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文档简介
2023-08-06发布国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会I本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件代替GB/T26174—2010《厨房纸巾》,与GB/T26174—2010相比,除结构调整和编辑性改动外,主要技术变化如下:a)更改了范围的表述(见第1章,2010年版的第1章);b)增加了术语和定义(见第3章);c)更改了产品分类(见第4章,2010年版的第3章);d)更改了原材料要求(见第5章,2010年版的4.6);e)删除了横向吸液高度、横向抗张指数、纵向湿抗张指数的指标及相关试验方法(见2010年版的物质、丙烯酰胺、灰分、脱色性能、重金属、可分解致癌芳香胺染料的要求及相应试验方法(见第6章、第7章);g)更改了定量、D65亮度、版的第4章、第5章);h)更改了检验规则(见第8章,2010年版的第6章);i)更改了标志和包装(见第9章,2010年版的第7章);j)更改了微生物的试验方法(见附录E,2010年版的附录A)。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中国轻工业联合会提出。本文件由全国造纸工业标准化技术委员会(SAC/TC141)归口。本文件起草单位:中国制浆造纸研究院有限公司、中轻纸品检验认证有限公司、倍舒特(天津)卫生用品有限公司、优奈新材料(河南)有限公司、维达国际控股有限公司、中顺洁柔纸业股份有限公司、金红叶纸业集团有限公司、重庆理文卫生用纸制造有限公司、湖南恒安生活用纸有限公司、韶能集团广东绿洲生态科技有限公司、中轻(晋江)卫生用品研究有限公司、国家纸张质量检验检测中心。本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为:——2010年首次发布为GB/T26174—2010;——本次为第一次修订。1本文件规定了厨房纸巾的分类、原材料要求、技术要求、试验方法、检验规则及标志、包装、运输、贮存。本文件适用于厨房擦拭、清洁等用途的纸巾。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T450纸和纸板试样的采取及试样纵横向、正反面的测定GB/T451.1纸和纸板尺寸及偏斜度的测定GB/T462纸、纸板和纸浆分析试样水分的测定GB/T742造纸原料、纸浆、纸和纸板灼烧残余物(灰分)的测定(575℃和900℃)GB/T1535大豆油GB/T1541纸和纸板尘埃度的测定GB/T2828.1计数抽样检验程序第1部分:按接收质量限(AQL)检索的逐批检验抽样计划GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T7974纸、纸板和纸浆蓝光漫反射因数D65亮度的测定(漫射/垂直法,室外日光条件)GB/T10739纸、纸板和纸浆试样处理和试验的标准大气条件GB/T17592纺织品禁用偶氮染料的测定GB/T23344纺织品4-氨基偶氮苯的测定GB/T24328.3卫生纸及其制品第3部分:抗张强度、最大力值时伸长率和抗张能量吸收的测定GB/T24328.4—2020卫生纸及其制品第4部分:湿抗张强度的测定GB/T24328.5卫生纸及其制品第5部分:定量的测定GB/T24328.6卫生纸及其制品第6部分:吸水时间和吸水能力的测定篮筐浸没法GB/T24991纸、纸板和纸浆铅含量的测定石墨炉原子吸收法GB/T24992纸、纸板和纸浆砷含量的测定GB/T27741—2018纸和纸板可迁移性荧光增白剂的测定GB31604.49—2016食品安全国家标准食品接触材料及制品GB/T36420生活用纸和纸制品化学品及原料安全评价管理体系GB/T37859纸、纸板和纸制品丙烯酰胺的测定JJF1070—2005定量包装商品净含量计量检验规则QB/T5742本色浆23术语和定义下列术语和定义适用于本文件。