动药生物制品考试重点

生物制品学：是在微生物学、免疫学和传染病学的根底上，承受生物学、生物化学及生物工程学等技术和方法，争论和制备生物制品，用于解决人、畜疫病防治的一门兴应用学科。生物制品：依据免疫学原理，利用微生物、寄生虫及其代谢产物或免疫应答产物〔血清〕等为原料，承受生物学、生物化学以及生物工程学的方法加工制成的、用于传染病或其它有关疾病的预防、诊断和治疗的生物制剂传染病：即传染性疾病，是由病原体引起的、能在人与人、动物与动物或人与动物之间相互传染的疾病。基因缺失疫苗:利用基因工程技术，在DNA水平上造成毒力有关基因的缺失或突变，即切去基因组中编码致病性物质的某一片段核苷酸序列或使其突变，使该微生物致病性丧失，但仍保持其免疫原性及复制力量。冻干:又称冷冻真空枯燥或冷冻枯燥。是将含有大量水分的生物活性物质，经预先冻结成固体，再在真空和低温条件下使固体水分子直接升华成水蒸气，最终使生物活性物质形成疏松多孔状、体积不变的枯燥制品，这一过程称冷冻枯燥，简称冻干。酶标二抗:酶标抗体是指与底物结合后能显色的酶与抗体连接后所制备的结合物。酶标二抗即酶标记的抗抗体〔抗异种动物的抗体。如兔抗猪酶标二抗、兔抗鸡酶标二抗。GMP类毒素:细胞在生长生殖过程中所产生的外毒素，经化学药品〔0.3-0.4%甲醛〕处理后，成为无毒性而保存其免疫原性的生物制剂。免疫佐剂:但凡可以增加抗原特异性免疫应答的物质均称为佐剂,也称免疫佐剂。DNA疫苗：又称核酸疫苗，是应用基因工程技术将编码某种抗原蛋白质的外源基因与载体重组后直接导入动物体内，利用免疫原基因在宿主体内表达出的抗原蛋白质引起机体的免疫应答，以到达预防和治疗疾病的目的。灭活:指破坏或杀灭微生物使其成为无生命物质的过程，即破坏微生物的生物学活性、生殖力量及致病性，但尽可能保存其免疫原性。基因工程亚单位疫苗：指利用基因工程技术所构建的重组表达载体在高效表达系统中表达出来的强毒病原体的某种免疫原性成分而制成的疫苗。类毒素：又称脱毒毒素，细胞在生长生殖过程中所产生的外毒素，经化学药品〔如0.3-0.4%甲醛〕处理后，成为无毒性而保存其免疫原性的生物制剂。多联疫苗：指利用不同种微生物的增殖培育物或其代谢产物，按免疫学原理、方法组合而成的疫苗。冻干：冻干又称冷冻真空枯燥或冷冻枯燥。是将含有大量水分的生物活性物质，经预先冻结成固体，再在真空和低温条件下使固体水分子直接升华成水蒸气，最终使生物活性物质形成疏松多孔状、体积不变的枯燥制品，这一过程称冷冻枯燥，简称冻干。灭活疫苗：又称死苗，以含有细菌和病毒的材料利用物理的或化学的方法处理，使其失去感染性或毒性而保存其免疫原性，接种机体后能产生自动免疫，预防疫病的一类生物制品。高免血清：为含有高效价特异性抗体的血清制剂。即动物经反复屡次地免疫后，机体的体液尤其是血清中就产生大量抗此中抗原的抗体，实行次此种动物的血液分别所得血清，即为高免血清、免疫血清、抗血清。二填空人工获得弱毒株的途径有化学途径、物理途径和生物途径三种。依据生物制品生产的性质，可将其分为疫苗、类毒素、诊断制品、抗病血清、微生态制剂和副免疫产品六大类。破伤风类毒素是将破伤风杆菌所产生的外毒素经过化学制品处理而制成的一种具有免疫原性生物制剂。生物制品生产中，培育病毒的方法有动物培育法、细胞培育法和鸡胚培育法 三种。属于人工主动免疫用的生物制品有类毒素和疫苗抗体、抗毒素血清及高免卵黄液等，主要用于发病时的紧急性免疫接种和治疗。细胞的培育方法有静置培育、转瓶培育、悬浮培育、微载体培育、中空纤维培育法和微囊化技术培育法六大类。在灭活疫苗的制备过程中，最常用的灭活剂是甲醛。在破伤风抗毒素的精制过程中常参加胃蛋白酶对制品进展处理其作用是将H链从铰链区二硫键的近C端切断获得两个大小不同的片段 。生物制品生产中，培育病毒的方法有动物培育法、细胞培育法和鸡胚培育法三种。依据佐剂在体内存留时间的长短，可将免疫佐剂分为储存型佐剂和非储存型佐剂两大类，常用的白油佐剂、Al(OH)3胶均属于储存型佐。诊断液包括诊断抗原和诊断抗体两大类。三、简答题1．单价疫苗、多价疫苗和多联疫苗有何不同？答：一、制备不同：1〕单价苗是利用同一种微生物菌〔毒〕株或同一种微生物菌〔毒〕株的单一血清型菌〔毒〕株的增殖培育物制备。2〕多价苗是用同一种微生物中假设干血清型菌〔毒〕株的增殖培育物制备。3〕多联苗是利用不同微生物增殖培育物，按免疫学原理和方法组合而成。二、接种后的效果不同：1〕作用，而不能使免疫动物获得完全的免疫保护。2〕多价苗能是免疫动物获得完全的保护力，且可在不同地区使用。