并且材料易得．由于哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和细胞器，因此不采用哺乳动物的血液。DNA粗提取和鉴定的原理：1、DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化钠中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同。3、DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。【详解】兔属于哺乳动物，其红细胞没有细胞核及各种细胞器，提取不到DNA，而鸡属于鸟类，其红细胞内含有细胞核与各种细胞器，DNA含量较多，A错误；DNA分子从细胞中被释放出来且除去蛋白后是非常容易断裂的,如果太过剧烈的搅拌，DNA链可能会被破坏，因此轻柔搅拌的目的是为了获得较完整的DNA分子，B正确；在冷的95%酒精溶液中DNA的溶解度最低，DNA的沉淀量最大。如果用热的95%酒精会提高DNA的溶解度,不能完全使DNA沉淀，C正确；将析出的DNA溶解在2mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂后需要水浴加热才会呈现蓝色，D正确。17.下列关于基因工程技术的叙述，正确的是（）A.切割质粒的限制性内切核酸酶均特异性地识别6个核苷酸序列B.PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达【答案】D【解析】【分析】目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道，这是检查基因工程是否做成功的一步。【详解】A、大多数限制性核酸内切酶识别6个核苷酸序列，少数限制酶识别序列由4、5或8个核苷酸组成，A错误；B、PCR反应中温度的周期性改变是为了变性、复性、延伸，均属于DNA的复制过程，B错误；C、载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因，C错误；D、抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达，需要进行检测和鉴定，D正确。故选D。18.利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是A.棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因B.大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNAC.山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列D.酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白【答案】D【解析】【分析】基因的表达即控制蛋白质的合成，只有合成了相应的蛋白质才能证明目的基因完成了在受体细胞中的表达．此题的重点就看是否产生相应的蛋白质。【详解】A、检测到细菌的抗虫基因并未产生蛋白质，A错误；

B、检测到人胰岛素基因及其mRNA并未产生蛋白质，错误；

C、检测到人生长激素DNA序列并未产生蛋白质，C错误；

D、提取到人干扰素蛋白，是蛋白质，D正确。

故选D。19.经遗传改造的小鼠胚胎干细胞注入囊胚，通过胚胎工程的相关技术可以获得具有不同遗传特性的实验小鼠。下列说法错误的是（）A.用促性腺激素处理雌鼠可以获得更多的卵子B.体外受精前要对小鼠的精子进行获能处理C.胚胎移植前要检查胚胎质量并在囊胚或原肠胚阶段移植D.遗传改造的小鼠胚胎干细胞可以通过转基因等技术获得【答案】C【解析】【分析】1、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。②配种或人工授精。③对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来（也叫冲卵）。对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段。直接向受体移植或放入196℃的液氮中保存。④对胚胎进行移植。⑤移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。2、体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。【详解】A、促性腺激素可以使雌鼠超数排卵，获得更多的卵子，A正确；B、精子只有获能后才能完成受精，故体外受精前要对小鼠的精子进行获能处理，B正确；C、胚胎移植通常选择囊胚期之前的阶段，如桑椹胚或囊胚阶段，C错误；D、转基因技术可以定向改造小鼠的基因，所以遗传改造的小鼠胚胎干细胞可以通过转基因等技术获得，D正确。