β-arrestin1对BV2小胶质细胞系中NLRP3炎症小体的作用

β-arrestin1对BV2小胶质细胞系中NLRP3炎症小体的作用答辩学生：指导老师：答辩时间：CONTENTS目录研究背景1研究目的2研究内容3研究结果41研究背景1.1小胶质细胞背景介绍——生理功能1.2小胶质细胞与炎症——小胶质细胞活化表型1.3炎症小体背景介绍——组成和激活1.4NLRP3激活与神经退行性疾病1.5β-arrestin1背景介绍——生理功能研究背景研究目的研究内容研究结果1.1小胶质细胞背景介绍——生理功能神经发育免疫监测吞噬死亡神经元、凋亡细胞和髓鞘碎片促进血管再生和血管构建重构突触：修剪、剥离和重塑神经再生和轴突再生MolNeurobiol.2016Nov9研究背景研究目的研究内容研究结果1.2小胶质细胞与神经炎症——小胶质细胞活化表型ProgNeurobiol.2015Aug;131:65-86研究背景研究目的研究内容研究结果1.3炎症小体背景介绍——组成和激活炎症小体的感受器可通过自身蛋白水解作用参与炎症小体的激活活化并募集caspase-1核苷酸结合区域，调节炎症小体寡聚化Annu.Rev.CellDev.Biol.2012研究背景研究目的研究内容研究结果1.3炎症小体背景介绍——组成和激活naturereview,2014研究背景研究目的研究内容研究结果1.4炎症小体与神经退行性疾病naturereview,2014研究背景研究目的研究内容研究结果1.5β-arrestins背景介绍——生理功能InnateImmun.

2014Jul;20(5):451-60GenesImmun.

2015Dec;16(8):5762研究目的应用BV2细胞制备LPS炎症损伤模型，研究、阐明β-arrestin1对NLRP3炎症小体激活过程中的作用。3研究内容研究背景研究目的研究内容研究结果3.1

LPS模型中β-arr1的表达情况CON组LPS（100ng/ml,6h）ATP（5mM,30min）LPS+ATP组BV2cells吸弃上清，收集细胞蛋白Westernblotting检测β-arrestin1表达情况六孔板研究背景研究目的研究内容研究结果3.2干扰β-arr1后，炎症因子分泌情况LPSLPSATPATPNC组Si-β-arr1组NC（LA）组Si-β-arr1（LA）组收集上清qPCR检测干扰效率收集细胞蛋白Westernblotting检测炎症相关因子：Caspase-1、IL-1β、Pro-Caspase-1、Pro-IL-1β以及β-arrestin1六孔板研究背景研究目的研究内容研究结果3.3LDH释放法检测细胞活性LPSLPSATPATPNC组Si-β-arr1组NC（LA）组Si-β-arr1（LA）组96孔板收集上清LDH释放法检测细胞死亡率4研究结果研究背景研究目的研究内容研究结果4.1BV2细胞给予LPS+ATP刺激，β-arrestin1表达上调。CONLPS+ATPAβ-arrestin1β-actin—43kD—53KDBn=3，与CON组相比：*P<0.05。研究背景研究目的研究内容研究结果4.2BV2细胞转染siRNA48h，β-arrestin1的干扰效率为77%。n=3，与NC组相比：***P<0.001。研究背景研究目的研究内容研究结果4.3干扰BV2细胞β-arrestin1，给予LPS＋ATP刺激后，上清中caspase-1和IL-1β表达显著下调。LPS+ATP—34kD—45kD—43kD—17kD—20kDCaspase-1β-actinPro-IL-1βIL-1βPro-caspase-1SiRNANCNCSiRNAAn=3，pro-IL-1β的统计图，与NC组相比，无统计学差异；与NC（LPS+ATP）组相比无统计学差异。BCn=3，pro-caspase-1的统计图，与NC组相比，无统计学差异；与NC（LPS+ATP）组相比无统计学差异。研究背景研究目的研究内容研究结果4.4干扰BV2细胞β-arrestin1，给予LPS＋ATP刺激后，LDH释放减少。n=3，与CON组相比：*P<0.0