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文档简介

广东省“十二校”2024届高考冲刺生物模拟试题注意事项1.考生要认真填写考场号和座位序号。2.试题所有答案必须填涂或书写在答题卡上,在试卷上作答无效。第一部分必须用2B铅笔作答;第二部分必须用黑色字迹的签字笔作答。3.考试结束后,考生须将试卷和答题卡放在桌面上,待监考员收回。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1.研究人员用图1中质粒和图2中含目的基因的片段构建重组质粒(图中标注了相关限制酶切割位点),将重组质粒导入大肠杆菌后进行筛选及PCR鉴定。以下叙述不正确的是A.构建重组质粒的过程应选用BclⅠ和HindⅢ两种限制酶B.使用DNA连接酶将酶切后的质粒和目的基因片段进行重组C.能在添加四环素的培养基上生存一定是含有重组质粒的大肠杆菌D.利用PCR鉴定含目的基因的大肠杆菌时应选用引物甲和引物丙2.科学家把等量的小白鼠败血症病毒(一种RNA病毒)颗粒分别加入甲、乙两支试管,其中甲试管中含有带放射性标记的脱氧核糖核苷三磷酸缓冲溶液,乙试管中含有带放射性标记的核糖核苷三磷酸缓冲溶液。一段时间后,甲试管中能检测到含有放射性的核酸,乙试管中不能检测到含有放射性的核酸。下列叙述正确的是()A.甲试管中可以检测到子代病毒B.该病毒颗粒中不含有与DNA合成有关的酶C.乙试管中无放射性核酸的合成是因为缺少RNA酶D.加入RNA酶,甲试管中放射性核酸明显减少3.2019年12月8日在重庆举行国际半程马拉松比赛,人们在运动过程中,机体会发生一系列生理活动以维持内环境稳态。下列与此相关叙述正确的是()A.内环境稳态是指内环境中的各种成分和理化性质都处于动态平衡B.运动过程中,线粒体内的葡萄糖氧化分解加快,体温略有升高C.剧烈运动时会产生大量乳酸进入血液,与血浆中H2CO3缓冲物质发生中和,血浆pH保持相对稳定D.大量流汗使细胞外液渗透压降低,引起抗利尿激素分泌增多,尿量减少4.孟买血型是由两对等位基因I/i(位于第9号染色体)和H/h(位于第19号染色体)相互作用产生的,使ABO血型的表型比例发生改变,其机理如下图所示。下列叙述错误的是()A.两对基因的遗传遵循基因的自由组合定律B.H基因表达的产物是A、B血型表现的基础C.父母均为AB型血时,可能生出O型血的后代D.O型血对应的基因型可能有6种5.小麦原产西亚,两河流域是世界上最早栽培小麦的地区。学者推断在四千多年前小麦通过“丝绸之路”传入中国。下列相关叙述正确的是()A.农田中小麦种群的空间特征可能呈镶嵌分布B.将大豆与小麦轮作可以提高氮元素的利用率C.麦田中的微生物可将有机物分解,释放的能量供小麦利用D.拓荒种麦导致群落发生初生演替,改变了自然演替的速度和方向6.研究人员将某实验动物的第5号染色体上的一段DNA敲除,结果发现培育出的实验动物甘油三酯极高,具有动脉硬化的倾向,并可以遗传给后代。下列有关叙述错误的是()A.敲除的DNA片段具有遗传效应B.动脉硬化的产生与生物变异有关C.控制甘油三酯合成的基因就位于第5号染色体上D.利用DNA片段的敲除技术可以研究相关基因功能7.下图为生物体内三种有机分子的结构,下列相关叙述不正确的是()A.原核生物蓝藻中虽无叶绿体但含有机分子①B.②的部分区域含有氢键,②中氨基酸结合位点在端C.①最可能存在于叶肉细胞叶绿体类囊体薄膜上,主要吸收蓝紫光和红光D.②和③的分子组成上都含有核糖和含氮碱基8.(10分)下图是某昆虫基因pen突变产生抗药性示意图。下列叙述正确的是()A.基因pen的自然突变是定向的B.杀虫剂的使用促进昆虫发生抗药性的变异C.昆虫种群抗药能力的增强是人工选择的结果D.昆虫遗传多样性的上升有利于生物的适应性进化二、非选择题9.(10分)破伤风由破伤风杆菌引起,窄而深的皮肤伤口(如刺伤)易营造厌氧环境,有利于破伤风杆菌生长并分泌外毒素,对机体造成损害。请回答下列问题:(1)人体有三道防线,其中皮肤属于保卫人体的第___________道防线。(2)当破伤风杆菌入侵机体时,其分泌的外毒素会使机体产生相应的抗体,这属于特异性免疫反应中的___________免疫。侵入机体的破伤风外毒素被呑噬细胞摄取、处理后,传递给T细胞,进而刺激B细胞增殖分化,引起B细胞增殖分化的两个条件分别是______________________。(3)破伤风是可以通过注射破伤风疫苗预防的。与未接种破伤风疫苗的人体比较,当破伤风外毒素侵入已经接种破伤风疫苗的人体后会更快地被清除掉,其主要原因是______________________。接种破伤风疫苗的人体对破伤风外毒素产免疫力,而对流感病毒没有免疫力,这体现了抗体具有___________性。(4)对于没有接种过破伤风疫苗的伤者,应尽早皮下注射破伤风抗毒血清。