故选C。【点睛】本题考查胚胎工程的基本知识，考生需要识记基本操作，D项中需要结合基因工程的目的进行解答。20.下列关于利用胚胎工程培育优质奶牛的叙述，正确的是（）A.从雄性奶牛中采集到的成熟精子遇到卵子即可进入卵子内B.在体外完成受精后的受精卵，将其植入子宫即可完成着床C.随着卵裂的进行，卵裂球细胞的体积变小，卵裂球的体积和有机物总量显著增加D.进行胚胎移植时不需要考虑受体对外来胚胎发生免疫排斥反应【答案】D【解析】【分析】1、体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精；2、胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。【详解】A、从雄性奶牛中采集到的成熟精子还需要获能才能与卵子受精，A错误；B、在体外完成受精后的受精卵，需要发育到桑椹胚或囊胚阶段才能胚胎移植入子宫，B错误；C、随着卵裂的进行，卵裂球细胞的体积变小，卵裂球的体积不变甚至减少，有机物总量减少，C错误；D、受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体的存活提供了可能，这是胎移植的生理学基础之一，D正确。故选D。二、多选题21.下列有关微生物应用的说法正确的是（）A.制作泡菜时，在坛内加入一些腌制过的泡菜汁可以加快发酵速度B.果酒制成后适当提高温度，并不断通入无菌空气即可生产果醋C.相比完整的叶片，农杆菌更容易侵染剪成小片的叶片细胞D.自然发酵制作果酒时，榨出的葡萄汁不需要进行高压蒸汽灭菌【答案】ACD【解析】【分析】1、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌，在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。2、果酒制作需要酵母菌发酵（无氧呼吸）产生酒精。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。3、植物受伤时，伤口处细胞会分泌大量酚类化合物，吸引农杆菌移向这些细胞。【详解】A、制作泡菜时，需要乳酸菌发酵，腌制过的泡菜汁含有乳酸菌，故在坛内加入一些腌制过的泡菜汁可以加快发酵速度，A正确；B、酵母菌适宜的温度为18℃～25℃，而醋酸菌适宜的温度为30℃～35℃，并且醋酸菌是嗜氧菌，因此果酒制成后，加入醋曲、适当提高温度并不断通入无菌空气才可生产果醋，B错误；C、植物受伤时，伤口处细胞会分泌大量酚类化合物，吸引农杆菌移向这些细胞，故相比完整的叶片，农杆菌更容易侵染剪成小片的叶片细胞，C正确；D、果酒制作的菌种来源于葡萄皮上野生的酵母菌，所以榨出的葡萄汁不需要经过高压蒸汽灭菌，D正确。故选ACD。22.自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌，将玉米种子用自身固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如下图。以下叙述正确的是（）A.步骤①土样应取自当地深层土壤，步骤③将土壤悬浮液稀释了1000倍B.自生固氮菌是自养型生物，不可用血细胞计数板来计数土壤悬浮液中的菌数C.步骤②需充分振荡20min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到水中D.步骤④所用的接种工具是涂布器，应选用不添加氮源的培养基培养【答案】CD【解析】【分析】微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详解】A、自生固氮菌是需氧型生物，步骤①土样应取自表层的土壤；由于10g土壤加入到90ml水中，已经稀释了10倍，步骤③中的稀释梯度分别为10，100，1000倍，所以土壤悬浮液稀释了1000倍，最终菌液被稀释了10000倍，A错误；B、自生固氮菌是异养型生物，血细胞计数板通常用于计数体积较大的微生物，如酵母菌，B错误；C、步骤②需充分振荡20min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中，C正确；D、步骤④为稀释涂布平板法接种，所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源，利用的是空气中的氮气，D正确。故选CD。23.大黄素是虎杖细胞产生的一种次生代谢物，它可用于医疗、保健和日用化工品中，利用愈伤组织培养可以实现大黄素的工厂化生产。为了确定大黄素的最佳收获时机，某科研小组进行了相关研究，结果如下图所示。下列分析错误的是（）A.