营销班天然药物化学第一章

营销班天然药物化学第一章

课程简介1.计划学时:182.使用教材:卫生部规划教材<<天然药物化学>>(第6版)人民卫生出版社吴立军主编3.主讲教师:王莉宁第2页,共99页，2024年2月25日，星期天

个人情况简介姓名:王莉宁工作部门：中药学院药物化学教研室(5楼)研究方向:药用植物有效成分研究电话:02259596221(办)e-mail:2479570761@

第3页,共99页，2024年2月25日，星期天

第一节绪论一﹑天然药物化学的性质：

是运用现代科学理论与方法研究天然药物中化学成分的一门学科。化学理论和方法——化学理论是基础

物理学方法——色谱学、波谱学是工具第4页,共99页，2024年2月25日，星期天二、天然药物化学的研究内容：各类天然药物的化学成分(主要是生理活性成分或药效成分)的结构特征、理化性质、提取分离方法、主要类型化学成分结构测定以及生物合成途径等。主要化学成分类型结构特征理化性质提取分离结构测定生物合成第5页,共99页，2024年2月25日，星期天※几个术语:

1.生物活性成分经过不同程度的药效试验或生物活性实验，包括体外（invitro）及体内（invivo）实验，证明对机体具有一定生物活性的成分。

※生物活性成分并不一定是真正代表天然药物临床疗效的有效成分。

第6页,共99页，2024年2月25日，星期天2.有效成分（ActiveConstituents):

即单体化合物,具以下特点:

(1).能用分子式和结构式表示;(2).具有一定的理化常数;(3).具有一定的生理活性.3.有效部位（ActiveExtracts）

1)指具有生物活性的有效部位，如：总生物碱、总皂苷或总黄酮等；

2)指某一极性部位。第7页,共99页，2024年2月25日，星期天4.无效成分（

AnactiveConstituents）：与有效成分共存的无生理活性的其它成分;※

有效成分与无效成分的概念是相对的.5.杂质**注释：辩证理解上述术语的相互关系。第8页,共99页，2024年2月25日，星期天天然药物化学家第一代（30-40年代）

赵承嘏黄鸣龙庄长恭高怡生第二代（50-60年代）

朱子清林启寿邢其毅梁晓天黄量姜达衢周维善王宪楷赵守训

第三代（70-80年代）

徐任生姚新生于德泉周俊孙南君陈耀祖贾忠健陈延庸张如意潘德济陈英杰闵知大

第四代（80-90年代）

陈仲良孙汉董吴厚民王锋鹏

……

第9页,共99页，2024年2月25日，星期天植物体内的物质代谢与生物合成过程三羧酸循环（TCA）丁酮二酸α-酮戊二酸丁二酸鞣酸类CO2H2Ohυ

/

叶绿素磷酸烯醇式丙酮酸甲戊二羟酸丙酮酸乙酰辅酶A丙二酸单酰辅酶A赤藻糖4-磷酸葡萄糖代谢莽草酸苯丙素类芳香族氨基酸脂肪族氨基酸嘌呤、嘧啶脂肪酸类萜类甾醇胡萝卜素类δ-氨基乙酰丙酸核苷核苷酸类醌类胆碱卟啉类前列腺素类脂肪族及芳香族聚酮类生物碱类肽类含氮化合物香豆素、木脂（质）素黄酮类第10页,共99页，2024年2月25日，星期天

第三节

提取分离方法一、天然药物资源中化学成分的主要类型

1、脂类（1）油脂：甘油脂肪酸酯等;

（2）蜡：为脂肪酸和脂肪醇生成的酯类。（3）甾醇类：β-谷甾醇、α-菠甾醇等（4）磷脂第11页,共99页，2024年2月25日，星期天

2、色素（1）分为脂溶性色素和水溶性色素两类。（2）常见脂溶性色素如叶绿素(卟啉类化合物)和叶黄素、胡萝卜素（四萜）等。

3、萜类（1）有单萜、多萜之分。（2）挥发油：主要为单萜和倍半萜类成分。第12页,共99页，2024年2月25日，星期天4、生物碱:有游离生物碱与生物碱盐。5、苷类（1）分为黄酮苷、蒽醌苷、苯丙素苷、强心苷、皂苷等；（2）苷：极性大,易溶于热水、醇。苷元：极性小,难溶于水。6、鞣质（tannins）：是结构复杂的多元酚类化合物

第13页,共99页，2024年2月25日，星期天(1)可水解鞣质;(2)缩合鞣质（多聚体）

(3)鞣质的性质：

a.多为黄色至褐色的无定形粉末；

b.易溶于水、乙醇、丙酮及乙酸乙酯；

c.可水解鞣质与三氯化铁试剂显蓝至蓝黑色，缩合鞣质显绿至黑绿色；

d.鞣质与蛋白质结合形成不溶于水的沉淀.