破伤风抗毒血清中起关键作用的物质是抗外毒素球蛋白,其作用是______________________。10.(14分)阅读下面的材料,完成(1)~(4)题。早在NatalieNakles出生前,甚至是来自她母亲的卵子成熟之前,奇怪的事情就发生了。那颗卵子本应只携带一条16号染色体,结果最后却多出了一条。而随后的一系列过程,让Nakles的受精卵发育时移除了来自精子的16号染色体。因此,现今24岁的Nakles并不像大多数人一样从父母身上各继承了一组染色体,她的两条16号染色体全部来自母亲。这种现象被称为“单亲二体性”,即23对染色体中某一对的两条染色体都来自父亲或母亲一方。早期研究表明单亲二体性与自然流产有着密切关系,即便胎儿存活,它也有可能患有骨骼异常、癫痫、智力障碍和儿童癌症等疾病。例如,如果两条15号染色体都来自母亲,会导致普拉德-威利综合征,根据相关病症也被称做低肌张力-低智力-性腺发育低下-肥胖综合征;而如果15号染色体都来自父亲,则会导致天使人综合征,患儿会产生发育迟缓,智力残疾,严重的言语障碍以及运动和平衡问题。它们都是具有明显症状的特殊遗传疾病。Nakles就患有阿斯伯格综合征,这是一种自闭症谱系疾病,但不会有自闭症患者的语言和智力障碍。除此之外她很健康,没有什么严重的健康问题。如今,一项研究对大约483万人的DNA进行了检测,其中440万来自基因检测公司,43万来自英国生物样本库。结果显示,许多像Nakles这样的健康人身上都存在单亲二体性。该研究共找到了675个单亲二体的样本,且没有发现其与任何有害特征存在显著相关。这表明,单亲二体性现象比过去文献中的结果更普遍,且危害性更低。(1)就进行有性生殖的生物来说,(__________________)对于维持每种生物前后代体细胞中染色体数目的恒定,对于生物的遗传和变异,都是十分重要的。(2)下列叙述正确的是(________)A.单亲二体的出现通常是减数第一次分裂异常B.天使人综合征是由于染色体数目变异导致的C.同源染色体分离发生在减数第一次分裂D.单亲二体的后代一定患病(3)请根据文章内容,结合已有知识,用文字或图解的形式提出单亲二体性形成机制的两种假说?__________________________________________________________________________。(4)如果单亲二体性确实造成了健康问题,你推测可能的原因有哪些?_________________________________________________________________________。11.(14分)人类的干扰素是由体内免疫细胞合成并分泌的一种糖蛋白,具有抗病毒、抗菌和抗肿瘤等作用,并能参与人体免疫调节,因而在临床医学上用途广泛。干扰素的传统生产方法成本高、产量低,获得的干扰素在体外不易保存,用生物技术手段可以解决这些问题。请联系所学知识回答相关问题:(1)利用基因工程技术生产干扰素,其简要过程是:①从健康人体的外周静脉血中分离出能合成干扰素的免疫细胞,从其细胞质中提取____________,经反转录获取目的基因;②用限制酶处理载体和日的基因后,用DNA连接处理,形成重组载体,该载体的化学木质是_________。③若选择大肠杆菌作为受体细胞,常用的转化方法是____________,在一定温度条件下,完成转化;④在培养液中培养一段时间后,经离心、分离等一系列处理措施后提取产物,对产物进行鉴定时可采用____________技术。(2)利用蛋白质工程对干扰素进行改造,基本途径是:预期蛋白质的功能→____________→____________→找到对应的脱氧核苷酸序列。(3)利用细胞工程生产干扰素,其简要设计思路是:将能合成干扰素的免疫细胞和瘤细胞融合,筛选出____________细胞,经细胞培养可获得大量干扰素。12.“滔滔”是我国第一例转入人体白蛋白基因的转基因试管牛,人们利用该转基因奶牛的乳汁能生产人类血清白蛋白。(1)试管动物实际上是体外受精与胚胎移植两项技术的综合运用。体外受精前需要把奶牛的精子放入__________中,进行__________处理。防止多精入卵的生理反应包括透明带反应和__________。胚胎工程的终端环节是胚胎移植。移植后的胚胎能在受体子宫内存活的生理基础是____________________。(2)基因工程的核心步骤是__________,一般利用显微注射技术导入牛的受精卵中,当受精卵分裂到囊胚期时,需要取囊胚的滋养层细胞进行__________鉴定,以确保发育成熟的牛能分泌乳汁并获取人类血清白蛋白。(3)为了提高胚胎的利用率,同时获取更多的人类血清白蛋白,在胚胎移植前可进行__________,操作时应注意将内细胞团均等分割,有利于__________。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、C【解析】

