噬菌体侵染细菌的实验

关于噬菌体侵染细菌的实验噬菌体侵染细菌实验你记得本实验的基本操作吗？考纲要求：两个经典实验的设计思路和结论分析考情回顾：2010、2011年江苏卷、上海卷第2页,共29页，2024年2月25日，星期天赫尔希通过T2噬菌体侵染细菌的实验证明DNA是遗传物质，实验包括4个步骤：①培养噬菌体(侵染细菌)，②35S和32P标记噬菌体，③放射性检测，④离心分离。实验步骤的先后顺序为

A．①②④③B．④②①③C．②①④③D．②①③④我能行C第3页,共29页，2024年2月25日，星期天深度解读噬菌体侵染大肠杆菌的实验1、实验者：2、实验方法：放射性同位素标记法：用放射性同位素（如14C）掺入正常的分子中，使该分子带有放射性，然后用放射自显影检测分子的分布。拓展：四本书中使用这种方法的有哪些知识？第4页,共29页，2024年2月25日，星期天蛋白质外壳DNA3、实验材料：噬菌体选择是关键

第5页,共29页，2024年2月25日，星期天解读实验材料T2噬菌体：（1）结构：有何特点？所用同位素究竟标记的是这两种物质的什么位置？请你写出氨基酸结构通式；画出脱氧核苷酸的结构简图；并标出同位素标记的部位。（2）生活方式：什么特点？怎样培养？（3）增殖特点：虽无细胞结构，但为生物的原因。看书P44T2噬菌体中

60%是蛋白质,

40%是DNA.第6页,共29页，2024年2月25日，星期天解读大肠杆菌1、为什么不同的噬菌体会侵染不同的大肠杆菌？2、噬菌体若想向大肠杆菌中注入物质，需要先溶解其什么结构？该结构主要成分是什么？第7页,共29页，2024年2月25日，星期天解读大肠杆菌1、为什么不同的噬菌体会侵染不同的大肠杆菌？2、噬菌体若想向大肠杆菌中注入物质，需要先溶解其什么结构？该结构主要成分是什么？细胞表面的特异性受体决定。细胞壁；肽聚糖第8页,共29页，2024年2月25日，星期天4、实验设计思路---不同于体外转化实验巧妙构思：噬菌体只有DNA和蛋白质两种成分，没有其它物质的干扰。S是蛋白质特有元素，P是DNA特有元素，用不同放射性同位素分别标记蛋白质和DNA，直接地、单独地来观察它们的作用第9页,共29页，2024年2月25日，星期天在“噬菌体侵染细菌”的实验中，如果放射性同位素主要分布在离心管的沉淀物中，则获得侵染噬菌体的方法是(

)A．用含35S的培养基直接培养噬菌体B．用含32P的培养基直接培养噬菌体C．用含35S的培养基培养细菌，再用此细菌培养噬菌体D．用含32P的培养基培养细菌，再用此细菌培养噬菌体我能行D第10页,共29页，2024年2月25日，星期天5、实验过程（如何标记噬菌体？）第一步：标记细菌（如何标记？）35S培养基+细菌35S标记的细菌32P培养基+细菌32P标记的细菌第二步：标记噬菌体（如何标记？）噬菌体+35S标记的细菌35S标记的噬菌体噬菌体+32P标记的细菌32P标记的噬菌体第11页,共29页，2024年2月25日，星期天第三步：标记的噬菌体侵染未标记的细菌仔细研读课本实验有关内容友情提示：今年高考选修三试题基本都是课本原话填空，所以看书必须仔细第12页,共29页，2024年2月25日，星期天第四步：放射性检测----搅拌和离心短时间保温、搅拌、离心目的---第13页,共29页，2024年2月25日，星期天第四步：放射性检测解读上清液：解读沉淀物：第14页,共29页，2024年2月25日，星期天第四步：放射性检测解读上清液：上清液中含未侵染的T2噬菌体和侵染后的噬菌体外壳解读沉淀物：沉淀物中含有被感染的细菌第15页,共29页，2024年2月25日，星期天