植物纤维厨房纸巾kitchentowelfromplantfiber以原生植物纤维为原料生产的厨房纸巾。纤维原料中含有合成纤维(丙纶、涤纶等)或人造纤维(粘胶纤维、醋酸纤维等)的厨房纸巾。4分类4.1厨房纸巾按产品质量分为优等品和合格品。4.2厨房纸巾按纤维原料分为植物纤维厨房纸巾和其他纤维厨房纸巾。4.3厨房纸巾按颜色分为白色厨房纸巾、本色厨房纸巾、印花厨房纸巾和染色厨房纸巾。4.4厨房纸巾按包装形式分为卷筒厨房纸巾、盘式厨房纸巾、平切厨房纸巾和抽取式厨房纸巾。5原材料要求5.1厨房纸巾不应使用任何回收纸、纸张印刷品、纸制品及其他回收纤维状物质作原料。5.2本色厨房纸巾所使用的本色浆应符合QB/T5742的要求。5.3厨房纸巾原纸所用化学品和原料的安全评价与管理应符合GB/T36420的相关规定。6.1植物纤维厨房纸巾的技术指标应符合表1的规定。表1植物纤维厨房纸巾技术指标指标名称规定优等品合格品定量/(g/m²)D65亮度*/%吸水时间/s吸水能力/(g/g)吸油能力/(g/g)横向抗张强度(成品层)/(N/m)纵向湿抗张强度(成品层)/(N/m)3表1植物纤维厨房纸巾技术指标(续)指标名称规定优等品合格品洞眼/(个/m²)总数不应有(个/m²)总数0.2mm²~1.0mm²>1.0mm²~2.0mm²不应有不应有不应有灰分/%木浆(纤维)非木浆(纤维)'混合浆(纤维)交货水分/%”本色、印花和染色厨房纸巾不考核D65亮度指标。”指竹浆、麦草浆、蔗渣浆、苇浆等。指木浆与非木浆混合浆。6.2其他纤维厨房纸巾的技术指标应符合表2的规定。表2其他纤维厨房纸巾技术指标指标名称规定优等品合格品定量/(g/m²)(>20.0~40.0)±2.0(>40.0~80.0)±3.0D65亮度/%吸水时间'/s吸水能力/(g/g)吸油能力/(g/g)横向抗张强度(成品层)/(N/m)纵向湿抗张强度(成品层)/(N/m)掉粉率/%4表2其他纤维厨房纸巾技术指标(续)指标名称规定优等品合格品洞眼/(个/m²)总数不应有尘埃度/(个/m²)总数0.2mm²~1.0mm²>1.0mm²~2.0mm²不应有>2.0mm²不应有不应有交货水分/%本色、印花和染色厨房纸巾不考核D65亮度指标。”对于有网孔的产品,如试验时水滴穿透试样(而非被吸收),则该项目不考核。6.3厨房纸巾的化学性能指标应符合表3的规定。表3厨房纸巾化学性能指标指标名称规定可迁移性荧光物质无丙烯酰胺/(mg/kg)脱色性能*无脱色重金属*/(mg/kg)铅砷可分解致癌芳香胺染料“/(mg/kg)仅本色、印花和染色厨房纸巾考核该指标。6.4厨房纸巾的微生物指标应符合表4的规定。表4厨房纸巾微生物指标指标名称规定细菌菌落总数/(CFU/g)大肠菌群不应检出致病性化脓菌铜绿假单胞菌不应检出金黄色葡萄球菌不应检出溶血性链球菌不应检出真菌菌落总数/(CFU/g)56.5卷筒厨房纸巾和盘式厨房纸巾的宽度偏差、节距偏差应不超过士5mm;平切厨房纸巾和抽取式厨房纸巾的尺寸偏差应不超过士5mm,偏斜度应不超过3mm。6.7厨房纸巾净含量(质量、长度、数量)应符合JJF1070—2005中表3的规定。