基因工程技术的基本步骤:1、目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。2、基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。3、将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。4、目的基因的检测与鉴定:(1)分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。(2)个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】A、选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点,但BamHⅠ可能使质粒中的两种标记基因都破坏,因此只能选BclⅠ和HindⅢ两种限制酶切割,A正确;B、使用DNA连接酶将酶切后的质粒和目的基因片段进行重组,B正确;C、能在添加四环素的培养基上生存的也可能是没有重组目的基因的大肠杆菌,C错误;D、PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合,沿相反的方向合成子链,故所用的引物组成为图2中引物甲和引物丙,D正确。故选C。2、D【解析】

病毒是没有细胞结构的生物。病毒分为DNA病毒、RNA病毒和朊病毒(蛋白质)。RNA病毒的成分为RNA和蛋白质,遗传物质为RNA。RNA病毒有自我复制和逆转录两种复制方式。逆转录方式是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成。甲试管中含有带放射性标记的脱氧核糖核苷三磷酸缓冲溶液,能检测到含有放射性的核酸,说明甲试管中发生了逆转录。乙试管中含有带放射性标记的核糖核苷三磷酸缓冲溶液,乙试管中不能检测到含有放射性的核酸,说明乙试管不能合成核酸。两试管对比也可以说明该病毒是逆转录病毒,而不是自我复制型病毒。【详解】A、病毒由RNA和蛋白质组成,甲试管中只有带放射性标记的脱氧核糖核苷三磷酸缓冲溶液,发生了逆转录,不能合成RNA和蛋白质,不能检测到子代病毒,A错误;B、甲试管检测到核酸,说明该病毒能合成DNA,所以该病毒颗粒中含有与DNA合成有关的酶,B错误;C、该病毒是逆转录型的RNA病毒,乙试管中无放射性核酸的合成是因为缺少脱氧核苷酸的原料,C错误;D、加入RNA酶,可以降解RNA(逆转录的模板),因此甲试管中放射性核酸明显减少,D正确。故选D。【点睛】本题为结合一定的基础知识点进行分析的试题,应注意提高逻辑分析能力。3、A【解析】

