新课标高中生物选修3

选修3复习学案一、

基因工程〔一〕基因工程的概念概念：基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。原理：基因重组〔二〕基因工程的根本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶〔限制酶〕〔1〕来源：主要是从原核生物中别离纯化出来的。〔2〕功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。〔3〕结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶〔大肠杆菌、T4噬菌体〕的比拟：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”——〔运〕载体〔1〕载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。④对受体细胞无害。〔2〕最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。〔3〕其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒(三)基因工程的根本操作程序第一步：目的基因的获取1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。原核细胞的基因结构与真核细胞的基因结构的异同点真核细胞基因结构要比原核细胞的基因结构复杂，编码区间隔的、不连续，能够编码蛋白质的序列被不能够编码蛋白质的序列分隔开来，成为一种断裂的形式，分为：外显子：能够编码蛋白质的序列；内含子：不能够编码蛋白质的序列基因组文库局部基因文库〔cDNA基因组文库局部基因文库〔cDNA文库〕从基因文库中获取〔基因组文库、cDNA文库〕用化学方法直接人工合成用PCR技术扩增目的基因3.PCR技术扩增目的基因〔1〕原理：DNA双链复制〔2〕过程：第一步变性：加热至90～95℃DNA解链；第二步退火：冷却到55～60℃，第三步延伸：加热至70～75℃，第二步：基因表达载体的构建〔目的基因与运载体结合〕1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2.组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因+复制原点〔1〕启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。〔2〕终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。〔3〕标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。第三步：将目的基因导入受体细胞_1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2.常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：CaCl2处理使细菌成为感受态细胞3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和鉴定1.检测首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因单链作探针与mRNA进行核酸分子杂交。最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原－抗体杂交。2.鉴定：有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等思考：真核生物的基因导入细菌细胞后，不能正常发挥成效的可能原因被细菌体内的限制性内切酶破坏。②该基因指导合成的蛋白质不能在细菌体内正确修饰和表达。③细菌的RNA聚合酶不能识别真核基因的位点，致使不能启动转录。④细菌细胞中没有切除内含子转录局部的酶。〔四〕基因工程的应用1.植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改进植物的品质。2.动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。3.基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用。〔五〕基因工程的意义：能够打破生物种属的界限〔即打破生殖隔离，克服远源杂交不亲和的障碍〕，在分子水平上定向改变生物的遗传特性。〔六〕蛋白质工程的概念〔第二代的基因工程〕基因工程在原那么上只能生产自然界已存在的蛋白质蛋白质工程对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，1.从预期的蛋白质功能出发2.设计预期的蛋白质结构3.推测应用的氨基酸序列4.找到相应的脱氧核苷酸序列5.人工合成新的目的基因6.将此目的基因导入受体细胞表达练习：一、判断正误1．限制性内切酶能识别和切割RNA2.利用DNA连接酶复制目的基因3.DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需工具酶4.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒5.基因表达载体的构建方法是一致的6.显微注射技术是最为有效的一种将目的基因导入植物细胞的方法7.大肠杆菌是常用的微生物受体8.基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因9.