7试验方法7.1试样的采取和处理试样的采取按GB/T450进行。定量、吸水时间、吸水能力、吸油能力、横向抗张强度、纵向湿抗张强度测定时,试样的处理和试验的标准大气条件按GB/T10739的规定进行。定量按GB/T24328.5测定,以单层表示结果。D65亮度按GB/T7974测定。7.4吸水时间吸水时间按附录A测定。7.5吸水能力吸水能力按GB/T24328.6测定。7.6吸油能力吸油能力按GB/T24328.6测定,以符合GB/T1535的一级大豆油代替试验用标准水,沥干时间为(120±2)s。7.7横向抗张强度横向抗张强度按GB/T24328.3测定,按成品层测定。试样的宽度为(50.0±0.5)mm或(15.0±0.1)mm,仲裁时试样的宽度为(50.0±0.5)mm。7.8纵向湿抗张强度对于植物纤维厨房纸巾,测试前,需对样品进行加速老化(熟化)处理,处理温度为(105±2)℃,时间为15min;其他纤维厨房纸巾不需要进行加速老化(熟化)处理。然后按GB/T24328.4—2020测定,按成品层测定,采用卧式抗张强度试验仪,浸水时间为5s。7.9掉粉率掉粉率按附录B测定。7.10洞眼用双手持试样(成品层)的两角,用肉眼迎光观测,如果发现洞眼,用钢直尺测量洞眼的最大尺寸。6每个样品测定的试样(成品层)面积应不少于0.5m²,然后换算成每平方米(成品层)的洞眼数,如果出现大于5mm的洞眼,则应至少测定1m²的试样。7.11尘埃度尘埃度按GB/T1541测定,按成品层测定。即不论产品是单层、双层还是多层,均取至少0.25m²成品层试样,测定成品层两面的尘埃个数,然后换算成每平方米(成品层)的尘埃个数。本色厨房纸巾中纤维束杂质不作为尘埃计数。灰分按GB/T742测定,灼烧温度为575℃,灼烧时间为4h。7.13交货水分交货水分按GB/T462测定。7.14可迁移性荧光物质将试样置于紫外灯下,在波长254nm和365nm的紫外光下检查是否有荧光现象。如果试样在紫外灯下无荧光现象,则结果为无可迁移性荧光物质;如果试样有荧光现象,则按照GB/T27741—2018中第5章进行可迁移性荧光物质测定。7.15丙烯酰胺丙烯酰胺按GB/T37859测定。7.16脱色性能脱色性能按附录C测定。部分进行测定。也可按GB/T24991测定铅含量,按GB/T24992测定砷含量。仲裁时按GB31604.49—2016中第一部分进行测定。测试时应尽量在印刷或染色较深的部位取样。7.18可分解致癌芳香胺染料可分解致癌芳香胺染料按GB/T17592和GB/T23344进行测定,可分解致癌芳香胺清单按附录D。一般先按GB/T17592检测,当检出苯胺和(或)1,4-苯二胺时,再按GB/T23344检测。测试时应尽量在印刷或染色较深的部位取样。7.19微生物指标微生物指标按附录E测定。7.20尺寸偏差每个样品取3个完整试样,用分度值为1mm的钢直尺或钢卷尺测量每个试样(卷盘)的宽度,以3个7试样的平均宽度值减去标称宽度来表示宽度偏差,结果修约至1mm。任取1卷(盘)厨房纸巾,去除前5节后,连续取10节,用分度值为1mm的钢直尺分别测量10节中每节的长度,计算平均值,用平均值减去标称节距来表示该试样节距偏差,结果修约至1mm。从任一包装中取10张试样,用分度值为1mm的钢直尺测量每张试样的长度和宽度,并分别计算平均值,以平均值减去标称值来表示尺寸偏差,结果修约至1mm。7.21偏斜度偏斜度按GB/T451.1测定。7.22外观质量外观质量采用目测检验。测定时,应任选一整卷(盘、包)纸,完全打开目测检验。