水盐平衡的调节【详解】A、内环境稳态的内容是指内环境中的各种成分和理化性质都处于动态平衡,A正确;B、葡萄糖的氧化分解首先在细胞质基质中完成第一阶段,随之第一阶段的产物如丙酮酸进入线粒体内进行氧化分解,由于运动过程中大量消耗能量,故细胞呼吸速率加快,同时释放的热能增多,所以体温略有升高,B错误;C、剧烈运动时会产生大量乳酸进入血液,与血浆中NaHCO3发生中和,进而血浆pH保持相对稳定,C错误;D、大量流汗使细胞外液渗透压升高,引起抗利尿激素分泌增多,尿量减少,D错误。故选A。4、D【解析】

非同源染色体的非等位基因遵循自由组合定律,题干信息给出孟买血型是由“两对等位基因I/i(位于第9号染色体)和H/h(位于第19号染色体)相互作用产生的”,根据题干推断出两对基因为非等位基因且两对基因共同控制一对性状是本题的解题关键。【详解】A、I/i位于第9号染色体,H/h位于第19号染色体,所以这两对基因属于非同源染色体上的非等位基因,因此遵循基因的自由组合定律,A正确;B、分析图中的信息可知,当H基因不存在时,只能表达为O型血,当H基因成功表达时,才可能出现A、B、AB型血,B正确;C、当父母的基因型均为IAIBHh时,可能会生出hh基因型的个体,此时孩子的血型为O型,C正确;D、根据图中的信息可以得知,O型血的基因型可能为iiH_、IA_hh、IB_hh、IAIBhh、iihh,基因型可能有2+3+2+1+1=9种,D错误;故选D。5、B【解析】

1、群落演替:随着时间的推移,一个群落被另一个群落代替的过程。初生演替:是指一个从来没有被植物覆盖的地面,或者是原来存在过植被,但是被彻底消灭了的地方发生的演替;次生演替:原来有的植被虽然已经不存在,但是原来有的土壤基本保留,甚至还保留有植物的种子和其他繁殖体的地方发生的演替。2、人类可以砍伐树木,填湖造地、捕杀动物,也可以封山育林、治理沙漠、管理草原,甚至可以建立人工群落,人类活动往往会使群落演替按照不同于自然演替的速度和方向进行。3、群落演替的原因:生物群落的演替是群落内部因素(包括种内关系、种间关系等)与外界环境因素综合作用的结果。【详解】A、种群的空间特征包括均匀分布、随机分布和集群分布,群落的空间结构包括垂直结构和水平结构,水平结构具有镶嵌分布的特点,A错误;B、大豆根部的根瘤菌具有固氮作用,将大豆与小麦轮作可以提髙氮元素的利用率,B正确;C、能量只能单向流动,不能循环利用,C错误;D、拓荒种麦过程中发生的是次生演替,D错误。故选B。6、C【解析】本题考查基因“敲除”,要求考生能根据所学知识解读题给信息,判断出敲除的DNA片段具有遗传效应,与甘油三酯代谢有关。根据题意,将某实验动物的第5号染色体上的一段DNA敲除,结果发现培育出的实验动物需要甘油三酯极高,具有动脉硬化的倾向,并可以遗传给后代,说明该变异是一种可遗传的变异,敲除的DNA片段具有遗传效应,AB正确;上述信息只能表明敲除的DNA片段与甘油三酯代谢有关,不能表明控制甘油三酯合成的基因就位于第5号染色体上,C错误;由题干信息可知,利用DNA片段的敲除技术可以研究相关基因功能,D正确。7、B【解析】

