甘草提取皂苷

关于甘草提取皂苷甘草(Glycyrrhizauralensis)别名甜草根、红甘草、国老、甜草、甜根子等,是我国传统常用中草药之一,为豆科(Leguminosae)甘草第2页,共17页，2024年2月25日，星期天甘草属(GlycyrrhizaLinn)多年生草本植物,具有极广的临床应用价值[1]。甘草性平味甘,具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药的功效[2],同时甘草还是迄今为止发现的一种最好的天然甜味剂。甘草的用途第3页,共17页，2024年2月25日，星期天药品名称甘草次酸药品英文名GlycyrrhetinicAcid

甘草次酸别名甘草亭酸结构式第4页,共17页，2024年2月25日，星期天本品为白色结晶性粉末；无臭，无味。本品在吡啶中易溶，在乙醇或氯仿中溶解，在汽油或乙醚中微溶，在水中不溶。

熔点本品的熔点（中国药典2000年版二部附录VIC）为288～297℃。

比旋度取本品，精密称定，加无水乙醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含10mg的溶液，依法测定（中国药典2000年版二部附录VIE），比旋度为＋151°～＋161°性状第5页,共17页，2024年2月25日，星期天甘草次酸药理作用

甘草次酸具有抗菌、抗肿瘤及肾上腺皮质激素样作用，可制成抗炎抗过敏制剂，用于治疗风湿性关节炎、气喘、过敏性及职业性皮炎、眼耳鼻喉科炎症及溃疡等

甘草次酸是经典的抗炎药物，将其应用于化妆品中可调节皮肤的免疫功能，增强皮肤的抗病能力，消除炎症、预防过敏、清洁皮肤，同时还能解除化妆品及其它外界因素对皮肤的毒副作用。它还能有效抑制酪氨酸酶的活化，阻止黑色素的产生，具有美白功效第6页,共17页，2024年2月25日，星期天

化学反应：（1）醋酐一浓硫酸反应（Liebermann－Burchard）：将样品溶于醋酐中，加浓硫酸一醋酐（1：20），可产生黄→红→紫→蓝等颜色变化，最后褪色。（2）三氯醋酸反应（Rosen－Heimer）：将样品溶于氯仿，喷25％三氯醋酸乙醇溶液，加热至100℃，生成红色，渐变为紫色。（3）氯仿一浓硫酸反应（Salkowski反应）样品溶于氯仿，沿壁滴加浓硫酸后，在氯仿层呈现红色或蓝色，硫酸层有绿色荧光。第7页,共17页，2024年2月25日，星期天工艺流程第8页,共17页，2024年2月25日，星期天甘草次酸的提取纯化第9页,共17页，2024年2月25日，星期天取甘草酸单钾盐,加5%H2SO4,加热回流10小时,放冷,滤取不溶物,洗去酸液,干燥得甘草次酸粗品.粗品溶于热三氯甲烷,趁热滤过,滤取三氯甲烷液,放冷,通过氧化铝色谱柱,三氯甲烷洗脱,收集三氯甲烷洗脱液,回收,残渣(甘草次酸)加乙醇热溶,再加1/2体积热水,放置,析晶得甘草次酸结晶.

第10页,共17页，2024年2月25日，星期天薄层色谱检识:

（1）薄层板:

硅胶G-CMC-Na板

试样:甘草皂苷精制品乙醇溶液;甘草皂苷元精制品乙醇溶液

（2）对照品:甘草皂苷对照品乙醇溶液;甘草皂苷元对照品乙醇溶液;

（3）展开剂:正丁醇-冰醋酸-水(4∶1∶2).

（4）显色剂:喷5%磷钼酸乙醇溶液,110℃加热10min显色.

第11页,共17页，2024年2月25日，星期天

取水解后所得的粗皂苷元溶于1ml乙醇，作为供试品溶液。另取甘草次酸对照品，加无水乙醇溶解制成每1ml中含lmg的溶液，作为对照溶液。吸取供试液和对照液各5ul分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（30～60℃）—苯一醋酸乙酯一冰醋酸（10：20：7：0.5）为展开剂，展开取出，晾干，喷以10%6磷钼酸乙醇溶液，在105℃烘约5分钟。供试品溶液在与对照溶液相应的位置上，显相同颜色的斑点。薄层色谱鉴定：第12页,共17页，2024年2月25日，星期天

使用硅胶G‰薄层板，甲苯：乙酸乙酯：甲酸（30：15：1）为展开剂，在紫外光灯（254nm）下定位，248nm波长处检测。结果表明甘草次酸点样量在4．90～24．50μg／L范围内呈现良好的线性关系，其回归方程为：Y=28．258X＋0．0285，r=0．9995，平均回收率为98．296，RSD=1．87％，且样品在100min内稳定。薄层层析-紫外分光光度法测定甘甘草次酸含量的方法。第13页,共17页，2024年2月25日，星期天

（1）身体直接接触化学物品后应及时用肥皂及大量水冲洗，如碱性试剂可用l％HAc溶液冲洗，酸性试剂可用3％NaHCO3溶液冲洗。

（2）用湿布闷盖或用灭火器进行灭火，切勿轻易用水，以免扩大火势。

实验室注意事项

（3）石油醚使用30－60℃沸程，注意挥散、密闭第14页,共17页，2024年2月25日，星期天思考题(1)甘草的基原是什么？(2)甘草次酸的结构特点是什么？（3）熔点测定是多少第15页,共17页，2024年2月25日，星期天答案