7.23净含量以质量单位标注净含量的厨房纸巾按JJF1070—2005中C.1测定,以长度单位标注净含量的厨房纸巾按JJF1070—2005中E.3测定,以计数标注净含量的厨房纸巾按JJF1070—2005中G.4测定。测定时,取3个完整包装进行检验,以3个包装中最大短缺量表示结果。8检验规则8.1检验分类产品出厂前应按本文件的要求逐批进行检验,检验项目见表5,符合本文件要求方可出厂。相同原料、相同工艺的同类产品每两年内应进行不少于1次型式检验,检验项目见表5,有下列情况之一时,也应进行型式检验:a)当原料、工艺发生重大改变时;b)产品首次投产或停产6个月以上后恢复生产时;c)生产场所改变时;d)出厂检验结果与上次型式检验有较大差异时;e)国家质量监督机构提出进行型式检验要求时。8.2检验项目出厂检验项目为常规检验项目,型式检验项目包括所有检验项目(有特殊规定除外),具体见表5。8表5检验项目序号检验项目出厂检验型式检验要求的章条号检验方法的章条号1定量2D65亮度3吸水时间4吸水能力5吸油能力6横向抗张强度7纵向湿抗张强度8掉粉率9洞眼尘埃度灰分交货水分可迁移性荧光物质丙烯酰胺脱色性能 重金属可分解致癌芳香胺染料 细菌菌落总数大肠菌群致病性化脓菌真菌菌落总数尺寸偏差偏斜度外观质量净含量8.3组批规则和抽样方案以相同原料、相同工艺、相同规格的同类产品一次交货数量为一批,每批不超过10000箱(件)。8.3.2.1厨房纸巾技术指标、化学性能指标、尺寸偏差、偏斜度、外观质量及净含量抽样检验程序按GB/T2828.1规定进行,样本单位为箱(件)。接收质量限(AQL):吸水时间、吸水能力、吸油能力、横向96.5。抽样方案采用正常检验二次抽样方案,检查水平为特殊检验水平S-3。其抽样方案见表6。表6抽样方案批量/箱(件)正常检验二次抽样方案特殊检验水平S-3样本量AQL=4.0AcReAQL=6.5AcRe2~503一—251~1503——5 一 一012288(16)0122—一5 ——0122501~320088(16)012203343201~10000033414358.3.2.2厨房纸巾微生物指标检验时,从检验批中随机抽取足够数量样本用于各项指标检验和留样,所抽取样本的包装不应有破损,测试前不应开启。样本技术指标分别满足6.1或6.2要求,则判定各项合格,否则判定不合格。样本化学性能指标分别满足6.3要求,则判定各项合格,否则判定不合格。样本微生物指标满足6.4要求,则判定该项合格,否则判定不合格。样本尺寸偏差、偏斜度满足6.5要求,则判定各项合格,否则判定不合格。样本外观质量满足6.6要求,则判定该项合格,否则判定不合格。样本净含量满足6.7要求,则判定该项合格,否则判定不合格。所有检验项目中,微生物指标检验结果不合格,则判定批不合格;技术指标、化学性能指标、尺寸偏差、偏斜度、外观质量及净含量第一次检验的样品数量应等于该方案给出的第一样本量。如果第一样本中发现的不合格品数小于或等于表6中的第一接收数,则判定批合格;如果第一样本中发现的不合格品数大于或等于表6中的第一拒收数,则判定批不合格。如果第一样本中发现的不合格品数介于表6中的第一接收数与第一拒收数之间,应检验由方案给出样本量的第二样本并累计在第一样本和第二样本中发现的不合格品数。如果不合格品累计数小于或等于表6中的第二接收数,则判定批合格;如果不合格品累计数大于或等于表6中的第二拒收数,则判定批不合格。9标志和包装9.1产品销售标识及包装9.1.1产品销售包装标识应至少包括以下内容:——产品名称;——执行标准编号;——主要原料名称;——产品质量等级;——生产日期和保质期,或生产批号和限用日期;——净含量:平切厨房纸巾应标注质量或张数,抽取式厨房纸巾应标注张数或抽数,卷筒厨房纸巾、盘式厨房纸巾应标注质量或节数或长度;——产品合格标志(进口产品除外);——生产企业(或产品责任单位)名称、地址、联系方式等。