分析题图:①分子中含有N、Mg元素,是叶绿素分子。②具有明显的三叶草结构,是tRNA,能运输氨基酸;③是ATP分子,含有2个高能磷酸键,是生物体生命活动所需的直接能源物质。【详解】A、①为叶绿素分子,原核生物蓝藻中虽无叶绿体但含叶绿素和藻蓝素,A正确;B、②的部分区域含有氢键,②中氨基酸结合位点在tRNA的长臂端,即-OH端,B错误;C、①为叶绿素,存在于叶肉细胞叶绿体的类囊体薄膜上,主要吸收蓝紫光和红光,C正确;D、②为tRNA,含有核糖和四种含氮碱基。③为ATP,其中A是腺苷,由腺嘌呤和核糖组成,D正确。故选B。8、D【解析】基因突变具有不定向性,A项错误;杀虫剂只是对原有的抗药性的变异起了选择作用,不能促进昆虫发生抗药性变异,B项错误;昆虫种群抗药能力的增强是杀虫剂选择的结果,属于自然选择,C项错误;昆虫遗传多样性为自然选择提供了原材料,昆虫遗传多样性的上升有利于生物的适应性进化,D项正确。二、非选择题9、一体液抗原(或破伤风外毒素)的刺激、淋巴因子的作用记忆细胞受到破伤风外毒素的刺激迅速增殖分化形成大量的浆细胞,浆细胞分泌大量的抗体特异(或专一)与破伤风外毒素特异性结合,使破伤风外毒素失去毒性【解析】

1、人体有三道防线,皮肤和黏膜等组成第一道防线,体液中的杀菌物质和吞噬细胞构成第二道防线,这两道防线属于非特异性免疫,第三道防线主要是由免疫器官和免疫细胞借助血液循环和淋巴循环而组成的特异性免疫。2、体液免疫的大致过程:大多数病原体经过吞噬细胞等的摄取和处理,暴露出这种病原体所特有的抗原,将抗原传递给T细胞,刺激T细胞产生淋巴因子。少数抗原直接刺激B细胞。B细胞受到刺激后,在淋巴因子的作用下,开始一系列的增殖、分化,大部分分化为浆细胞,产生抗体,小部分形成记忆细胞。抗体可以与病原体结合,从而抑制病原体的繁殖和对人体细胞的黏附。在大多数情况下,抗原、抗体结合后会发生一系列变化,如形成沉淀或细胞集团,进而被吞噬细胞吞噬消化。记忆细胞可以在抗原消失后很长时间内保持对这种抗原的记忆,当再次接触这种抗原时,能迅速增殖分化,快速产生大量的抗体。3、二次免疫的特点:①强度更强②更迅速③持续时间更长。【详解】(1)人体有三道防线,皮肤和黏膜等组成第一道防线,体液中的杀菌物质和吞噬细胞构成第二道防线,这两道防线属于非特异性免疫。(2)破伤风外毒素会使机体产生相应的抗体,这属于特异性免疫反应中的体液免疫。B细胞增殖分化为浆细胞及记忆细胞,需要抗原的刺激以及淋巴因子的作用。(3)人体接种破伤风疫苗后,体内会产相应记忆细胞,在受到破伤风外毒素的刺激后该记忆细胞会迅速增殖分化形成大量的浆细胞,由浆细胞分泌大量的抗体。抗体具有专一性,故接种破伤风疫苗的人体对破伤风外毒素能够产生免疫力,而不会对流感病毒产生免疫力。(4)破伤风抗毒血清中起关键作用的是抗外毒素球蛋白(抗体),其作用是与破伤风外毒素特异性结合,使破伤风外毒素失去毒性。【点睛】本题以破伤风芽孢杆菌为背景,考查免疫调节的相关知识,旨在考查识记能力与知识的迁移运用能力。10、减数分裂和受精作用C第一种假说:减数分裂的异常导致卵子或精子获得了两条相同编号的染色体,因此胚胎最终得到了三条同源染色体。这些胚胎可以进行“三染色体自救”,即某些细胞会随机丢失额外的第三条染色体,因此胎儿的染色体组成可以出现某一对的两条染色体都来自父亲或母亲一方。第二种假说:减数分裂异常形成二体配子和缺体配子结合产生单亲二体。第三种假说:缺体配子与正常配子受精形成单体合子。在卵裂过程中,单体染色体进行复制变成了一对染色体,在发生染色体不分离的情况下,这一对染色体同时进入相同的一个子代细胞变成二体,即单亲二体。第一种,一个孩子可能从父母一方继承了两条相同的、带有罕见隐性突变的染色体。第二种,某些基因的表达与否取决于它们来源于父母哪一方,这种现象称为“基因印记”。如果某条染色体均来源于被印记的一方,则会造成健康问题。【解析】