第14页,共99页，2024年2月25日，星期天7、糖8、氨基酸、蛋白质和酶9、有机酸10、无机成分二、天然药物有效成分的提取

目的物为已知成分或已知化学结构类型者;

目的物为未知有效成分或有效部位.第15页,共99页，2024年2月25日，星期天（一）常用提取方法

1.升华法①原理：利用某些具有升华性质的化合物遇热汽化上升，遇冷后又凝固的性质从药材中提取该类成分。②适用范围：具有升华性质，而且化学结构遇热稳定、不易被破坏的化合物。③具有特异性高，所得化学成分较纯.第16页,共99页，2024年2月25日，星期天④应用范围窄是该法缺点。⑤操作方法：常压升华；减压升华2.水蒸汽蒸馏法：①原理：利用某些挥发性成分能随水蒸气蒸发的性质。②适用范围：能随水蒸气蒸发而且化学结构遇热稳定、不易被破坏的挥发油、小分子生物碱或酚类化合物。第17页,共99页，2024年2月25日，星期天③优点：对于具有挥发性，而且化学结构遇热稳定、不易被破坏的化合物，该方法特异性高，所得化学成分较纯。3.溶剂提取法①原理：利用天然药物的化学成分在特定溶剂中能够溶解的性质。②天然药物多数情况下采用溶剂提取法。第18页,共99页，2024年2月25日，星期天（二）溶剂提取法1、溶剂选择的依据—

“相似者相溶”原则；2、常用溶剂（按亲水性增加排列如下）：环己烷∼石油醚→苯→乙醚→氯仿→乙酸乙酯→正丁醇→丙酮→乙醇→甲醇→水。●极性最大的有机溶剂：甲醇●极性最小的有机溶剂：环己烷●溶解范围最广的有机溶剂：乙醇第19页,共99页，2024年2月25日，星期天选择的溶剂被提取成分石油醚脱脂（脂类、色素、萜类等）苯、乙醚、氯仿、乙酸乙酯甾类、萜和挥发油、生物碱、各种苷元正丁醇苷乙醇、甲醇蛋白、多糖以外的各类成分水苷、生物碱盐、鞣质、氨基酸、蛋白、糖重点溶剂选择与被提取成分对照表第20页,共99页，2024年2月25日，星期天3、溶剂选择的原则①目标成分易溶，杂质成分难溶；②惰性，不与目标成分反应，即使发生反应也应该属于可逆性的；③经济、安全、后续操作容易进行。4、根据提取溶剂的种类不同，可以将溶剂提取法分为四种（1）水提取法第21页,共99页，2024年2月25日，星期天适用范围：适用于水溶性成分。如：苷类、生物碱盐、有机酸盐、糖、蛋白质、氨基酸、鞣质等化学成分的提取。优点：经济、安全、无毒。缺点：(1)含杂质多，不易纯化；

(2)体积大，沸点高，不好浓缩；

(3)容易发霉；难过滤；

(4)加热时易糊化等。第22页,共99页，2024年2月25日，星期天（2）醇提取法

※常用的醇:甲醇、乙醇以及不同浓度的甲醇、乙醇水溶液※适用范围：除蛋白质和多糖以外的其他各种水溶性和脂溶性成分。※优点：较为便宜易得，醇兼有亲水性和亲脂性，对植物细胞渗透力强，可提多种成分。※缺点：易燃，甲醇有一定毒性。第23页,共99页，2024年2月25日，星期天（3）亲脂性有机溶剂提取法※常用有机溶剂：正丁醇、乙酸乙酯、氯仿、乙醚、苯以及石油醚等※适用范围：有机溶剂种类不同，提取成分不同。通常规律如下：◆正丁醇——