9.1.2产品的销售包装应能保证产品不受污染,销售包装上的各种标识信息应清晰且不易褪去,产品标志使用的汉字、数字和字母,其字体高度应不小于1.8mm。9.2产品运输包装标志运输包装标志应至少包括以下内容:——产品名称;——生产企业(或产品责任单位)名称、地址、联系方式等;——产品数量;——包装储运图形标志。10运输和贮存10.1厨房纸巾运输时采用洁净的运输工具,防止产品受到污染。10.2搬运时注意包装完整,不将纸件从高处扔下,以防损坏外包装。10.3厨房纸巾存放于干燥、通风、洁净的地方,并妥善保管。防止雨、雪及潮气侵入产品,影响质量。(规范性)吸水时间的测定方法A.1概述将厨房纸巾放置在不吸水的支撑装置上,用移液枪(管)向试样表面滴加0.1mL水,记录水被试样完全吸收所需要的时间。A.2仪器设备与材料分辨力0.01s。A.2.2支撑装置采用不吸水的材质(不锈钢、塑料、玻璃等)制成,长、宽、厚约为100mm×100mm×10mm,中心有一个直径约40mm的孔。A.2.3移液枪(管)能准确移取0.1mL水,误差不超过0.005mL。A.2.4水GB/T6682中规定的三级水。A.3试样的采取切取尺寸为100mm×100mm的成品层试样10张,并标记试样的正反面。A.4试验步骤A.4.1将一张试样平放在支撑装置(A.2.2)上,确保试样的边缘与支撑装置的边缘基本平齐,不要拉伸或扭曲试样以免影响测试结果。A.4.2用移液枪(管)(A.2.3)吸取0.1mL水(A.2.4),枪头距离试样中心位置高约5mm至10mm,枪身垂直于纸面将水全部滴加至试样表面。同时,启动电子秒表(A.2.1)开始计时。A.4.3待试样将滴加的水全部吸收时(镜面或反射亮光完全消失),停止计时,并记录该时间,即吸收时间。A.4.4重复A.4.1~A.4.3步骤,测定其他试样。每个样品正面测定5个试样,反面测定5个试样。A.5结果表示以10个试样测试结果的算术平均值表示结果,单位为秒(s),结果修约至小数点后一位。(规范性)掉粉率的测定B.1仪器和设备掉粉率测定仪:往返摆动次数:(180±2)次/min,摆动距离:(100±2)mm,称量传感器感量为0.01g,摆动时间采用计时器,掉粉率测定仪示意图见图B.1。图B.1掉粉率测定仪示意图B.2试验步骤B.2.1任取一卷(包)厨房纸巾,去除外包装,按下列方法进行取样:a)卷筒厨房纸巾、盘式厨房纸巾:将厨房纸巾折叠成长度约200mm的试样,折叠时长边方向保持平齐,取(100±5)g试样;b)抽取式厨房纸巾或平板厨房纸巾:将每张厨房纸巾展开叠放,叠放时长边方向保持平齐,取取样结束后,将试样放在GB/T10739规定的恒温恒湿条件下进行温湿处理4h。B.2.2将温湿处理后试样沓的其中一角固定在仪器的试样夹上(对折一次的试样沓固定时选择对折线上任一角,对折两次的试样沓固定时选择两次对折线的交叉点)。固定时应使试样的表面垂直于摆动方向,并确保测定过程中试样不应与箱体内壁接触,试样应夹持牢固,在确保试样夹持牢固的情况下,试样夹夹持试样的尺寸宜尽量小。B.2.3启动仪器,自动称量试样沓的质量m₁,并开始计时,试样沓在箱体内摆动2min。B.2.4摆动结束后,再次自动称量试样沓的质量m₂,关闭仪器,取下试样沓。在满足精度要求的前提下,可采用手动称量摆动前、后试样沓的质量,称量时注意避免粉、屑的掉落。注:试验过程中佩戴手套,轻拿轻放试样,以避免影响测试结果。B.3结果的表示试样的掉粉率按公式(B.1)测定。