关于胆红素的若干问题

关于胆红素的若干问题宋克征（总工程师）宁波美康生物科技有限公司学术讲座5/8/20241关于胆红素的若干问题珠蛋白COFe2+胆绿素还原酶NADPH+H+NADP+Hb血红素胆绿素胆红素血红素加氧酶系一、来源单核-巨噬细胞系统（网状内皮系统）（一）胆红素的代谢5/8/20242关于胆红素的若干问题胆红素线状结构胆红素的X线衍射结构二、结构与性能5/8/20243关于胆红素的若干问题三、胆红素在血液中的运转白蛋白与胆红素结合的意义（1）可以进入血液循环。（2）可以阻止胆红素透过细胞膜，进入血脑屏障。5/8/20244关于胆红素的若干问题四、与胆红素竞争白蛋白的因素pH环境和钙离子某些阴离子药物：磺胺类抗菌素、巴比妥和水杨酸盐游离脂肪酸等白蛋白的分子浓度5/8/20245关于胆红素的若干问题五、胆红素在肝细胞内的代谢胆红素葡萄糖醛酸一酯胆红素葡萄糖醛酸二酯（结合胆红素）摄取结合排入胆汁血液白蛋白－胆红素（间）白蛋白胆红素（间）连接蛋白－胆红素连接蛋白2UDP葡萄糖醛酸2UDP葡萄糖醛酸基转移酶（滑面内质网）连接蛋白肝细胞结合胆红素5/8/20246关于胆红素的若干问题双葡萄糖醛酸酯占85-90％单葡萄糖醛酸酯占10-15％六、结合胆红素的结构5/8/20247关于胆红素的若干问题七、胆红素在肠道的运转进入新一轮的胆红素代谢5/8/20248关于胆红素的若干问题（二）黄疸黄疸的分类（1）

溶血性黄疸，肝前性黄疸（2）肝细胞黄疸，肝性黄疸（3）阻塞性黄疸，肝后性黄疸（4）体质性黄疸，慢性先天性黄疸5/8/20249关于胆红素的若干问题（三）δ胆红素一、δ胆红素的结构和性能二、δ胆红素存在的意义5/8/202410关于胆红素的若干问题一、δ胆红素的结构和性能δ胆红素的半衰期为17-23天δ胆红素不被肝细胞摄取，不能通过肾小球85%δ胆红素与重氮试剂呈直接反应δ胆红素具有良好的稳定性δ胆红素有一个新名称——胆蛋白非酯型酯型5/8/202411关于胆红素的若干问题二、δ胆红素存在的意义胆红素多了一个成分。

TBIL=Bu＋mBc+dBc＋Bδδ胆红素的发现让人们认识到临床好转但黄疸不退的真实原因。δ胆红素的出现让人们懂得了用测Bc代替直接胆红素的测定，这样可以更加直接地了解真实病情。计算Bδ/TBIL有助于判断恢复期肝病的预后。δ胆红素在正常人以及高Bu病人（新生儿黄疸）中缺乏。δ胆红素仅在那些脂型高胆红素血症的病人血清中被检测到。5/8/202412关于胆红素的若干问题（四）新生儿胆红素一、新生儿的生理性黄疸50-60%足月产的婴儿和大于80%的早产儿于出生后2-3天出现黄疸，4-5天出现高峰。一般足月儿两周内消退，早产儿3-4周消退。生理性黄疸的上限：足月儿<205.2μmol/L早产儿<257μmol/L二、病理性黄疸的特点1.生后24小时内出现2.重症黄疸>205-265μmol/L3.持续时间长4.可以退而再现5/8/202413关于胆红素的若干问题三、核黄疸的风险下面列出的数据供我们检验新生儿胆红素的时候作为警戒性的参考足月新生儿胆红素>308-362μmol/L

早产病弱儿胆红素>137-205μmol/L

有可能出现新生儿的核黄疸。提示尽快进入蓝光治疗。光疗十分有效，胆红素会迅速下降。用420-470nm波长，每日可下降51.3-85.5μmol/L。光疗的机理在蓝光照射下，体内的胆红素很快会从ZZ构型转化为EE构型，使胆红素的极性增加，能溶于水，从而有害的毒性胆红素（Bu）会大量从尿和胆汁中排出体外。5/8/202414关于胆红素的若干问题（五）胆红素的检测一、SFDA对胆红素测定的新要求标准化：企业标准、行业标准、国家标准，逐级升高。量值溯源：通过一条比较链，使检测的结果或标准值与国家标准联系起来。检测系统：完成一个项目所涉及的仪器、试剂、校准品、质控品、操作程序等的组合，量值溯源要求采用整个检测系统。基体效应5/8/202415关于胆红素的若干问题基体效应分析样品中，除分析物以外的所有其他物质和组分，称为该分析物的基体，亦称“介质”或“基质”。检测系统检测样品中的分析物时，处于分析物周围的所有非分析物对分析物参与反应的影响，称基体效应。对定标和质控的基体效应应予以特别关注。对基体效应大小的估计强调采用回收实验。5/8/202416关于胆红素的若干问题二、测准胆红素的基本方法方法不复杂，测准很困难！胆红素的特性——不稳定存在三怕：怕热、怕光、怕氧化罗氏公司对胆红素不稳定的估计cfas校正液使用说明书对胆红素可用的稳定时间的规定TBILDBIL15-25℃

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2周2周（只许融冻一次）5/8/202417关于胆红素的若干问题正常值质控异常值质控

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2周2周（只许融冻一次）5/8/202418关于胆红素的若干问题3.基本方法的设计必须充分考虑、周到地照顾到以上关于稳定时限的规定。安排好定标和质控的两个环节，是能否测准的根本关键。在实际的操作中，思想上要有“动”的观念，去观察分析结果而作相应的修正，如果观察不仔细，很容易脱靶，使结果超出允许范围。5/8/202419关于胆红素的若干问题三、化学氧化法测胆红素的实践按检测系统规定做好准备，实施举例如下：仪器：Hitachi7060试剂：美康化学氧化法测总直胆红素双试剂校准品：以罗氏cfas为模板，美康公司自产T/D两项混合校正液（冻干品）质控品：以罗氏高低二水平质控为模板，美康公司自产T/D两项混合质控液（冻干品）操作参数5/8/202420关于胆红素的若干问题5.操作参数方法：两点终点法；反应总时间，10分钟；光径，1.0cm；波长，546nm/450nm（主）；样品:R1:R2为8:240:60(μL)步骤：样品＋R1孵育5分钟，测空白吸光度A1，

加入R2反应5分钟，测最后吸光度A2。计算：5/8/202421关于胆红素的若干问题6.注意贯彻“动”的观念，具体操作严格做到定标与质控使用中严格遵守规定的时限要求，还要做到同步操作。以上规定，可随不同牌号的仪器，做适当的修改，但不能改动比例。结果评判：试剂空白吸光度<0.01

准确度：优等，靶值±10％以内及格，质控进入允许范围线性范围：TBIL>684μmol/LDBIL>342μmol/L

r2≥0.995几点体会5/8/202422关于胆红素的若干问题d.几点体会对临床的肝细胞黄疸、阻塞型黄疸样品直胆/总胆≥50%有时DBIL结果出现零值。这是正常现象，答案应在胆红素代谢中去找。权威杂志上