苷类；◆乙酸乙酯——

黄酮类；◆氯仿——

生物碱类及苷元类；第24页,共99页，2024年2月25日，星期天◆乙醚、苯——游离的黄酮、香豆素、蒽醌、甾类、萜类等苷元以及挥发油等；◆石油醚——

挥发油、脂类、色素、树脂※优点：选择性强，可除去水溶性杂质。※缺点：◆价格昂贵；多数易燃，特别是乙醚；◆有些毒性大，如苯和氯仿(现多为甲苯,CH2Cl2代替)；◆不适于大规模生产。

第25页,共99页，2024年2月25日，星期天（4）超临界流体萃取技术※超临界流体（SCF）：当一种物质处于其临界温度与临界压力以上的状态时，将形成既非液体又非气体的单一相态。※超临界流体特点:

兼有气、液两重性，即密度接近于液体，而粘度和扩散系数又与气体相似，因而它不仅具有与液体溶剂相当的萃取能力，而且具有优良的传质效果。第26页,共99页，2024年2月25日，星期天※实际操作过程:

控制体系的压力和温度萃取出所需要的物质，然后通过降压或升温的方法，降低超临界流体的密度，使萃取物得到分离。※常用作超临界流体的物质：二氧化碳等

※适用范围：挥发油及脂溶性成分※缺点：所需仪器设备价格昂贵第27页,共99页，2024年2月25日，星期天◆二氧化碳作为超临界流体具有下列优点：

1）临界温度为31.2℃（近于室温）；

2）临界压力在73个大气压，易于操作；

3）安全、不燃烧、化学上安定；

4）可防止被萃取物的氧化；

5）无毒；

6）价廉易得。第28页,共99页，2024年2月25日，星期天◆超临界流体萃取技术的优点：1）操作范围广，便于调节；2）选择性好；3）萃取、分离一步完成；4）溶剂回收简便，且可循环使用；5）萃取效率高，速度快；6）低温操作，特别适合于热敏性组分；7）可以调节萃取物的粒度；8）无有机溶剂残留。第29页,共99页，2024年2月25日，星期天5、天然药物的预处理如无特殊规定，药材须干燥并适当粉碎，以利增大与溶剂的接触面积，提高萃取效率。6、根据操作方法不同将溶剂法分为：（1）煎煮法：

※适用范围：以水为溶剂的体系（2）浸渍法(浸泡法)※适用范围：以水、醇或稀醇为溶剂的体系第30页,共99页，2024年2月25日，星期天（3）渗漉法

※适用范围：一般是以水、醇或稀醇为溶剂时采用此法，使用其他有机溶剂时也可采用。（4）连续回流提取法（索氏提取）

※适用范围：以醇或其他有机溶剂的体系.（5）超声法

※适用范围：适用于任何溶剂提取体系。第31页,共99页，2024年2月25日，星期天第32页,共99页，2024年2月25日，星期天小结提取方法溶剂提取法水蒸气蒸馏法升华法溶剂操作方法水：极性最强亲水性有机溶剂：甲醇、乙醇、丙酮亲脂性有机溶剂：石油醚，苯，乙醚，氯仿，乙酸乙酯煎煮法浸渍法渗漉法回流提取法连续回流提取法超声提取法第33页,共99页，2024年2月25日，星期天二、中药有效成分的分离与精制分离依据：共存成分的性质差异1.溶解度差异2.分配比不同3.吸附性差异4．分子大小差异5．离解程度不同第34页,共99页，2024年2月25日，星期天1.根据物质的溶解度差异进行分离调节温度改变混合溶剂的极性调节PH加入某种沉淀试剂第35页,共99页，2024年2月25日，星期天

1、溶剂分离法

采用三、四种不同极性的溶剂，由低级性到高级性分步进行分离。①正己烷→乙醚→甲醇→水②正己烷→二氯甲烷→甲醇→水第36页,共99页，2024年2月25日，星期天

一般极性顺序（低到高）：

石油醚→CS2→CCl4→HCCl2CH2Cl→苯→CH2Cl2→CHCl3→乙醚→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→甲醇→乙腈→水→吡啶→乙酸第37页,共99页，2024年2月25日，星期天