式中:X——试样的掉粉率,%;……………m₁——试样摆动前的质量,单位为克(g);m₂——试样摆动后的质量,单位为克(g)。每个样品测试两个试样,以两次测定值的算术平均值表示结果,结果修约至小数点后一位。注:如果出现试样摆动后的质量大于试样摆动前的质量的情况,测试结果以“0”计。(规范性)脱色性能的测定C.1试剂GB/T6682中规定的三级水。C.2仪器设备C.2.1比色管,容积为50mL。C.2.2恒温水浴锅。C.2.3其他常规实验室玻璃仪器。C.3试验步骤C.3.1任取1张厨房纸巾,裁成100mm×100mm的成品层试样。如果试样的尺寸小于100mm,则取面积为0.01m²的试样。裁取时应选择印花或染色部位(本色厨房纸巾除外)。将试样放入盛有水(C.1)的200mL烧杯中,使试样被完全浸没。浸泡10min后,将试样浸泡液倒入比色管(C.2.1)中。试验过程中,应采用恒温水浴锅(C.2.2)确保试样浸泡液维持在(40±2)℃。C.3.4每个样品测试两个试样。如果两个试样的浸泡液均未染有颜色,则报告该样品脱色性能测试结果为无脱色。如果两个试样的浸泡液均染有颜色,则报告该样品脱色性能测试结果为脱色。如果两个试样中有一个浸泡液染有颜色,则重新取两个试样进行试验,当重新选取的两个试样的浸泡液均未染有颜色,则报告该样品脱色性能测试结果为无脱色,否则报告为脱色。(规范性)可分解致癌芳香胺清单表D.1给出了可分解致癌芳香胺清单。表D.1可分解致癌芳香胺清单序号化学品名14-氨基联苯(4-aminobiphenyl)92-67-12联苯胺(benzidine)92-87-534-氯-邻甲苯胺(4-chloro-o-toluidine)95-69-242-奈胺(2-naphthylamine)91-59-85邻氨基偶氮甲苯(o-aminoazotoluene)97-56-365-硝基-邻甲苯胺(5-nitro-o-toluidine)99-55-87对氯苯胺(p-chloroaniline)82,4-二氨基苯甲醚(2,4-diaminoanisole)615-05-494,4'-二氨基二苯甲烷(4,4'-diaminobiphenymethane)3,3'-二氯联苯胺(3,3'-dichlorobenzidine)91-94-13,3'-二甲氧基联苯胺(3,3'-dimethoxybenzidine)3,3'-二甲基联苯胺(3,3'-dimethylbenzidine)3,3'-二甲基-4,4'-二氨基二苯甲烷(3,3'-dimethy1-4,4'-diaminobipheny-838-88-02-甲氧基-5-甲基苯胺(p-cresidine)4,4'-亚甲基-二-(2-氯苯胺)[4,4'-methylene-bis-(2-chloroaniline)]4,4'-二氨基二苯醚(4,4'-oxydianiline)4,4'-二氨基二苯硫醚(4,4'-thiodianiline)邻甲苯胺(o-toluidine)95-53-42,4-二氨基甲苯(2,4-toluylendiamine)95-80-72,4,5-三甲基苯胺(2,4,5-trimethylaniline)邻氨基苯甲醚(o-anisidine)90-04-04-氨基偶氮苯(4-aminoazobenzene)2,4-二甲基苯胺(2,4-xylidine)95-68-12,6-二甲基苯胺(2,6-xylidine)87-62-7GB/T26174—2023(规范性)微生物的测定E.1产品采集与样品处理E.1.1于同一批号的3个运输包装中至少抽取6件最小销售包装样品(若样品数量不能满足实验所需,则应相应增加采样数量),其中1/3样品用于检测,2/3样品用于留样。