减数分裂过程:(1)减数第一次分裂间期:染色体的复制;(2)减数第一次分裂:①前期:联会,同源染色体上的非姐妹染色单体交叉互换;②中期:同源染色体成对的排列在赤道板上;③后期:同源染色体分离,非同源染色体自由组合;④末期:细胞质分裂。(3)减数第二次分裂过程:①前期:核膜、核仁逐渐解体消失,出现纺锤体和染色体;②中期:染色体形态固定、数目清晰;③后期:着丝点分裂,姐妹染色单体分开成为染色体,并均匀地移向两极;④末期:核膜、核仁重建、纺锤体和染色体消失。【详解】(1)就进行有性生殖的生物来说,减数分裂和受精作用对于维持每种生物前后代体细胞中染色体数目的恒定,对于生物的遗传和变异,都是十分重要的。(2)A、单亲二体,指某一号的两条染色体都来自于精子或者卵子,而这种情况的出现可能是减数第一次分裂异常或者减数第二次分裂异常,A错误;B、15号染色体都来自父亲,则会导致天使人综合征,天使人综合征患者染色体数目和正常人一样,不存在染色体数目变异,B错误;C、同源染色体分离发生在减数第一次分裂后期,C正确;D、单亲二体也可能产生正常的配子,这样后代不患病,D错误。故选C。(3)通过文章信息分析,单亲二体性形成机制:第一种假说:减数分裂的异常导致卵子或精子获得了两条相同编号的染色体,因此胚胎最终得到了三条同源染色体。这些胚胎可以进行“三染色体自救”,即某些细胞会随机丢失额外的第三条染色体,因此胎儿的染色体组成可以出现某一对的两条染色体都来自父亲或母亲一方。第二种假说:减数分裂异常形成二体配子和缺体配子结合产生单亲二体。第三种假说:缺体配子与正常配子受精形成单体合子。在卵裂过程中,单体染色体进行复制变成了一对染色体,在发生染色体不分离的情况下,这一对染色体同时进入相同的一个子代细胞变成二体,即单亲二体。(4)如果单亲二体性确实造成了健康问题,原因如下:第一种,一个孩子可能从父母一方继承了两条相同的、带有罕见隐性突变的染色体。第二种,某些基因的表达与否取决于它们来源于父母哪一方,这种现象称为“基因印记”。【点睛】本题考查减数分裂相关知识,意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点,把握知识间内在联系,形成知识网络结构的能力;能运用所学知识,准确判断问题的能力。11、mRNADNA用Ca2+处理,使其成为感受态细胞抗原抗体杂交设计预期蛋白质的结构推测氨基酸序列杂交瘤【解析】

1.基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成.(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等.(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法.(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等.2.蛋白质过程的基本途径是:从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)。【详解】(1)①这里用反转录法提取目的基因,根据反转录的概念可知,要想获得合成干扰素的基因,需要从能合成干扰素的免疫细胞的细胞质中提取mRNA,经反转录获取目的基因;②基因表达载体构建的方法是,首先用限制酶处理载体和目的基因后,这里的载体通常是质粒,一种主要存在于原核细胞内的小型环状DNA分子,然后用DNA连接酶把经过切割的质粒和目的基因连接起来,形成重组载体。③若选择大肠杆菌作为受体细胞,通常用感受态细胞法处理,具体做法是用Ca2+处理,使其成为感受态细胞,从而提高转化的成功率;④检测目的基因是否成功表达的方法是

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