细菌耐药基因blaNDM常见亚型的环介导等温扩增检测技术_第1页
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文档简介

14.1BstDNA聚合酶。2细菌单菌落,经二次纯化后,挑取单菌落于BHI营养肉汤中过夜培养12h~18h,用于提取细菌基因组收集过夜培养的待检细菌菌液1mL(菌液浓度的OD600值大于1.0)到1.5mL的EP管中,12000g离心2min,彻底弃上清,取沉淀用商品化的细菌基因组DNA提取试剂盒提取细菌基因组总D12345BstDNA聚合酶67blaNDM-1基因的洛菲不动杆菌基因组DNA(300ng/);312法为:1、对核酸提取和扩增进行严格分区,2、反应全程禁止开启反应管。3、配置LAMP反应在冰上进行,操作BstDNA聚合酶时不能用涡旋振荡器过激搅拌,避免酶的失活,应该使用轻轻弹击反7.1.1反应结束后,观察反应管内液体的颜色和状态,如果底部出现与阳性对保持稳定电压80V,电泳20min,电泳反应结束后,在三羟甲基氨基甲烷(Tris)108g乙二胺四乙酸(Na2EDTA.2H2O)7.44g5__

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