抽样的最小销售包装不应有破裂,检验前不应开启。E.1.2在空气洁净度5级净化条件下用无菌方法打开用于检测的至少2个包装,从每个包装中取样,准确称取10g±1g样品。剪碎后加入200mL灭菌生理盐水或改良肉汤培养液(MLTBL,含中和剂)中,充分混匀,得到一个生理盐水或中和剂样液。E.1.3如被检样品具有抗菌作用,应选择适宜的中和剂中和,稀释梯度最高不超过1:100。无相应中和剂则选用薄膜过滤法去除样品中抗菌成分对微生物生长的影响,再按E.1.2制备样液。E.2细菌菌落总数检测方法E.2.1操作步骤按E.1得到的生理盐水或中和剂样液自然沉降后取上清液,如需要可进行10倍系列稀释。选择适宜的稀释度进行菌落计数。共接种2个平皿,每个平皿中加入2.0mL样液,然后用冷却至40℃~45℃的熔化的营养琼脂培养基15mL~20mL倒入每个平皿内混合均匀。待琼脂凝固后翻转平皿置36℃±1℃培养48h,计算平皿上的菌落数。E.2.2菌落计数菌落呈片状生长的平皿不宜采用,确保2块平皿符合计数要求并进行菌落计数,按公式(E.1)计算结果:式中:A₁——细菌菌落总数,单位为每克菌落形成单位(CFU/g);A₀——2块营养琼脂培养基平皿上的细菌菌落总数,单位为菌落形成单位(CFU);K——稀释倍数,单位为毫升每克(mL/g);(2×2)---2块平皿,每块平皿接种2mL样液。首先选取平均菌落数在30CFU~300CFU之间的平皿。当菌落数在100CFU以内,按实有数报告,大于或等于100CFU时采用两位有效数字;当2块营养琼脂培养基平皿上的细菌菌落总数<1CFU时,应当报告细菌菌落总数<5CFU/g。E.2.3结果报告E.2.3.1如经首次检测,样品细菌菌落总数符合本文件的规定,直接按检测结果报告。E.2.3.2如经首次检测,样品细菌菌落总数超过本文件的规定,应用留存的样品依前法复测2次,然后才能报告结果。当2次复测结果都达到本文件的规定,则判定被检样品合格,以2次合格结果的均值报告;其中有任何1次复测结果超过本文件规定,则判定被检样品不合格,以所有不合格结果的均值报告。E.3大肠菌群检测方法E.3.1.1增菌培养:取样液5mL接种至50mL乳糖胆盐发酵管内,置36℃±1℃培养18h~24h,如不产酸也不产气,则报告为大肠菌群阴性。E.3.1.2分离培养:如产酸产气,则划线接种伊红美蓝琼脂平皿,置36℃±1℃培养18h~24h,观察平皿上菌落形态。典型的大肠菌落为黑紫色或红紫色,圆形,边缘整齐,表面光滑湿润,常具有金属光E.3.1.3染色镜检与鉴定:取疑似菌落1~2个做革兰染色镜检,同时接种乳糖发酵管,置36℃±1℃培养18h~24h,观察产酸产气情况。E.3.2结果报告凡乳糖胆盐发酵管产酸产气,乳糖发酵管产酸产气,在伊红美蓝平皿上有典型大肠菌群菌落,革兰染色为阴性无芽孢杆菌,可报告被检样品检出大肠菌群。E.4铜绿假单胞菌检测方法E.4.1.1增菌培养:取样液5mL,加入50mLSCDLP培养液中,充分混匀,置36℃±1℃培养18h~24h。如有铜绿假单胞菌生长,培养液表面呈现一层薄菌膜,培养液常呈黄绿色或蓝绿色。E.4.1.2分离培养步骤如下。a)从培养液的薄菌膜处挑取培养物,划线接种十六烷三甲基溴化铵琼脂平皿,置36℃±1℃培养18h~24h,观察菌落特征。铜绿假单胞菌在此培养基上生长良好,菌落扁平,边缘不整,菌落周围培养基略带粉红色。b)在缺乏十六烷三甲基溴化铵琼脂时也可用乙酰胺培养基进行分离,将菌悬液划线接种于平皿上,置36℃±1℃培养18h~24h,观察菌落特征。铜绿假单胞菌在此培养基上生长良好,菌落扁平,边缘不整,菌落周围培养基略带粉红色。