江苏2023-2024学年高二期中测生物生物试题01（解析版）

高级中学名校试卷PAGEPAGE1江苏2023-2024学年高二期中测试卷01（考试时间：75分钟试卷满分：100分）一、单项选择题：共14题，每题2分，共28分。每题只有一个选项最符合题意。1．传统工艺酿酒过程中，会出现“酿酒不成反酿醋”的现象，即酿出的酒水变酸。下列相关说法错误的是（

）A．酒和醋都是利用传统发酵技术制作的食品，它们是我国传统饮食文化的重要组成部分B．“酸酒”产生的过程中，糖类直接被分解成为乙酸C．“酿酒不成反酿醋”的原因可能是发酵条件控制出现问题，如容器的密封性D．酿酒前将酿酒容器高温消毒不一定能够防止酒变酸〖答案〗B〖祥解〗参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：醋酸菌是一种好氧性细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。若氧气、糖源充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；若缺少糖源、氧气充足，醋酸菌将乙醇变为乙醛，乙醛变为醋酸。【详析】A、酒和醋都是利用传统发酵技术制作的食品，它们是我国传统饮食文化的重要组成部分，A正确；B、在酿酒的过程中糖类被酵母菌利用，由于缺少糖源，醋酸菌将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为乙酸，B错误；C、酿酒控制的发酵条件是无氧，温度控制在18~30℃，酿醋控制的发酵条件是有氧，温度控制在30—35℃，若酿酒过程容器的密封性出现问题，醋酸菌大量繁殖就可能出现“酿酒不成反酿醋”，C正确；D、酿酒前将酒缸高温消毒不一定能够防止酒变酸，若发酵过程中没有严格把控发酵条件，也可能导致酒变酸，D正确。故选B。2．下图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精氨酸依赖型菌并进行筛选的过程示意图。已知精氨酸依赖型菌株不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长，但可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。下列相关叙述错误的是（

）

A．野生型菌液的培养皿中不会出现菌落B．乙培养基中加入了精氨酸，甲中未加入C．乙中的菌落是通过影印法接种获得的D．甲中的菌落B为鸟氨酸发酵的优良菌种〖答案〗B〖祥解〗由图分析可知，图中①表示将紫外线照射处理的菌液接种在含有精氨酸的培养基上，②表示影印到不含精氨酸的培养基上继续培养，图甲中有A、B两种菌落，图乙中只有A菌落，因此甲中A表示野生型谷氨酸棒状杆菌，B为精氨酸依赖型菌株。【详析】A、液体培养基的作用是让细菌快速大量繁殖，细菌在固体培养基上才能形成菌落，A正确；B、图示为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精氨酸依赖型菌并进行筛选的过程示意图，精氨酸依赖型菌株不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长，因此A为野生型谷氨酸棒状杆菌，B为精氨酸依赖型菌株，乙培养基上没有B菌落，据此推测乙培养基与甲相比缺少了精氨酸，B错误；CD、乙中的菌落是通过影印法获得的，菌落A是野生型菌种，菌落B为精氨酸依赖型菌株，B可作为鸟氨酸发酵的优良菌种，CD正确。故选B。3．黄河入海口石油降解菌的筛选是修复石油污染，保护黄河的重要工作，如图表示筛选石油降解菌的过程。下列叙述正确的是（