1)影响分离的因素①分离因子β，分配系数Kβ=Ka/Kb，Ka>Kb

K=CU/CL

CU、CL为被分离物质在上相和下相中浓度

2、两相溶剂萃取法

利用混和物中各成分在两种互不相溶的溶剂中分配系数不同而达到分离的方法。第38页,共99页，2024年2月25日，星期天

根据β值的大小可决定分离采用的方法

β>100,简单的一次萃取，可基本分离。β≈10，数次乃至10余次萃取，CCD法β≦2，100次以上萃取，DCCC法，HSCCC法β≈1，不能分离可以根据PC法计算β值，选择理想的分离条件。第39页,共99页，2024年2月25日，星期天

纸色谱（PC），也叫纸分配色谱（PPC，PaperPartitionChromatography）

(γ为纸色谱定数)Rfa、Rfb为A、B两物质在PC上的Rf值第40页,共99页，2024年2月25日，星期天

②pH值

对于酸性、碱性和两性化合物，pH值可以改变它们的存在状态（游离型、解离型），分配比受pH的影响。第41页,共99页，2024年2月25日，星期天

∵

HA+H2O=A-+H3O+pKa=pH-log[A-]/[HA]pH=pKa+log[A-]/[HA]HA达到99%解离时，pH=pKa+2HA达到99%游离时，pH=pKa-2第42页,共99页，2024年2月25日，星期天

2)酸碱性成分的分离---pH梯度萃取法

按酸碱性强弱的不同分离酸性、碱性、中性物质，改变pH值使酸碱成分呈不同状态。如中药大黄中的大黄酸、大黄素和大黄酚的分离第43页,共99页，2024年2月25日，星期天

大黄酸大黄素大黄酚酸性最强酸性其次酸性最弱溶于NaHCO3溶于Na2CO3溶于NaOH第44页,共99页，2024年2月25日，星期天

3)几种逆流分配方法

逆流分溶法液滴逆流色谱高速逆流色谱第45页,共99页，2024年2月25日，星期天

①逆流分溶法（CCD法）

多次连续液-液萃取分离过程特点：条件温和，样品易回收，适用于中等极性、不稳定物质的分离。

实验室萃取设备：1、分液漏斗2、克雷格逆流分布仪。第46页,共99页，2024年2月25日，星期天

克雷格逆流分布仪

把一系列的分液漏斗有效地排成链，重复进行系列的步骤：振摇（混合）、静置、分离，多次重复，以提高分离的塔板数。第47页,共99页，2024年2月25日，星期天

②液滴逆流色谱（DCCC）

液液分配色谱，流动相呈液滴形式垂直上升或下降，通过固定相，实现物质的逆流色谱分配。特点：不易乳化，样品可定量回收，分离效果好，特别适合于分离皂苷等水溶性成分。缺点：样品处理量小。

第48页,共99页，2024年2月25日，星期天

液滴逆流色谱第49页,共99页，2024年2月25日，星期天

③高速逆流色谱（HSCCC）

通过特定的高速行星式旋转所产生的离心力场作用，使无载体支持的液体固定相稳定地保留在蛇形管内，并使流动相单向、低速通过固定相，实现连续逆流萃取分离物质的目的。

用于各种物质的分离，包括蛋白质、酶、三萜、生物碱、皂苷等。第50页,共99页，2024年2月25日，星期天

4)液-液分配柱色谱

①正向色谱固定相极性大，如水、缓冲液等；流动相极性小，如氯仿、乙酸乙酯等载体：硅胶（含水一般大于17%），硅藻土、纤维素等。分离极性较大或水溶性成分，如苷类、糖、生物碱等。洗脱顺序：极性小的物质先被洗脱出来。第51页,共99页，2024年2月25日，星期天

4)液-液分配柱色谱

固定相极性小于流动相，如HPLC反相色谱柱、反相薄层色谱板。固定相：硅胶的硅醇基与烷基结合，如RP-2、RP-8、RP-18，亲脂性：RP-18>RP-8>RP-2流动相（洗脱剂）：MeOH-H2O；CH3CN-H2O洗脱顺序：分离极性大的成分，极性大者先被洗脱出来。②反相色谱：第52页,共99页，2024年2月25日，星期天

