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文档简介

化学制药工艺柱层析技术又称为柱色谱技术，是色谱法中使用最广泛的一种分离提纯方法。当被分离物质不能以重结晶纯化时，柱层析往往是最有效的分离手段。柱层析由两相组成，在圆柱形管中填充不溶性基质，形成固定相，洗脱溶剂为流动相。（二）柱层析吸附色谱法系利用吸附剂对混合物中各组分吸附能力的差异，实现对组分的分离。混合物在吸附色谱柱中移动速度和分离效果取决于固定相对混合物中各组分的吸附能力和洗脱剂对各组分的解吸能力的大小。物质与固定相之间吸附能力与吸附剂的活性以及物质的分子极性相关。1．吸附色谱法（1）吸附剂的活性对色谱行为的影响：硅胶和氧化铝是最为常见的固定相吸附剂。（2）被分离物质对色谱行为的影响：通常来讲，分子中所含极性基团越多，极性基团越大，化合物极性越强，吸附能力越强。常见基团的吸附能力顺序如下：一Cl，-Br,-1<-C=C-<-OCH3<-COOR<-CO-<-CHO<-SH<-NH2<-OH<-COOH。（3）流动相对色谱行为的影响：流动相的洗脱作用实质上是洗脱剂分子与样品组分竞争占据吸附剂表面活性中心的过程。常用溶剂的极性大小顺序为石油醚＜环己烷＜四氯化碳＜苯＜乙醚＜乙酸乙酯＜丙酮乙醇＜水。离子交换色谱系利用被分离组分与固定相之间离子交换能力的不同实现分离纯化。理论上讲，凡是在溶液中能够电离的物质都可以用离子交换色谱分离，因此，它不仅可用于无机离子混合物的分离，也可用于有机盐、氨基酸、蛋白质等有机物和生物大分子的分离纯化，应用范围广泛。2．离子交换色谱法（1）使用柱层析分离的关键是发展一种能够使产物和杂质之间洗脱时间最大化的层析系统。最优的条件是杂质在最初的位置基本不动而产品有较好的流动性，只需少量的溶剂即可分离产物与杂质。3．使用柱层析应注意的问题（2）为了加快色谱操作，用惰性气体对色谱柱加压，或者在柱的收集端进行抽气。（3）制备型色谱需要放置在通风良好的位置，当大量使用易

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