诊断苯丙酮尿症的探针是指合成苯丙羟化酶的双链DNA片段10.选用细菌作为重组质粒的受体细胞主要是因为细菌繁殖快、遗传物质少11.只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达12.DNA连接酶将黏性末端的碱基连接起来13.人工合成目的基因不用限制性核酸内切酶14.采用反转录的方法得到的目的基因有内含子15.基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的16.工程菌”是指用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系17.基因治疗是指用DNA探针修复缺陷基因18.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体二、填空题：1、以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活。请答复以下问题。⑴获得目的基因的方法通常包括和。⑵切割和连接DNA分子所使用的酶分别是和。⑶运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或，后者的性状呈。⑷由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率，所以在转化后通常需要进行操作。⑸将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌，从两者中生产的胰岛素在功能和序列上是相同的。答案：〔1〕化学合成〔人工合成〕从基因文库中获取、PCR〔2〕限制性核酸内切酶〔限制酶〕DNA连接酶〔连接酶〕〔3〕质粒小型环状〔双链环状、环状〕〔4〕低筛选〔5〕氨基酸2、将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。请根据以上图表答复以下问题。〔1〕在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是。〔2〕PCR过程中退火〔复性〕温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？__________。〔3〕图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？。〔4〕为将外源基因转入马铃薯，图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为。〔5〕对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，。假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到_________种DNA片断。②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，得到_________种DNA片断。答案：〔1〕耐高温2〕引物对B〔3〕否〔4〕农杆菌〔5〕①2②1DNA连接酶对序列没有要求，但需要被链接的DNA的接头为同尾酶酶切造成的可互补的末端或平末端。Tm值(解链温度)=4(G+C)＋2(A+T)复性温度=Tm值-(5～10℃退火温度：取决于反响体系中引物的浓度，引物长度及其核苷酸的组成，温度以比引物扩增的Tm值［〔A+T〕X2+〔C+G〕X4］低5°为宜二、克隆技术〔细胞工程〕〔一〕克隆1.个体通过无性繁殖可以连续传代并形成群体，这样的群体称为无性繁殖系2.克隆就是指无性繁殖系〔名词〕；是通过单个细胞，特别是来自特定个体的单个体细胞进行无性繁殖，从而产生新个体的过程或技术〔动词〕3.无性生殖①．概念：不经过两性生殖细胞的结合，由母体直接产生新个体的生殖方式。②．种类:工程种类工程种类概念举例共同点分裂生殖由一个生物体直接分裂成为两个新个体。这两个新个体，大小和形状根本相同。草履虫细菌新个体是由母体直接产生出来，新个体所含的遗传物质与母体的相同，因而新个体能够保持母体的一切性状。出芽生殖在母体的一定部位上长出芽体。芽体长大以后从母体上脱落下来，成为与母体一样的新个体。水螅、酵母菌孢子生殖真菌和一些植物，能够产生一种无性的生殖细胞，称孢子。孢子在适宜的环境条件下，能够萌发并长成新植株。根霉、铁线蕨营养生殖植物体营养器官的一局部，在与母体脱离后，能够发育成为一个新个体。草莓、马铃薯4.有性生殖①.概念：由亲本产生有性生殖细胞，经过两性生殖细胞的结合，成为合子，再由合子发育成新个体的生殖方式。②.意义：产生的后代具备了双亲的遗传特性，具有更强的生活力和变异性，对于生物的生存和进化具有重要的意义。5.克隆的理论根底：从理论上说，由于细胞核具有基因组全套遗传信息，生物的体细胞有潜力直接发育成胚胎和形成与核供体完全相同的个体克隆〔具有发育的全能性〕，但实际上动物胚胎发育的条件和基因调控机理复杂，动物克隆的实现并非是一件简单的事。6.克隆的条件：细胞〔主要是包含遗传物质的细胞核〕具有发育全能性是生物克隆的根本条件〔严格说是克隆的潜能〕。实际研究说明，生物〔特别是高等动物〕克隆的根本条件：〔1〕具有包含物种完整基因组的细胞核的活细胞；〔2〕能有效调控细胞核发育的细胞质物质；〔3〕完成胚胎发育的必要的环境条件。〔二〕植物细胞工程1、植物组织培养技术调控：生长素和细胞分裂素的比例调控：生长素和细胞分裂素的比例再分化植物体根、芽〔胚状体〕再分化植物体根、芽〔胚状体〕愈伤组织〔未分化〕外植体〔分化〕脱分化条件条件营养条件：水、无机盐、蔗糖、氨基酸、维生素等激素：生长素类和细胞分裂素类营养条件：水、无机盐、蔗糖、氨基酸、维生素等激素：生长素类和细胞分裂素类温度：无菌：特点：无定形状态、薄壁细胞、高度液泡化、排列疏松无规那么光光〔3〕条件：离体、无菌、营养物质、激素、光照等其他适宜条件。