机能实验学离体肠实验

机能实验学离体肠实验韶关学院医学院；2011级临床医学本科；机能实验学；11临床本科班；学号：112号；符宏展 机能实验学实验报告课题名称：传出神经药物对离体肠肌的作用院（系）：韶关学院医学院2011级临床医学本科班学生姓名：符宏展学号：112指导教师：梁俊辉二○一三年六月五日机能实验报告实验目录：1实验目的2实验装置和器材3实验药物4实验动物5实验原理6实验方法7实验注意事项8实验结果实验数据实验记录波型及静态测量数据9实验结果讨论10实验结论11实验思考实验操作原始（数据）记录及实验结果的分析实验时间：2013年6月5日(星期三晚上:7：00－10：00）实验同组人：马腱明符宏展朱佛妹叶超群黄小花张鹏黄锦霞如果实验有数据表格，学生在实验预习时应画好实验数据表格，供实验填写数据。实验结果：正常数据表格实验数据测量最大收缩力（g）最小舒张力（g）平均值（g）频率正常1.5390.2860.84814实验记录波型实验一：乙酰胆碱数据表格实验数据测量最大收缩力（g）最小舒张力（g）平均值（g）频率正常1.4220.2050.67914乙酰胆碱1.7370.2710.89116实验记录波型实验二：阿托品→乙酰胆碱数据表格实验数据测量最大收缩力（g）最小舒张力（g）平均值（g）频率正常0.6960.2050.40715阿托品0.5570.1610.29014乙酰胆碱1.0330.1690.48313实验记录波型实验三：肾上腺素数据表格实验数据测量最大收缩力（g）最小舒张力（g）平均值（g）频率正常1.0920.1610.50313肾上腺素0.5500.1470.31215实验记录波型实验四：普萘洛尔→肾上腺素→普萘洛尔数据表格实验数据测量最大收缩力（g）最小舒张力（g）平均值（g）频率正常1.3780.1910.66513普萘洛尔1.0040.1690.44212肾上腺素0.7030.1540.35012普萘洛尔0.6960.1540.33513实验记录波型实验五：酚妥拉明→肾上腺素→酚妥拉明数据表格实验数据测量最大收缩力（g）最小舒张力（g）平均值（g）频率正常0.9450.1690.44713酚妥拉明1.2240.1610.53313肾上腺素11.0260.1250.42512肾上腺素20.8570.1170.35112酚妥拉明0.7330.1100.30813实验记录波型实验六：普萘洛尔+酚妥拉明→肾上腺素→酚妥拉明→普萘洛尔→乙酰胆碱→阿托品数据表格实验数据测量最大收缩力（g）最小舒张力（g）平均值（g）频率正常1.0850.1390.49015普萘洛尔+酚妥拉明0.8210.1320.35613肾上腺素10.6080.1100.27912肾上腺素20.5130.0950.23613酚妥拉明0.4910.0950.225普萘洛尔10.4620.0950.222普萘洛尔20.3220.0880.173乙酰胆碱0.2420.1250.182阿托品0.2050.1030.152实验记录波型实验结果讨论：

正常情况下，我们观察到离体小肠平滑肌在台氏液中可以自动地、缓慢地收缩，但其节律性很不规则。小肠平滑肌自律性产生的离子基础尚未完全清楚，目前认为，它的产生可能与细胞膜上生电性钠泵的活动具有波动性有关，当钠泵的活动暂时受抑制时，膜便发生去极化；当钠泵活动恢复时，膜的极化加强，膜电位便又回到原来的水平。在浴槽中加入0.01%乙酰胆碱

（Ach

）2滴后，可见离体肠管活动增强，描记曲线出现收缩频率变快，幅度增加。出现上述现象的机理，目前认为与消化道平滑肌细胞产生动作电位的离子基础是Ca2+的内流有关。乙酰胆碱可与肌膜上的M受体结合，使得两类通道开放：一类为电位敏感性Ca2+专用通道，另一类为特异性受体活化Ca2+

专用通道。前一类通道对Ach敏感，小剂量Ach即引起开放；后一类通道对Ach相对不敏感，只有大剂量Ach才会引起开放。这两类通道开放都使得肌浆中

Ca2+增高，进而激活肌纤蛋白—肌凝蛋白—ATP系统，使平滑肌收缩，肌张力增加。在正常38度蒂罗德溶液先滴加阿托品，可见离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩频率变慢，幅度减小，这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体结合抑制的作用，很快又恢复到正常，可能因为阿托品被稀释或被氧化；1min后再加乙酰胆碱的小肠可见离体肠管活动增强，描记曲线出现幅度增加，但频率下降。频率下降可能是阿托品的拮抗作用，活动增强，描记曲线出现幅度增加，由于这次实验加的是高浓度的乙酰胆碱溶液，相对于低浓度的阿托品对平滑肌肌膜上M受体竞争性作用占优势，但没有单独使用乙酰胆碱明显。在浴槽中加入0.01%肾上腺素2滴后，可见离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩频率变慢，幅度减小。出现上述现象的机理，

目前认为与肠肌细胞膜上存在α和β两中受体，α受体又分为α抑制型受体和α兴奋型受体有关。肾上腺素作用于α抑制型受体，引起肠肌膜上一种特异性受体活化，使K+外流增多，细胞膜发生超极化，肠肌兴奋性降低，肌张力下降。同时，肾上腺素还作用于β受体，①它的激活引起肠肌细胞膜中的cAMP合成增