E.4.1.3染色镜检:取鉴定培养基上可疑菌落涂片做革兰染色,镜检为革兰阴性菌者还需按E.4.1.4~E.4.1.8进行试验。E.4.1.4氧化酶试验:取一小块洁净的白色滤纸片放在灭菌平皿内,用无菌玻棒挑取鉴定培养基上可疑菌落涂在滤纸片上,然后在其上滴加一滴新配制的1%二甲基对苯二胺试液,30s内出现粉红色或紫红色,为氧化酶试验阳性,不变色者为阴性。亦可使用商品化的氧化酶试纸或试剂进行检测。E.4.1.5绿脓菌素试验:取鉴定培养基上2~3个可疑菌落,分别接种在绿脓菌素测定用培养基斜面,36℃±1℃培养24h,加入三氯甲烷3mL~5mL,充分振荡使培养物中可能存在的绿脓菌素溶解,待三氯甲烷呈蓝色时,用吸管移到另一试管中并加入1mol/L的盐酸1mL,振荡后静置片刻。如上层出现粉红色或紫红色即为阳性,表示有绿脓菌素存在。E.4.1.6硝酸盐还原产气试验:取鉴定培养基上可疑菌落接种在硝酸盐胨水培养基中,置36℃±1℃培养24h,培养基小倒管中有气者即为阳性。E.4.1.7明胶液化试验:取鉴定培养基上可疑菌落纯培养物,穿刺接种在明胶培养基内,置36℃±1℃培养24h,取出放于4℃~10℃,如仍呈液态为阳性,凝固者为阴性。E.4.1.842℃生长试验:取鉴定培养基上可疑培养物,接种在普通琼脂斜面培养基上,置42℃培养24h~48h,有铜绿假单胞菌生长为阳性。E.4.2结果报告被检样品经增菌分离培养后,证实为革兰阴性杆菌,氧化酶及绿脓菌素试验均为阳性者,即可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。如绿脓菌素试验阴性而液化明胶、硝酸盐还原产气和42℃生长试验三者皆为阳性时,仍可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。E.5金黄色葡萄球菌检测方法E.5.1.1增菌培养:取样液5mL,加入到50mLSCDLP培养液中,充分混匀,置36℃±1℃培养E.5.1.2分离培养:自增菌悬液(见E.5.1.1)中取1~2接种环,划线接种在血琼脂培养基上,置36℃±1℃培养24h~48h。在血琼脂平皿上典型菌落呈金黄色,大而凸起,圆形,不透明,表面光滑,周围有溶血圈。在BairdPark培养基上为圆形,光滑,凸起,湿润,直径为2mm~3mm,颜色呈灰色到黑色,周围为一混浊带,在其外层有一透明带,用接种针接触菌落似有奶油树胶的软度。偶尔会遇到非脂肪溶解的类似菌落,但无混浊带及透明带。E.5.1.3染色镜检:挑取典型菌落,涂片做革兰染色镜检,金黄色葡萄球菌为革兰阳性球菌,排列成葡萄状,无芽孢与荚膜。镜检符合上述情况,还需进行甘露醇发酵试验和血浆凝固酶试验。E.5.1.4甘露醇发酵试验:取血琼脂平皿上典型菌落接种甘露醇培养液,置36℃±1℃培养24h,发酵甘露醇产酸者为阳性。E.5.1.5血浆凝固酶试验:试管法:吸取1:4新鲜血浆0.5mL,放灭菌小试管中,加入等量待检菌24h肉汤培养物0.5mL,混匀,放36℃±1℃温箱或水浴中,每30min观察一次,24h之内呈现凝块即阳性。同时以已知血浆凝固酶阳性和阴性菌株肉汤培养物各0.5mL作为阳性与阴性对照。E.5.2结果报告凡在琼脂平皿上有可疑菌落生长,镜检为革兰阳性呈葡萄状排列的球菌,并能发酵甘露醇产酸,血浆凝固酶试验阳性者,可报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。E.6溶血性链球菌检测方法E.6.1操作
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