〔4〕用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、突变体的利用、细胞产物的工厂化生产。①植物繁殖微型繁殖：可以高效快速地实现种苗的大量繁殖作物脱毒：采用茎尖组织培养来除去病毒〔因为植物分生区附近的病毒极少或没有〕人工种子：以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经人工薄膜包装得到的种子。优点：完全保持优良品种的遗传特性，不受季节的限制；方便储藏和运输②作物新品种培育单倍体育种：a过程：植株〔AaBb〕通过减数分裂得到花粉〔AB、Ab、aB、ab四种类型〕；对花粉进行花药离体培养〔技术是植物组织培养〕，得到单倍体植株；对其幼苗时期进行秋水仙素处理，得到了正常的纯合二倍体植株〔AABB、AAbb、aaBB、aabb四种类型〕。b优点：明显缩短育种年限，迅速获得纯系植株。突变体利用：在组织培养中会出现突变体，通过从有用的突变体中选育出新品种〔如筛选抗病、抗盐、含高蛋白的突变体〕③细胞产物的生产：通过能够产生对人们有利的产物的细胞进行组织培养，从而让它们能够产生大量的细胞产物。〔5〕地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。2.植物体细胞杂交技术〔1〕过程：杂种细胞AB的筛选杂种细胞AB的筛选①去壁的方法：酶解法〔纤维素酶和果胶酶〕②诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇〔PEG〕作为诱导剂。〔2〕意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍，培育作物新品种的又一途径。〔二〕动物细胞工程1.动物细胞培养〔a〕〔1〕概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。〔2〕动物细胞培养的流程：取动物组织块〔动物胚胎或幼龄动物的器官或组织〕→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。〔3〕细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到外表相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。〔4〕动物细胞培养需要满足以下条件①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需参加血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度：哺乳动物多是36.5℃＋0.5℃；pH：④气体环境：95%空气＋5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。〔5〕动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞。2.动物体细胞核移植技术和克隆动物〔1〕哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植〔比拟容易〕和体细胞核移植〔比拟难〕。〔2〕选用去核卵(母)细胞的原因：卵(母)细胞比拟大，容易操作；卵(母)细胞细胞质多，营养丰富。〔3〕体细胞核移植的大致过程是：高产奶牛〔提供体细胞〕进行细胞培养；同时采集卵母细胞，在体外培养到减二分裂中期的卵母细胞，去核〔显微操作〕[注：为什么要用卵细胞？它可以提供充足的营养；操作简便；细胞质不会抑制细胞核全能性的表达]；将供体细胞注入去核卵母细胞；通过电刺激使两细胞融合，供体核进入受体卵母细胞，构建重组胚胎；将胚胎移入受体〔代孕〕母牛体内；生出与供体奶牛遗传基因相同的犊牛〔4〕体细胞核移植技术的应用：①加速家畜遗传改进进程，促进良畜群繁育；②保护濒危物种，增大存活数量；③生产珍贵的医用蛋白；④作为异种移植的供体；⑤用于组织器官的移植等。〔5〕体细胞核移植技术存在的问题：克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等。3.动物细胞融合〔1〕动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。〔2〕动物细胞融合与植物原生质体融合的原理根本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激等。〔3〕动物细胞融合的意义：克服了远缘杂交的不亲和性，成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段。〔4〕动物细胞融合与植物体细胞杂交的比拟：细胞工程植物体细胞杂交动物细胞融合理论根底细胞的全能性、细胞膜的流动性细胞增殖、细胞膜的流动性融合前处理酶解法去除细胞壁〔纤维素酶、果胶酶〕注射特定抗原，免疫处理正常小鼠诱导手段物理法:离心、振动、电激化学法：聚乙二醇〔PEG〕物理法:离心、振动、电激化学法：聚乙二醇生物法：灭活的病毒〔灭活的仙台病毒〕诱导过程第一步：原生质体的制备〔酶解法〕第二步：原生质体融合〔物、化法〕第三步：杂种细胞的筛选和培养第四步：杂种植株的诱导与鉴定正常小鼠免疫处理动物细胞的融合〔物、化、生法〕杂交瘤细胞的筛选与培养专一抗体检验阳性细胞培养单克隆抗体的提纯结果获取杂种植株获得杂种细胞，以生产细胞产品用途和意义克服远缘杂交的不亲和障碍，大大扩展杂交的亲本组合范围应用：白菜-甘蓝等杂种植株〔1〕制备单克隆抗体〔2〕诊断、治疗、预防疾病，例如“生物导弹”治疗癌症4.