愈伤组织是外植体经过脱分化形成的不定形的薄壁组织团块B.大黄素是虎杖在整个生命进程中一直合成且必需的物质，所以可以从愈伤组织中获取C.12天左右时，大黄素含量较低可能是愈伤组织生长缓慢导致D.30天左右时，愈伤组织干重下降可能与愈伤组织中生长素和细胞分裂素大量合成有关【答案】BD【解析】【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。【详解】A、愈伤组织是脱分化形成的无定形的薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织，A正确；B、次生代谢物是指某些微生物生长到稳定期后，以结构简单、代谢途径明确的初生代谢物为前体，通过复杂的次生代谢途径所合成的各种复杂的化合物，不是一直生成的，B错误；C、第12天左右时，愈伤组织干重变化量小，所以大黄素含量较低可能是愈伤组织生长缓慢导致，C正确；D、激素有微量且高效的特点，不会大量合成，D错误；故选BD。24.如图表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤。以下说法错误的是（）A.利用含有四环素的培养基可将含Ⅱ的细菌筛选出来B.Ⅲ是农杆菌，通过步骤③将目的基因导入植株C.只要检测到植物细胞中含有⑥就说明目的基因成功表达了D.①过程的完成需要限制酶和DNA聚合酶的参与【答案】C【解析】【分析】农杆菌易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力。农杆菌的Ti质粒的TDNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。约80%的转基因植物都是用农杆菌转化法获得的，具体转化过程：目的基因插入Ti质粒的TDNA上导入农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。【详解】A、图示基因工程操作中以四环素抗性基因为标记基因，因此利用含有四环素的培养基可将含分子Ⅱ(重组质粒)的细菌筛选出来，A正确；B、Ⅲ是农杆菌，步骤③表示农杆菌侵染植株，将目的基因导入植株，B正确；C、⑥是一条mRNA分子，不是蛋白质，若检测到蛋白质才能说明基因成功表达，C错误；D、图中①过程表示基因表达载体的构建，需要限制酶和DNA连接酶的参与，D正确。故选C。25.小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞、制备流程如图所示。下列叙述错误的是（）A.为获得更多的囊胚，采用激素注射促进雄鼠产生更多的精子B.细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以全能性高低不同C.用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞D.胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养【答案】ABC【解析】【分析】1、胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）。2、ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态．在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段。【详解】A、为了获得更多的囊胚，可以采用激素促进成熟雌性个体超数排卵，然后将卵细胞从母体内取出，在试管内与人工采集的精子进行体外受精，培育成胚胎，A错误；B、细胞a和细胞b是由同一个受精卵经过有丝分裂形成的，故核基因相同，B错误；C、运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞，首先必须用胰蛋白酶处理内细胞团，分解细胞间的胶原蛋白等，使之分散成单个细胞，C错误；D、动物细胞培养时需要在5%CO2的培养箱中进行培养，以维持培养液的pH，D正确。故选ABC。三、非选择题26.[生物——选修1：生物技术实践]苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的。回答下列问题：（1）酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，在酵母菌细胞的_________________中进行，其产物乙醇与_________________试剂反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验；过程③在酵母菌细胞的________________中进行。