固定相的表面修饰

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三、根据物质的吸附性差别进行分离---吸附色谱法

1、吸附分类物理吸附：无选择性吸附，吸附-解吸附发生迅速，吸附剂如硅胶、氧化铝、活性炭等；化学吸附：不可逆吸附，如碱性氧化铝对酚酸性成分的吸附；酸性硅胶对生物碱的吸附等；半化学吸附：聚酰胺对酚酸类、醌类的氢键吸附。第54页,共99页，2024年2月25日，星期天

吸附原理：相似相吸

影响吸附过程的三要素：吸附剂（固定相）溶质（被分离物质）溶剂（洗脱剂、展开剂、流动相）

第55页,共99页，2024年2月25日，星期天

2、硅胶、氧化铝

极性吸附剂：载样量大，吸附力强硅胶：有中性、酸性之分，适用于各类成分分离。氧化铝：有中性、酸性、碱性之分，不适合于分离酸性成分，多用于分离生物碱。第56页,共99页，2024年2月25日，星期天

2、硅胶、氧化铝

①被分离物质吸附力与结构的关系

被分离物质极性大，吸附力强，难洗脱，Rf值小。官能团极性大小排列顺序：-COOH>Ar-OH>R-OH>R-NH2、RNHR’、RNR’R’’>RCONRR’>RCHO>RCOR’>RCOOR’>ROR’>RH第57页,共99页，2024年2月25日，星期天

2、硅胶、氧化铝

②溶剂（洗脱剂）的极性与洗脱力的关系洗脱剂极性越大，洗脱力越强；第58页,共99页，2024年2月25日，星期天

例：从黄花夹竹桃果仁中分离到七种强心苷成分，根据极性大小推测从硅胶柱上的洗脱顺序。

名称RR’黄夹苷ACHO(D-glc)2黄夹苷BCH3(D-glc)2黄夹次苷ACHOH黄夹次苷BCH3H黄夹次苷CCH2OHH黄夹次苷DCOOHH单乙酰黄夹次苷BCH3H单乙酰黄夹次苷BR’’=COCH3, 其它R’’=H第59页,共99页，2024年2月25日，星期天

答案：1：极性大→极性小，黄夹苷A>黄夹苷B>黄夹次苷D>黄夹次苷C>黄夹次苷A>黄夹次苷B>单乙酰黄夹次苷B2：从硅胶柱上被洗脱下来的顺序：极性小的先被洗出，极性大的后被洗出。第60页,共99页，2024年2月25日，星期天

3、活性炭----非极性吸附剂

①吸附力与结构的关系分子量大者>分子量小者芳香族>脂肪族，活性炭和芳香族均有平面型分子的缘故。含OH、COOH、NH2多者>少者第61页,共99页，2024年2月25日，星期天

3、活性炭----非极性吸附剂

②溶剂的洗脱力

吡啶>15%酚/醇>7%酚/H2O>醇>含水醇>H2O黄酮、生物碱的富集，糖的分离，脱色等。③应用第62页,共99页，2024年2月25日，星期天

4、聚酰胺（Polyamide）

由己酰胺聚合成的一类高分子化合物。分离原理：主要通过酰胺与酚、酸、醌等化合物形成氢键，吸附能力取决于氢键的强弱。第63页,共99页，2024年2月25日，星期天

4、聚酰胺

①吸附能力与化合物结构的关系a.形成氢键的基团数目越多，吸附力越强；第64页,共99页，2024年2月25日，星期天

4、聚酰胺

b.形成分子内氢键者，吸附力减弱；c.分子中芳香化程度高，则吸附性增强；反之，则减弱；第65页,共99页，2024年2月25日，星期天

4、聚酰胺②溶剂洗脱能力强弱

尿素水溶液>二甲基甲酰胺>甲酰胺>NaOH水溶液>丙酮>甲醇>水第66页,共99页，2024年2月25日，星期天

③聚酰胺色谱的应用4、聚酰胺

聚酰胺对一般酚类、黄酮类化合物的吸附是可逆的（鞣质例外），分离效果好，吸附容量大，特别适合于该类物质的制备与分离。也可用于生物碱、萜类、甾体、糖类、氨基酸等其它极性与非极性化合物的分离；聚酰胺对鞣质的吸附特别强，近乎不可逆，特别适合于植物粗提物的脱鞣处理。第67页,共99页，2024年2月25日，星期天