单克隆抗体〔1〕抗体：一种效应B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中别离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。〔2〕单克隆抗体的制备过程：对免疫小鼠注射特定的抗原蛋白〔目的使小鼠产生了效应B细胞〕；提取B淋巴细胞；同时用动物细胞培养的方法培养骨髓瘤细胞并提取；促使它们细胞融合[注：融合的结果是有很多不符合要求的；如有2个B淋巴细胞融合的细胞等，所以要进行筛选]；在特定的选择培养基上筛选出融合的杂种细胞[特点是能迅速大量增殖，又能产生专一的抗体]；然后对它进行克隆化培养和抗体检测[筛选出能够分泌所需抗体的杂种细胞]；最后将杂交瘤细胞在体外做大规模培养或注射入小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠腹水中可得到大量的单克隆抗体。〔3〕杂交瘤细胞的特点：既能大量繁殖，又能产生专一的抗体。〔4〕单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。〔5〕单克隆抗体的作用：作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合，具有准确、高效、简易、快速的优点。用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症治疗，可制成“生物导弹”，也有少量用于治疗其它疾病。1.植物组织培养与动物细胞培养的比拟植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞的增殖培养基的物理性质固体液体〔合成培养基〕培养基的成分水、矿质元素、维生素、蔗糖、氨基酸、琼脂、激素等葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等结果培育成新的植株或组织培育成细胞系或细胞株培养目的①植株快速繁殖②脱毒植株的培育③人工种子④生产药物、杀虫剂等⑤转基因植物的培育①蛋白质生物制品的生产②皮肤移植材料的培育③检测有毒物质④生理、病理、药理学研究取材植物幼嫩的部位或花药等动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织其他条件均为无菌操作，需要适宜的温度、pH、O2等条件3．生物技术与育种技术原理优点缺点诱变育种基因突变提高生物廉价的频率，使后代变异性状较快稳定；可大幅度改进某些性状，缩短育种进程盲目性大，需大量处理供试材料杂交育种基因重组使位于不同个体的优良性状集中于一个个体周期长，难以克服远缘杂交不亲和的障碍单倍体育种染色体变异获得个体均为纯种，明显缩短育种年限技术复杂，须与杂交育种配合、且需细胞工程参与多倍体育种染色体变异器官大，提高产量和营养成分适用于植物，动物方面难以展开基因工程育种分子遗传学原理打破物种界限，定向地改造生物遗传性状技术要求高细胞工程育种细胞生物学和分子生物学原理、基因突变植物体细胞杂交可以克服远缘杂交不亲和的障碍，扩大了用于杂交的亲本范围；定向改造生物遗传性状远缘杂种不能按人们的需要表现出亲代的优良性状4、细胞增殖：无丝分裂〔蛙的红细胞〕①真核细胞分裂的方式：有丝分裂〔形成体细胞〕最主要的分裂方式减数分裂〔形成生殖细胞〕②细胞周期：细胞周期是连续分裂的细胞从前次分裂完成到后次分裂完成所经历的过程，包括两次分裂之间的分裂间期和正在分裂的分裂期。③过程分裂间期前期中期后期末期变化DNA分子复制，有关蛋白质合成核膜、核仁消失，纺锤体、染色体出现着丝点排列在细胞中央的赤道板上着丝点分裂，姐妹染色单体别离核膜、核仁出现，纺锤体、染色体消失，细胞中央出现细胞板染色体形态复制螺旋化排队别离解旋DNA含量2N4N4N4N4N4N2N染色体数2N2N2N4N4N2N单体数04N4N4N00④有丝分裂的意义遗传物质的稳定对于生物十分重要，染色体上有遗传物质，必须准确而万无一失地传递给后代！纺锤丝的形成保证了每个染色体分裂后平均分配到两个子细胞中去。从而保证染色体的的遗传物质在亲代与子代细胞之间稳定的传递。一、判断题：1、从理论上讲，由于细胞核具有基因组全套遗传信息，生物的体细胞有潜力直接发育成胚胎和形成与核供体完全相同的个体克隆。2、基因克隆技术和细胞克隆技术是现代生物技术中的关键技术。3、胚胎细胞克隆属于严格意义上的动物克隆4、植物组织切口处的细胞在创伤的刺激下发生脱分化而继续进行分裂增殖、形成愈伤组织。5、由于植物细胞具有全能性，不同种类植物或同种植物的不同基因型个体，细胞全能性的表达程度相同。6、植物细胞工程技术就是在原生质体培养的根底上的原生质体融合技术。7、细胞系泛指可能传代的细胞，细胞株是具有特殊性质的细胞系。8、细胞克隆的要求必须保证别离出来的细胞是一个或多个别离的细胞。9、核移植就是利用一个细胞的细胞核〔供体核〕来取代另一个细胞中的细胞核，形成一个重建的“合子”。10、罗斯林研究所克隆成功的绵羊“多莉”，是利用胚胎细胞进行核移植克隆的。11、从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。但是，同一个体的不同组织却表现不同的形态、结构和生理功能，这是因为在分化的过程中细胞的基因型会发生变化。12、离体的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程叫做脱分化，也叫去分化。13、能克服远源杂交不亲和的技术是：基因工程、细胞融合和胚胎移植。