与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度________________。（2）第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，根据醋酸杆菌的呼吸作用类型，该过程需要在________________条件下才能完成。（3）在生产过程中，第一阶段和第二阶段的发酵温度不同，第一阶段的温度____________（填“低于”或“高于”）第二阶段的。（4）醋酸杆菌属于___________核生物，其细胞结构中___________（填“含有”或“不含有”）线粒体。【答案】细胞质基质重铬酸钾线粒体快有氧低于原不含有【解析】【详解】（1）无氧呼吸在细胞质基质中进行，检测酒精用酸性重铬酸钾溶液，反应呈灰绿色，③为有氧呼吸第三阶段，在线粒体内膜中进行，与无氧条件相比，在有氧条件下，产生的能量多，酵母菌的增殖速度块。（2）醋酸菌是好氧菌，所以需要在有氧条件下进行醋酸发酵。（3）醋酸发酵的温度高于酒精发酵的温度。（4）醋酸杆菌属于原核生物，没有线粒体等复杂的细胞器。27.蚯蚓粪中富含细菌、放线菌和真菌，这些微生物不仅使复杂物质矿化为植物易于吸收的有效物质，而且还合成一系列有生物活性的物质，如糖、氨基酸、维生素等，这些物质的产生使蚓粪具有许多特殊性质，成为最有效而无害的土壤。某研究小组以新鲜蚯蚓粪为材料，从中筛选出除氨菌。回答下列有关问题。（1）蚯蚓与体内的微生物可能有_____关系。分离除氨菌首先进行富集培养，先将10g新鲜的蚯蚓粪加入某液体培养基中，振荡30min后在恒温箱中培养。该培养基中的（NH4）2SO4为唯一氮源，该培养基从功能上应属于_____培养基。进行富集培养的目的是_____。（2）将得到的富集培养液进行如图所示操作，其中进行步骤⑤和⑥时所用培养基的成分与富集培养基的差异是_____。培养基在配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是_____；实验室中对培养基进行灭菌的方法是_____。（3）若用A对应的接种方法培养了3个培养皿，菌落数分别为163个、158个、159个，若与其对照的_____，则可以推测富集培养后的菌液中每升含除氨菌数为_____，否则需要重新实验。【答案】（1）①.寄生、互利共生②.选择③.增加除氨菌的浓度（数量）（2）①.添加了一定量的琼脂②.先调节pH后灭菌③.高压蒸汽灭菌法（3）①.空白平板不被污染（或空白平板不能有菌落形成）②.1.6×109个【解析】【分析】1、富集培养可以使用液体培养基，选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。2、稀释涂布平板法计数：为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。3、计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。【小问1详解】蚯蚓与体内的微生物可能有寄生、互利共生关系。本实验的目的是筛选除氨菌，因此培养基中应以（NH4）2SO4为唯一氮源，从功能上讲该培养基属于选择培养基，在恒温箱中通过富集培养能增加培养液中除氨菌的浓度或数量。【小问2详解】图中步骤⑤和⑥中所用的培养基属于固体培养基，需要添加一定量的琼脂，而富集培养用的是液体培养基，不加琼脂。培养基在配制和灭菌时需要先调pH再进行灭菌。常用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。【小问3详解】若与其对照的空白平板不被污染，用稀释涂布平板法培养3个培养皿，菌落数分别为163个、158个、159个，则平均菌落数为（163+158+159）÷3=160个，富集培养后的菌液中每升（1L=1000mL）含除氨菌数为160÷0.1×1000（稀释倍数）×1000=1.6×109个。【点睛】本题考查了微生物分离和培养的相关知识，考生要明确选择培养基的选择作用；识记培养基为微生物提供的营养成分；识记常用的接种方法和具体操作过程，能正确分析图形，再结合所学知识正确答题。28.德尔塔变异株是目前新冠肺炎传播的主要变异株。新型冠状病毒和SARS病毒都会造成肺炎，如图是SARSCoVS蛋白特异性单克隆抗体的制备过程。研究该过程可为治疗新冠带来新希望。回答下列问题：（1）若只考虑细胞两两融合，图中甲理论上有_____种。（2）已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。小鼠的淋巴细胞有上述两种途径，但一般不分裂增殖，小鼠的骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能通过D途径不断分裂增殖。