该实验中时间应怎样把握？过长过短放射性会集中于上清液还是沉淀？为什么？时间过长因为超过噬菌体的裂解周期，放射性集中于上清液中，过短来不及侵染细菌，从而也集中于上清液中。思考第16页,共29页，2024年2月25日，星期天解读放射性检测结果：35S标记后上清液放射性高，沉淀物放射性很低（为什么沉淀物有低放射性？）32P标记后上清液放射性很低（为什么上清液有低放射性？），沉淀物放射性很高。第17页,共29页，2024年2月25日，星期天解读32P标记后上清液有低放射性原因（1）保温时间过短，有一部分噬菌体还没有侵染到大肠杆菌细胞内，经离心分布于上清液中，上清液中出现放射性。（2）噬菌体和大肠杆菌混合培养到用离心机分离，这一段保温时间过长，噬菌体在大肠杆菌内增殖后释放子代，经离心分布于上清液，也会使上清液有放射性。第18页,共29页，2024年2月25日，星期天35S标记后为什么沉淀物有低放射性？由于搅拌不充分，有少量含35S的噬菌体吸附在细菌表面，随细菌离心到沉淀物中。第19页,共29页，2024年2月25日，星期天实验分析：

结果分析：细菌体内无35S，体外有35S细菌体内有32P，体外无32P35S标记的噬菌体外壳并没有进入细胞内部，而32P标记的噬菌体DNA进入了细菌内部实验结论：DNA是遗传物质。你认为该实验还能证明什么？DNA分子具有相对稳定性；DNA能自我复制，保持前后代一定连续性；DNA能控制蛋白质的生物合成，但不能证明DNA分子产生可遗传的变异。第20页,共29页，2024年2月25日，星期天解读子代噬菌体的组成（课本44页）噬菌体侵染细菌后，合成子代噬菌体的外壳的原料是？而子代噬菌体的DNA来自？第21页,共29页，2024年2月25日，星期天注意标记对象是噬菌体还是细菌，标记对象不同，结果应不同：温馨提醒第22页,共29页，2024年2月25日，星期天注意标记对象是噬菌体还是细菌，标记对象不同，结果应不同：温馨提醒第23页,共29页，2024年2月25日，星期天35S标记的蛋白质32P标记的DNA1、感染2、搅拌3、离心蛋白质外壳（强放射性）细菌（强放射性）细菌蛋白质外壳第24页,共29页，2024年2月25日，星期天噬菌体（病毒）、大肠杆菌（原核生物）1、实验材料：

2、实验思路：

4、实验结果：5、实验分析：总结蔡斯和赫尔希的实验设法把DNA与蛋白质分开，单独地直接去观察它们的作用。用放射性同位素35S和32P分别标记噬菌体的蛋白质外壳和DNA内核，后侵染细菌3、实验操作：在新噬菌体只能检测到32P，检测不到35S在亲子代间具备连续性的是DNA6、实验结论：DNA是遗传物质第25页,共29页，2024年2月25日，星期天试比较肺炎双球菌转化实验

和噬菌体侵染细菌的实验相同点：1、实验思路---均使DNA和蛋白质分开，单独处理，观察它们各自的作用，但两类实验中分开方式不同。2、实验原则---都遵循了对照原则。3、都证明了DNA是遗传物质。不同点：1、方法不同:艾弗里---分离化合物，分别与R型菌混合培养同位素标记法---分别标记DNA和蛋白质的特殊元素2、结论不同：艾弗里---DNA是遗传物质，蛋白质等不是遗传物质同位素标记法---DNA是遗传物质第26页,共29页，2024年2月25日，星期天噬菌体侵染细菌的动态过程：侵入别的细菌侵入合成吸附组装释放吸附侵入合成组装释放第27页,共29页，2024年2月25日，星期天(201