14、将胡萝卜韧皮部的细胞放入配制的培养基中培养，获得了许多完整的植株，这种繁殖方式和现代生物技术分别属于：出芽生殖和组织培养。15、具有完整细胞核的细胞，离体状态，导入外源基因、一定的营养物质和植物激素，均是将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株的必要条件。16、用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织，该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成。17、科学家用小鼠的骨髓瘤细胞与经过免疫的B淋巴细胞融合，得到的杂交细胞能够用于癌症的治疗。18、动物克隆技术能够有选择的繁殖某一性别的家畜。19、我国从荷兰引进了十几头性状优良的乳牛，畜牧工作者为了推广这一优良品种，利用本地的雌性黄牛，迅速繁殖出一大批纯种荷兰乳牛，这种成熟的繁育方法是：胚胎分割移植。20、原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞。21、利用植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离的限制，培育远缘杂种22、不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交过程23、用动、植物成体的体细胞进行离体培养都可表达细胞的全能性且都需用CO2培养箱都须用液体培养基24、卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加25、胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割26、胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点27、胚胎干细胞是一类未分化细胞，可从早期胚胎中别离获取二、简答题1、右图为细胞融合的简略过程，请据图答复：〔1〕假设A、B是植物细胞，在细胞融合之前已用_____________处理，除去了_______；由A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法是____________________。融合完成的标志是________。〔2〕假设A、B是植物细胞，那么形成的D细胞还要应用_______________________技术把D培养成植株。〔3〕假设A、B是动物细胞，一般取自_____，然后用使其分散开来；由A、B到C的过程中，常用的不同于植物细胞融合的手段是_________，A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有。〔4〕假设该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠效应B细胞，那么，在获得此细胞之前，小鼠已经被注射了。注射后小鼠身体发生了相应的免疫反响，生成了_______________________________________________，图中B为____________。〔5〕假设该过程仍是制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，所形成的C有种〔只考虑两两融合的细胞〕，用来培养的D细胞应该是______。从中筛选出它的方法是用______培养基培养，获得D后，常用的培养方法是培养和___________培养。答案：纤维素酶和果胶酶细胞壁离心振动电刺激产生新的细胞壁植物组织培养幼龄动物的组织或器官或胚胎胰蛋白酶灭活的病毒诱导流动性抗原效应B细胞、记忆细胞、抗体骨髓瘤细胞3杂交瘤细胞特定选择培养基体外体内2、有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。以下为细胞融合的简略过程，据图答复相关问题：(1)假设a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中别离出基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是▲。(2)假设a、b表示两种植物体细胞，那么由d细胞形成杂种植株的原理是▲，这种育种方法的优点是▲。(3)假设a、b分别为骨髓瘤细胞和效应B淋巴细胞，那么d细胞特点是▲。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比拟，具有▲的特点。生产上一般不能通过直接培养效应B细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是▲。(4)以下各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。顺序是▲(2分)40．(8分)(1)大于800lx光照(2)植物细胞的全能性克服了远源杂交不亲和的障碍(3)既能无限繁殖，又能产生特定的抗体特异性强、灵敏度高、化学性质单一(答出两个可得1分)效应B细胞高度分化，不能增殖(4)(2分)三、胚胎工程胚胎工程是指对动物〔主要是哺乳动物〕早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内生产后代，以满足人类的各种需求。〔一〕体内受精和早期胚胎发育1、体内受精2、动物胚胎发育受精卵形成场所是母体的输卵管上段。〔1〕卵裂期：特点：细胞有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎的总体体积并不增加，或略有减小。