根据该原理，在含甲的混合培养液中添加氨基蝶呤_____（填“能”或“不能”）筛选出A，原因是_____。（3）SARSCoVS蛋白单克隆抗体_____（填“能”或“不能”）对新型冠状病毒发挥作用，理由是_____。（4）为了进一步研究SARSCoVS蛋白单克隆抗体X（以下简称抗体X）的效果及作用机制，科学家开展了如下实验：实验一：在体外将抗体X与SARSCoVS蛋白混合，检测抗体X对SARSCoVS蛋白的亲和力。实验结果如下表所示。（注：KD值越小，抗体和蛋白的亲和力越高；抗体Y为一种已知的SARS病毒的抗体。）抗体种类KD抗体X5．32×109M抗体Y1．95×109M实验二：以一定浓度的SARS病毒感染小鼠；一天后向小鼠腹腔分别注射一定剂量的抗体X、Y；14天后测定小鼠存活情况和体重变化。实验结果表明：抗体X的体内治疗效果优于抗体Y。①实验一结果表明：对SARSCoVS蛋白亲和力更高的抗体是_____。②分析实验一和实验二的结果差异，研究人员提出假说：抗体除了中和病毒活性之外，还可以通过和巨噬细胞表面的受体相结合，从而增强巨噬细胞的吞噬作用，进而清除被病毒感染的靶细胞。请以巨噬细胞、感染了SARS病毒的肺上皮细胞、细胞培养液、抗体X、抗体Y和无关抗体等为材料，设计实验验证上述假说。写出实验思路_____。【答案】（1）3##三（2）①.能②.杂交瘤细胞D途径被氨基嘌呤阻断后不能合成DNA，但可通过S途径合成DNA，不断分裂增殖（3）①.不能②.新冠病毒与SARS病毒的抗原不同，SARSCoVS蛋白单克隆抗体只能与SARSCoVS蛋白发生特异性结合（4）①.Y②.将巨噬细胞及感染了SARS病毒的肺上皮细胞分别加入A、B、C三组细胞培养液中，并向这三组培养液中分别加入无关抗体、抗体X和抗体Y，一段时间后检测并比较肺上皮细胞的裂解百分比【解析】【分析】单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。【小问1详解】若只考虑细胞两两融合，融合体系中有3种杂交细胞为骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞细胞杂交、淋巴细胞与淋巴细胞融合，以及所需的骨髓瘤细胞与淋巴细胞融合。【小问2详解】在含甲的混合培养液中添加氨基嘌呤后，已免疫的B细胞及其彼此融合的细胞能利用S途径进行DNA合成，但是无法进行分裂增殖，骨髓瘤细胞的D合成途径被阻断，所以骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，只有骨髓瘤细胞与已免疫的B细胞融合形成杂种细胞能利用S途径合成DNA并进行分裂增殖从而存活下来，所以在含甲的混合培养液中添加氨基嘌呤能筛选出杂交瘤细胞A。小问3详解】SARSCoVS蛋白单克隆抗体不能对新型冠状病毒发挥作用，因为新冠病毒与SARS病毒的抗原不同，SARSCoVS蛋白单克隆抗体只能与SARSCoVS蛋白发生特异性结合。【小问4详解】①由表格分析可知，抗体Y的KD值低于抗体X，说明抗体Y和SARSCoVS蛋白的亲和力高于抗体X。实验设计应该遵循单一变量和对照原则，该实验是为了探究抗体除了中和病毒活性之外，还可以通过和巨噬细胞表面的受体相结合，从而增强巨噬细胞的吞噬作用，进而清除被病毒感染的靶细胞。可以通过检测并比较肺上皮细胞的裂解百分比来验证假说。所以实验思路如下：②实验思路：将巨噬细胞及感染了SARS病毒的肺上皮细胞分别加入A、B、C三组细胞培养液中，并向这三组培养液中分别加入无关抗体、抗体X和抗体Y，一段时间后检测并比较肺上皮细胞的裂解百分比。【点睛】本题考查了单克隆抗体的制备过程的相关知识，考生掌握单克隆抗体的制备过程及其原理，能够利用动物细胞培养和细胞融合技术对相关问题进行解释，并能理解单克隆抗体的特性是解答本题的关键。29.图1是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图，载体质粒P0具有四环素抗性基因（tetr)和氨苄青霉素抗性基因（ampr）。请回答下列问题：（1）EcoRV酶切位点为，EcoRV酶切出来的线性载体P1为___________末端。（2）用TaqDNA聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段，其两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸。载体P1用酶处理，在两端各添加了一个碱基为___________的脱氧核苷酸，形成P2；P2和目的基因片段在__________酶作用下，形成重组质粒P3。（3）为筛选出含有重组质粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到A、B、C三类菌落，其生长情