多，cAMP激活肠肌膜及肌浆网上Ca2+泵活动，使肌浆中Ca2+浓度降低，亦使肌张力降低；②β

受体激活后还促使K+及Ca2+外流增加，加速膜的超极化，促进了肠肌肌张力的减低；在浴槽中加入0.1%普萘洛尔2滴，普萘洛尔为非选择性竞争抑制肾上腺素β受体阻滞剂，β受体阻断作用较强，无内在拟交感活性，可见离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩频率变慢，幅度减小，与理论不符合，可能是小肠在离休环境下没有体内其他因素作用。2min后在浴槽中加入0.01%肾上腺素2滴后，可见离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩频率变慢，幅度减小，但没有单独使用肾上腺素明显。1min后在浴槽中加入0.1%普萘洛尔2滴，可见离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩频率增加，幅度减小。出现上述现象的机理，普萘洛尔阻断了肾上腺素对β受体的兴奋作用，从而减弱了肾上腺素对小肠平滑肌的抑制作用，可能小肠的β受体已完全被阻滞剂。在浴槽中加入0.1%酚妥拉明2滴，酚妥拉明为α肾上腺素受体阻滞药，对α1与α2受体均有作用，有拟胆碱作用，使胃肠平滑肌兴奋，可见离体肠管活动增强，描记曲线出现收缩幅度增加。2min后在浴槽中加入0.01%肾上腺素2滴，可见离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩频率变慢，幅度减小，但没有单独使用肾上腺素明显，也没有使用普萘洛尔后加肾上腺素明显。1min后在浴槽中加入0.1%普萘洛尔2滴，可见离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩频率增加，幅度减小。出现上述现象的机理，酚妥拉明阻断了肾上腺素对α受体的兴奋作用，有拟胆碱作用，使胃肠平滑肌兴奋，从而减弱了肾上腺素对小肠平滑肌的抑制作用，可能小肠的α受体已完全被阻滞剂。在浴槽中同时加入0.1%普萘洛尔2滴和0.1%酚妥拉明2滴，可见离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩频率变慢，幅度减小。2min后在浴槽中加入0.01%肾上腺素2滴，可见离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩频率变慢，幅度减小。1min在浴槽中同时加入0.1%酚妥拉明2滴，可见离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩频率变慢，幅度减小。1min后在浴槽中同时加入0.1%普萘洛尔2滴，可见离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩频率变慢，幅度减小。1min后在浴槽中同时加入0.1%普萘洛尔2滴，可见离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩频率变慢，幅度减小。1min后在浴槽中同时加入0.01%乙酰胆碱

，可见离体肠管活动减弱，描记曲线出现直线，幅度减小。1min后在浴槽中同时加入阿托品

，可见离体肠管活动减弱，描记曲线出现直线，幅度减小。出现上述现象的机理，普萘洛尔阻断了肾上腺素对β受体的兴奋作用，酚妥拉明阻断了肾上腺素对α受体的兴奋作用，从而减弱了肾上腺素对小肠平滑肌的抑制作用，可能小肠的β受体已完全被阻滞剂，可能小肠的α受体已完全被阻滞剂；在浴槽中同时加入0.01%乙酰胆碱后描记曲线出现直线，可能是小肠平滑肌收缩疲劳或者出现强直收缩，还有可能是乙酰胆碱浓度过高，出现乙酰胆碱中毒；在浴槽中同时加入阿托品后，不能解除乙酰胆碱中毒现象。实验结论：乙酰胆碱有兴奋小肠平滑肌M受体作用，便小肠收缩力增强，收缩频率加快。阿托品有拮抗乙酰胆碱的作用，便乙酰胆碱作用减弱。肾上腺素可兴奋小肠平滑肌α受体和β受体作用，便小肠收缩力减弱，收缩频率减慢。普萘洛尔有非选择性竞争抑制肾上腺素β受体阻滞作用，便肾上腺素对小肠的作用减弱。酚妥拉明有α受体阻滞作用，便肾上腺素对小肠的作用减弱。肾上腺素对小肠的β受体兴奋占优势。实验思考：1、试比较维持哺乳动物离体小肠平滑肌活动和维持离体蟾蜍心脏活动所需的条件有何不同？为什么？

答：心脏使用的是任氏液，而哺乳动物小肠使用的是蒂罗德溶液，心脏可以直接暴露在空气中，而小肠需要浸泡再蒂罗德溶液中，心脏可以在普通室温下进行实验，而小肠需要在接近37℃的水温下且要不断通气才有较为强烈的收缩活动，分析其原因：1.心脏的养料供给由心血管直接供给，将任氏液直接灌入心脏即可提供养料，而由于暴露在空气中所以不需要另外通空气，而小肠平时的养料由小肠外的肠系膜提供，离体后的小肠直接给肠管通台式液是不行的，必须将其浸泡在台式液中，而浸泡在其中必须通空气提供氧气；2.心脏和小肠本身所处的环境不同，取自的动物种类也不同，故用不同的营养液提供养料；3.心脏是取自变温动物蟾蜍，故不需要保持恒温，而小肠取自哺乳动物家兔，只有在合适的温度时才有活性，故需保持37℃恒温。2、制备小肠平滑肌