桑椹胚：特点：胚胎细胞数目到达32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹。是全能细胞。〔2〕囊胚：特点：细胞开始出现分化〔该时期细胞的全能性仍比拟高〕。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘。中间的空腔称为囊胚腔。[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来]〔3〕原肠胚：特点：有了三胚层的分化，具有囊胚腔和原肠腔。[细胞分化在胚胎期到达最大限度]〔4〕器官的系统的构建形成幼体〔二〕胚胎工程技术1、体外受精[属有性生殖过程]：a卵母细胞的采集和培养对动物用促性腺激素处理，促进超数排卵b精子的采集和获能对啮齿动物、兔、猪等的精子用培养法〔放入人工配制的获能液中〕；对牛、羊等精子用化学法〔放在肝素或钙离子载体溶液中〕2、早期胚胎的体外培养：a培养液成分：无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等b当胚胎发育到适宜的阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。将体外培养的早期胚胎移植到受体子宫时，应选择发育至桑椹胚或囊胚期的胚胎，从而有利于提高妊娠率。3、胚胎干细胞〔1〕定义：哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中别离出来。〔2〕特征：在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，胚胎干细胞可以只增殖而不发生分化，这就要求培养时参加抑制因子或先制备一层细胞，这种细胞可分泌一些抑制细胞分化的物质，称为饲养层细胞。此外，胚胎干细胞还可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。〔3〕主要用途是：①可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律；②是在体外条件下研究细胞分化的理想材料，在培养液中参加分化诱导因子，如牛黄酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段；③可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合症、少年糖尿病等；④利用可以被诱导分化形成新的组织细胞的特性，移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能；⑤随着组织工程技术的开展，通过ES细胞体外诱导分化，定向培育出人造组织器官，用于器官移植，解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥的问题。4、胚胎分割(1)概念：是指采用机械方法将早期胚胎切割2等份、4等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，属于无性繁殖，可看作克隆。(2)材料：发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚。〔桑椹胚至囊胚的发育过程中，细胞开始分化，但其全能性仍很高，也可用于胚胎分割。〕(3)显微操作过程：对囊胚阶段的胚胎分割时，要将内细胞团均等分割，否那么会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。5、胚胎移植(1)定义：胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。〔供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种。〕(2)胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期，充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。(3)生理学根底：①动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。②早期胚胎在一定时间内处于游离状态。这就为胚胎的收集提供了可能。③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反响。这为胚胎在受体的存活提供了可能。④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。(4)根本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。配种或人工授精。对胚胎的收集、检查、培养或保存。④对胚胎进行移植。⑤移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。〔5〕地位：如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。〔三〕说明细胞的分化举例说明细胞的全能性1、细胞分化〔1〕概念：在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。〔2〕原因：不同的细胞中遗传信息的执行情况是不同的。〔3〕特点：普遍性、持久性、稳定性、不可逆性〔4〕意义：细胞分化是生物个体发育的根底。2、细胞全能性的概念〔1〕定义：生物体内，已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。植物细胞具有全能性；动物细胞核保持全能性。〔