ABO血型鉴定的注意事项

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ABO血型正反定型及结果

正定型：用已知抗-A和抗-B分型血清来测定RBC上有无相应的A抗原和（或）B抗原。

反定型：用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗-A和（或）抗-B。

正反定型注意事项

更换新批号抗血清或对试验有怀疑时，可设阳性、阴性和自身对照。抗A管的阳性对照用抗A标准血清加已知A型RBC；抗B管的阳性对照用抗B标准血清加已知B型RBC；阴性对照用AB型血清加正常人O型RBC；自身对照用被检者血清加被检者RBC。为避免交叉污染，尖吸管、玻棒只能一次性使用。RBC悬液浓度过高或离心力过大可造成假凝集，操作时须注意。操作环境应在20～25℃下进行。操作中心严格查对制度，观察后要立即正确记录结果。婴幼儿RBC抗原末发育完全，老年体弱者抗原较弱，最好用试管法鉴定。白血病、恶性肿瘤等严重疾病时RBC上的抗原可能减弱甚至消失，要结合反定型综合判断结果。亚型RBC（如A3型）的抗原性较弱有时会出现混合外观，甚至与较低效价的血清抗体不出现凝集反应，要用抗-（A+B）标准血清进行鉴定。

反定型注意事项

不宜用玻片法，因为献血者或患者血清有时凝集力较弱，必须经过离心使RBC紧密接触，否则，不足以使RBC凝集。试管离心后，应先观察上清液有无溶血，然后摇动底层RBC进行观察，若出现溶血现象表明存在抗原抗体反应并有补体激活，应视为凝集。因为患者新鲜血清作反定型时，由于补体作用发生溶血，如不检查有无溶血现象，会使结果判断错误或遗漏。反定型必要时加一管“O”型RBC，用以查出盂买型抗-h抗体，同时可查是否有缗钱状形成和血清中偶可见到的少数与血型抗原无关但能使阳比发生凝集的物质。血清中存在免疫性血型抗体，冷凝集素效价增高，多发性骨髓瘤免疫球蛋白异常均可造成反定型困难。

正反定型结果不一致常见情况

分型血清效价太低，亲和力不强。如抗-A血清效价不高，可将A型误定为0型。分型血清未灭活产生溶血，血型鉴定时误认为阴性。

RBC悬液过浓、过淡，抗原抗体比例不适当，使反应不明显出现假阴性。

受检者RBC上抗原位点太少或抗原性减弱以及类B或cisAB等。

受检者血清中缺乏应有的抗-A、抗-B。

各种原因引起的RBC溶解，误判为不凝集，部分溶血时可溶性血型物质中和了相应的抗体。

受检者血清中蛋白紊乱或实验室温度过高，常引起RBC呈缗钱状排列。

细茵污染或遗传因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因。

血清中有意外抗体如自身抗-I，存在免疫性抗体如抗-PI、抗-M、抗-H等常干扰试验。

新生儿、老年人、低免疫球蛋白血症患者的血清中的抗-A、抗-B效价太低甚至缺乏，可出现正反定型不一致。

非特异性反应：被检血清中可出现与血型无关的，同部分人血细胞均可发生凝集样反应的现象，可能系免疫性抗体所致。

正反定型结果不一致的处理方法

首先重复试验1次，严格操作规程，使用合格的试剂及细心观察和解释结果。

另从受检者采取一份新鲜血标本，可纠正因污染或搞错标本造成的不符。

将RBC洗涤数次，配成5%盐水细胞悬液，用抗-A、抗-B、抗-A1、抗-（A+B）及抗-H做试验可以得到其它有用的信息。

对受检者RBC作直接抗人球蛋白试验，如结果呈阳性，表示RBC已被抗体致敏。

用A1、A2、B、O型RBC及自身RBC检查受检血清。加怀疑是抗-I，用O型（或ABO相合的）脐血RBC检查。

若试验结果未见凝集，应将细胞及血清试验至少在室温和4℃放置30分钟，用显微镜核实。

如疑为A抗原或B抗原减弱，则可将受检RBC与抗-A或抗-B血清作吸收及放散试验以及受检者唾液作A、B、H血型物质测定。后者只对80%HAB分