）A．图示接种方法为稀释涂布平板法，据结果推测1g土壤中石油分解菌数最多为1.6×106个B．分离、纯化石油分解菌时，还可采用平板划线法且该方法也需要进行③步骤操作C．稀释涂布时，利用涂布器从盛有菌液的试管中蘸取菌液，进行涂布D．进行步骤⑤时，应用液体培养基培养④中的石油降解菌，并检测菌的数量和石油降解能力〖答案〗D〖祥解〗1、每克样品中的菌株数=（C÷V）×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。2、常用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法，其中稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的步骤为土壤取样→溶化→梯度稀释→涂布平板。3、由题图可知，①称取10g土壤；②10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中制备土壤悬浮液，稀释了101；③进行梯度稀释，即依次稀释至101、102、103稀释度；④使用稀释涂布平板法筛选菌株，接种了104稀释度菌液0.1mL，长出16个菌落；推测1g土壤中石油分解菌数=16÷0.1×104÷10=1.6×105个；⑤鉴别优质菌种，保存备用，推测使用甘油管藏法或临时保存法。【详析】A、根据题图分析可知，图示接种方法为稀释涂布平板法，涂布平板的稀释度为104，据结果推测1g土壤中石油分解菌数最少为16÷0.1×104=1.6×106个，A错误；B、根据题图分析可知，③进行梯度稀释，虽然分离、纯化石油分解菌时，可以采用稀释涂布平板法，也可以采用平板划线法，但平板划线法不需要进行梯度稀释，也就是不需要进行③步骤操作，B错误；C、稀释涂布时，先取少量菌夜（不超过0.1ml）滴加到培养基表面，再将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却，用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面，而不是利用涂布器从盛有菌液的试管中蘸取菌液，进行涂布，C错误；D、根据题图分析可知，⑤鉴别优质菌种和保存备用，无论使用甘油管藏法或临时保存法，都要应用液体培养基培养④中的石油降解菌，获得菌液，而鉴别优质菌种就是要检测菌的数量和石油降解能力，D正确。故选D。4．如图为酱油的制作流程，其中米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油所需的蛋白酶、脂肪酶等，该过程需要提供营养物质、通入空气。下列说法正确的是（）A．大豆、小麦和麦麸都要蒸煮的目的是为了破坏酶的活性B．发酵罐发酵需要将罐内的pH控制在中性或弱碱性条件下C．发酵罐发酵类型为有氧发酵，而发酵池发酵为无氧发酵D．米曲霉在发酵罐内发酵的过程主要为产生大量酱油〖答案〗C〖祥解〗在提供主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。例如，在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至酸性；在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性；在培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。【详析】A、大豆、小麦和麦麸等原料中含有蛋白质、糖类和脂肪等营养物质，相当于培养基，在制作酱油时需要经蒸煮和适当配比处理，其目的是灭菌和调整营养配比从而满足微生物对营养物质的需求，A错误；B、发酵罐发酵需要黄曲霉菌，培养霉菌时，一般需要将培养基调至酸性，B错误；C、发酵罐发酵主要是米曲霉起作用，类型为有氧发酵，而发酵池发酵是乳酸菌和酵母菌起作用，为无氧发酵，C正确；D、根据题意信息可知，米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油所需的蛋白酶、脂肪酶等，该过程需要提供营养物质、通入空气，D错误。故选C。5．如图为某二倍体植株花药中未成熟的花粉在适宜培养基上形成完整植株的过程。下列有关叙述正确的是（）A．过程①②表示脱分化，过程③表示再分化B．过程①②需要液体培养基C．过程①②③说明花粉细胞具有全能性D．通过过程③获得的完整植株自交后代不会发生性状分离〖答案〗C〖祥解〗植物组织培养的过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株。图中①表示脱分化，②③表示再分化。【详析】A、离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株，图中过程①表示脱分化，②③表示再分化，A错误；B、过程①表示脱分化形成愈伤组织，②表示再分化形成丛芽，需要固体培养基，B错误；C、过程①、②、③是植物组织培养过程，由花粉细胞最终获得了完整植物个体，说明花粉细胞具有全能性，C正确；D、过程③获得的完整植株属于单倍体植株，高度不育，不能自交产生后代，D错误。故选C。6．植株甲金花菜是一种多年生开花植物，具有多种优良性状，另一种远缘植株乙青花菜存在抗除草剂基因，欲将植株乙细胞中抗除草剂基因引入植株甲中，进行了如下操作。下列说法错误的是（

）

A．过程A取顶芽细胞的操作有利于获得脱毒苗B．过程B中常用PEG诱导原生质体融合C．两个细胞融合完成的标志是再生出细胞壁D．获得的融合原生质体需放在无菌水中以防杂菌污染〖答案〗D〖祥解〗植物体细胞杂交技术是指将来源不同的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。【详析】A、植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无毒，因此过程A取顶芽细胞的操作有利于获得脱毒苗，A正确；B、过程B为诱导原生质体融合，常用PEG促融，B正确；C、杂种细胞融合完成的标志是再生出细胞壁，C正确；D、获得的融合原生质体（无细胞壁）不能放在无菌水中，以防原生质体吸水涨破，D错误。故选D。7．下图为小鼠细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是（

）

A．动物细胞培养至一定代数，所培养的细胞全部都会衰老死亡B．为了保证细胞培养所需的无菌、无毒环境，可以添加适量的抗生素C．制备细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理组织块D．培养过程中，需要CO2浓度维持在5%左右，以促进细胞呼吸〖答案〗B〖祥解〗动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养，在传代培养的过程中可能会发生癌变。动物细胞培养的目的是获得细胞群或细胞产物。【详析】A、动物细胞培养至一定代数，部分细胞的遗传物质可能发生改变，并且带有癌变的特点，能在培养条件下无限制地传代下去，A错误；B、抗生素能抑制细菌生长，因此为了保证细胞培养所需的无菌、无毒环境，可以添加适量的抗生素，B正确；C、制备细胞悬浮液时应用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，不能使用胃蛋白酶，因为胃蛋白酶需要在酸性环境下才能起作用，但这样的环境不适于细胞生存，C错误；D、恒温培养箱中的CO2浓度维持在5%左右，CO2的作用是维持培养液的pH，D错误。故选B。8．为解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失问题，研究者将抗原刺激后的B淋巴细胞，用EBV（一种病毒颗粒）感染，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对Oua敏感。骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感。下图表示操作过程。下列分析错误的是（