二、沉淀法

在提取液中加入某些溶剂使产生沉淀，以获得有效成分或除去杂质的方法。1、乙醇沉淀法2、酸碱沉淀法3、铅盐沉淀法第68页,共99页，2024年2月25日，星期天

浓提取液中的有效成分在乙醇中不溶或溶解度小。如：淀粉、树胶、蛋白质、某些多糖。1、乙醇沉淀法特别适合于多糖的分离多糖。第69页,共99页，2024年2月25日，星期天

如：内酯类化合物不溶于水，但遇碱开环生成羧酸盐而溶于水，酸化又析出。2、酸碱沉淀法

利用某些成分在酸（或碱）中溶解，又在碱（或酸）中沉淀的性质达到分离的方法。第70页,共99页，2024年2月25日，星期天

蛔蒿中提取驱蛔有效成分山道年

蛔蒿粉末用石灰乳调匀，加热水提取，山道年成为山道年酸钙被水提出，水提取液过滤浓缩后，加酸酸化，山道年沉淀析出，滤集，用乙酸重结晶可得纯品。第71页,共99页，2024年2月25日，星期天

生物碱不溶于水，遇酸生成盐而溶于水，碱化又重新生成游离生物碱。第72页,共99页，2024年2月25日，星期天

生物碱沉淀剂可形成不溶性复盐而析出。如雷氏铵盐NH4[Cr(NH3)2(SCN)4]

陈皮甙，黄芩甙等均可用酸碱沉淀法制备。R=葡萄糖醛酸第73页,共99页，2024年2月25日，星期天

3、铅盐沉淀法

中性Pb(Ac)2或Pb(OH)Ac在水或稀醇中，能与多种成分生成难溶的铅盐或络盐沉淀，利用此性质使有效成分与杂质分离。

中性醋酸铅可沉淀：有机酸、蛋白质、氨基酸、鞣质、树脂、酸性皂甙等。

碱性醋酸铅可沉淀除上述外，另加醇性羟基、酮基、醛基、中性皂甙、异黄酮、糖类。第74页,共99页，2024年2月25日，星期天

将铅盐悬浮于新溶剂中，通入H2S，使其分解为PbS，得有效成分。

也可用H2SO4、Na2SO4、H3PO4、Na3PO4脱铅。脱铅第75页,共99页，2024年2月25日，星期天

三、盐析法

在有效成分提取液中，加入无机盐使溶解至一定浓度或达饱和状态，可使某些成分在水中的溶解度降低，析出沉淀与水溶性大的杂质分离。常用盐：NaCl、Na2SO4、MgSO4、(NH4)2SO4例：三七水提取液中，加MgSO4到饱和状态，三七皂甙即可沉淀析出。

三颗针中提取黄连素，加NaCl饱和，小薜碱粗品析出。第76页,共99页，2024年2月25日，星期天

四、透析法

利用小分子物质在溶液中可通过半透膜，大分子则不能通过半透膜的性质进行分离的方法。

如分离纯化皂甙、蛋白质、多肽、多糖等大分子时，用此法可除无机盐、单、双糖等小分子杂质。

透析膜的膜孔有大有小，视具体情况而选择，常用透析膜：动物性膜、火棉胶膜、硫酸纸膜、玻璃纸膜等。第77页,共99页，2024年2月25日，星期天

五、结晶、重结晶和分步结晶

关键：合适的溶剂六、层析法1、柱层析2、薄层层析3、纸层析4、凝胶层析（又称凝胶过滤、分子筛过滤、阻滞扩散层析、排阻层析等）第78页,共99页，2024年2月25日，星期天

4、凝胶层析（GelPenetrationChromatography,GPC）

①葡聚糖凝胶

交联葡聚糖是由一定平均分子量的葡聚糖和交联剂（一般为环氧氯丙烷）以醚桥的形式互相交联形成的三维空间网状结构高分子材料，是水不溶性的白色球状颗粒，酸性环境能水解，碱中稳定。