3〕多联苗接种动物后，能产生对相应疾病的免疫保护，具有削减接种次数和使用便利等优点，具有一针防多病的生物制剂。2．凝集反响抗原和沉淀反响抗原各有何特点？对于可溶性抗原假设欲应用于凝集试验，该怎麽处理？答：凝集反响抗原是颗粒性抗原，在有电解质存在条件下，能与特异性抗体结合，形成肉眼可见的凝集现象。沉淀反响抗原为胶体状态的可溶性抗原，与相应抗体相遇，在两者比例适宜并有电解质存在时，抗原抗体相互交联形成免疫复合物达肯定大时，即消灭肉眼可见的沉淀。沉淀抗原是细胞浸出成分，为微小的胶体溶液，体积小而总面积大，反响时需要的抗体量多。制备时先取可溶性抗原，然后将抗原应用物理吸附/化学偶联的方法连接在颗粒性载体〔红细胞、乳胶、炭〕上，制成间接凝集抗原，用于正向间接凝集反响〔被动凝集反响〕。3．欲制备兔抗鸡〔二抗〕高免血清，试设计一制备方案〔免疫程序〕，并举例说明其在免疫学诊断中的具体应用。制备程序：实行鸡血、分别IgGIgG接种于家兔〔一般３次，每次间隔１０天左右，剂量递增〕→最终一次注射后１０左右采血检测其琼扩效价，达１：３２－６４以上时，大量采血，分别血清，即得到兔抗鸡高免血清。高效价特异性兔抗鸡〔二抗〕高免血清在鸡病的诊断和抗体检测中具有格外重要的作用，主要用于酶联免疫吸附试验〔ELISA)。4答：加温枯燥：经预冻后即进入真空枯燥阶段。该过程分两个阶段。①升华枯燥阶段：加温使制品温度到达共熔点温度，在共熔点温度下将冻结物质中的水分除去的过程称为升华，即升华枯燥阶段。在升华枯燥阶段可除去85%以上的水分。②解吸枯燥阶段：使与物质结合的水分子通过加25-3015-30Pa下进展解吸枯燥。此阶段可除10%的水分5.生物制品生产中培育细菌的方法有哪几种?各有何特点？答：有固体外表培育法；液体静置培育法；液体深层通气培育法；透析培育法。固体外表培育法：可依据需要调整细菌浓度，但产量低，劳动强度大。液体静置培育法：操作简便，但细菌数量一般不高。液体深层通气培育法：加速细菌分裂生殖，缩短培育时间，提高细菌数量。透析培育法：培育基和培育液可独立掌握；可以搅拌和通气；可使用任何类型的透析膜和滤膜；液体在透析器中的流向和流速可以把握；可将每个局部按比例缩小和放大，有利于制备高效力的生物制品。四、问答题1.简述常规疫苗的种类和特点答:常规疫苗包括灭活疫苗〔死苗〕和活疫苗。死苗：是以含细菌、病毒的材料，用物理化学方法处理，使之失去感染性或毒性而保存免疫原性，接种后能使机体产生自动免疫，预防疾病的生物制品。优点:1〕安全，不存在返祖返强、散毒，从而造成疫源的危急；2〕易保存、运输，不许低温保存及特别运输条件；3〕稳定，便于制备多价或多联苗；4〕对母源抗体的干扰作用不敏感。2〕免疫途径受限，一般需注射；3〕不加佐剂效果差，免疫期短；4〕不产生局部免疫，主要产生体5〕用量大，价格较贵。活疫苗：人工诱变的弱毒株或筛选出的自然弱毒株制成，弱毒株对原宿主丧失致病力或亚临床感染，但仍保存免疫原性和遗传特性。可多途径接种，如滴鼻、点眼、口服等；3〕可引起整个免疫应答，局部免疫及全身免疫；〔4〕本钱低，价格廉价。缺点：1〕具有返祖返强的危急。残毒在自然界动物群中持续传递后有毒力增加的危急。2〕剩余毒力问题；3〕需要低温、冷暗运输贮存；4〕存在不同抗原，母源抗体干扰，影响免疫效果；5〕污染，生产过程中易造成其他病毒的污染。2．今有一猪场反复发生链球菌病，应用商品疫苗及多种药物均不能有效掌握，现欲制备自家灭活疫苗，如何制备？请详述之。从发病仔猪中分别大量马丁肉汤培育基，参加量为1%，37℃24h→纯粹检验、计数→参加0.1%甲醛，37℃7-12h→参加菌液:Al(OH)3=5:1Al(OH)3，混匀，置室温24h，弃去适量上清液→混匀、分装。何谓单克隆抗体？简述其制备原理及根本制备程序。答：单抗：由一个B细胞克隆分化增殖的子代细胞所产生的针对单一抗原打算簇的抗体。〔15分〕答：概念：由一个B细胞克隆分化增殖的子代细胞所产生的针对单一抗原打算簇的抗体制备原理：McAbMcAb。〔1〕应用抗原反复免疫小鼠，使其B淋巴细胞产生特异性抗体2〕从免疫小鼠分别脾细胞3〕将免疫脾细胞与小鼠骨G4〕融合细胞的筛选：融合后转移到T选择培育基〔含有次黄嘌呤H、氨基喋呤A〕和胸腺嘧啶核苷TA的主要途径被氨基喋呤阻断，又因缺乏次黄嘌呤HGPRTDNAHGPRTHAT培育基中存活和〔5〕杂交瘤细胞的克隆化：一方面是保证以后获得的杂交瘤细胞是由一个细胞增殖而来的，即单个克隆，另一方面防止杂交瘤细胞因染色体丧失而丧失分泌抗体的力量，常用方法有有限稀释法，显微操