在样品通过一定孔径的凝胶固定相时，由于流经路径的不同，使不同相对分子量的组分得以分离的方法。第79页,共99页，2024年2月25日，星期天

表面有孔隙，其大小决定于聚糖与交联剂的配比及反应条件。

商品型号即按凝胶的交联度大小分类，并以吸水量来表示，英文字母G代表葡聚糖凝胶，后面的数字表示每克凝胶吸水量，再乘以10的值，G-25的吸水量为每克2.5ml。

交联度大→网状结构越紧密→孔隙越小→吸水膨胀越少。第80页,共99页，2024年2月25日，星期天

型号吸水量（ml/g）床体积（ml/g）分离范围最小溶胀时间肽与蛋白质多糖室温沸水G-101.02~3小于700小于70031G-151.52.5~3.5小于1500小于150031G-252.54~61000~5000100~500062G-505.09~111500~3万500~1万62G-757.512~153000~7万1000~5万243G-1001015~20400015万1000`10万485G-1501520~305000~40万1000~15万725G-2002030~405000~80万1000~20万725凝胶的型号与使用范围第81页,共99页，2024年2月25日，星期天

1、气相色谱2、液相色谱3、制备色谱八、仪器气相色谱仪的原理和结构第82页,共99页，2024年2月25日，星期天第四节结构研究法结构研究的特点：难于合成品结构研究的总原则:

尽可能不消耗或少消耗试样波谱综合分析与文献数据比较必要时辅以化学手段第83页,共99页，2024年2月25日，星期天第四节结构研究法一、纯度的测定二、结构研究的主要程序三、结构研究中采用的主要方法第84页,共99页，2024年2月25日，星期天一、纯度的测定纯度检查法：均一的晶形敏锐的熔点、沸点、折光率、比旋度TLC、PC、GC、HPLC第85页,共99页，2024年2月25日，星期天二、结构研究的主要程序第86页,共99页，2024年2月25日，星期天三、结构研究中采用的主要方法1.确定分子式，计算不饱和度2.质谱（MS，massspectrum）3.红外光谱（IR，infraredspectra）4.紫外-可见吸收光谱（UV-vis)(ultraviolet-visiblespectra）5.核磁共振（NMR，nuclearmagneticresonance）6.其他：

x-单晶衍射法旋光光谱（ORD）园二色谱（CD）第87页,共99页，2024年2月25日，星期天三、结构研究中采用的主要方法

——

1.确定分子式，计算不饱和度分子式的确定元素定量分析结合分子量测定同位素丰度比法高分辨质谱（HR-MS，highresolutionmassspectrum）

不饱和度的计算u=Ⅳ－Ⅰ/2＋Ⅲ/2＋1Ⅰ：一价原子数如H、XⅢ：三价原子数，如N、PⅣ：四价原子数，如C第88页,共99页，2024年2月25日，星期天三、结构研究中采用的主要方法

——

2.质谱（MS，massspectrum）作用：确定分子量、分子式提供部分结构信息

——丢失碎片的大小如15、17

——碎片的m/z及裂解方式第89页,共99页，2024年2月25日，星期天三、结构研究中采用的主要方法

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2.质谱（MS，massspectrum）常用质谱技术及特点电子轰击质谱（EI-MS，electronimpactionization）场解析质谱（FD-MS，fielddesorptionionization）快速原子轰击质谱（FAB-MS，fastatombombardment）电喷雾质谱（ESI-MS，electrosprayionization）基质辅助激光解析质谱（MALDI-MS）

matrix-assistedlaserdesorptionionization

第90页,共99页，2024年2月25日，星期天常用质谱技术及特点——电子轰击质谱（EI-MS）

（electronimpactionization）样品需加热气化，离化，得到M+难气化、易热解的成份测不到M+

如糖、苷、氨基酸、肽、蛋白、核酸、抗生素第91页,共99页，2024年2月25日，星期天常用质谱技术及特点——场解析质谱（FD-MS）

fielddesorptionionization试样稀液涂于钨丝上作阳极，对面加阴极，通高压，使电离难气化、易热解的成份，可得到分子离子相关峰：[M＋H]+、[M＋Na]+、[M＋K]+

逐个脱去糖基的碎片峰：[M＋H-162]+、[M＋H-162-146]+苷元的碎片离子相对少第92页,共99页，2024年2月25日，星期天常用质谱技术及特点——快速原子轰击质谱（FAB-MS）

fastatombombardment离子枪发射高能离子与另一中性粒子碰撞，交换电荷，