）A．B淋巴细胞可从多次间歇注射某种抗原的动物脾脏中获得B．HAT培养基和Oua筛选去除的是未融合的EBV转化细胞C．杂交瘤细胞染色体丢失可能会导致抗体的产生能力下降D．图中获得的杂交瘤细胞需经抗体检测筛选后才可用于生产〖答案〗B〖祥解〗1、单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。2、两次筛选：筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。【详析】A、对动物进行间歇注射抗原处理，以刺激动物机体产生相应的B淋巴细胞；B淋巴细胞在骨髓中发育成熟，可分布于淋巴结和脾脏等处，故B淋巴细胞可从多次间歇注射某种抗原的动物脾脏中获得，A正确；B、据题意“EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对Oua敏感；骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感”可知，HAT培养基去除的是未与EBV转化细胞融合的骨髓瘤细胞和自身融合的骨髓瘤细胞，Oua筛选去除的是未与骨髓瘤细胞融合的EBV转化细胞和自身融合的EBV转化细胞，B错误；C、抗体是由浆细胞分泌的，杂交瘤细胞若丢失来自B淋巴细胞的染色体，可能会导致抗体产生能力下降，C正确；D、图示获得的杂交瘤细胞还需要经过进一步的筛选，用专一抗体检测呈现阳性的杂交瘤细胞才能直接用于生产单克隆抗体，D正确。故选B。9．动物的某种退行性神经疾病由基因t突变为基因T导致。随着生物工程技术的发展和基因编辑（CRISPR/Cas9）技术的出现，为治疗该疾病提供了如下新思路。以下说法错误的是（）

A．①过程需采用MⅡ期卵母细胞B．ES细胞能分化为动物体内任何一种组织细胞C．过程④的培养基中需要添加诱导分化因子D．移植的神经干细胞会成为抗原，引发免疫排斥反应〖答案〗D〖祥解〗核移植技术指的是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。【详析】A、MII时期的卵母细胞体积大，易操作，细胞质中含有促使细胞核全能性表达的物质和营养条件，所以体细胞核移植技术要选择MII期的卵母细胞作为受体细胞，A正确；B、ES细胞的细胞核大，核仁明显，具有发育的全能性，可以诱导分化成动物体内任何一种组织细胞，B正确；C、在培养液中加入诱导分化因子，就可以诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化，用于患者的组织器官移植，C正确；D、由于移植的神经干细胞的遗传物质与患者相同，不会成为抗原，因而不会发生免疫排斥，可用于治疗该退行性神经疾病，D错误。故选D。10．下图为科研人员利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合鼠的过程，相关叙述正确的是（

）A．嵌合鼠的培育依据的原理是基因重组和细胞全能性B．过程①中需利用相关技术去除早期胚胎外的滋养层C．过程②中可利用聚乙二醇诱导卵裂球细胞发生融合D．嵌合胚胎发育到囊胚时期细胞发生分化〖答案〗D〖祥解〗由图可知，将白鼠的早期胚胎的卵裂球和黑鼠的早期胚胎的卵裂球放在一起培养，将形成嵌合胚胎，将嵌合胚胎发育至囊胚后移植到代孕母体内发育，可形成嵌合鼠。【详析】A、嵌合鼠的培育依据的原理是细胞全能性，并没有进行基因重组，A错误；B、过程①中需利用相关技术去除早期胚胎外的透明带，而滋养层属于早期胚胎的一部分，B错误；C、过程②不需要诱导卵裂球细胞发生融合，C错误；D、过程③操作前需对多只代孕母鼠进行同期发情处理，以保证受体与供体的生殖器官的生理变化是相同的，D正确。故选D。11．下列有关限制性内切核酸酶的叙述，正确的是（）A．用限制性内切核酸酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，被水解的磷酸二酯键有2个B．限制性内切核酸酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大C．—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性内切核酸酶切出的黏性末端可用DNA连接酶连接D．只有用相同的限制性内切核酸酶处理含目的基因的片段和质粒，才能形成重组质粒〖答案〗B〖祥解〗限制酶的来源、作用及其结果：（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。（2）作用（特异性）：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（3）结果：形成黏性末端或平末端；特别注意：用限制酶切割DNA时，每切开一个切口需要水解两个磷酸二酯键。【详析】A、用限制性内切核酸酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，需要切割目的基因的两侧，又因DNA为双链结构，因此要断裂4个磷酸二酯键，即被水解的磷酸二酯键有4个，A错误；B、限制酶具有专一性，限制性内切核酸酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大，B正确；C、—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性内切核酸酶切出的黏性末端不同，分别为—CATG和GATC—，因此不能用DNA连接酶连接，C错误；D、用不同的限制性内切核酸酶处理含目的基因的DNA片段和质粒，若产生的黏性末端相同，则也能形成重组质粒，D错误。故选B。12．若要利用某目的基因（见图甲）和P1噬菌体载体（见图乙）构建重组DNA（见图丙），限制性内切核酸酶的酶切位点分别是BglⅡ（－A↓GATCT－），EcoRⅠ（－G↓AATTC－）和Sau3AⅠ（－↓GATC－）。下列分析合理的是（）A．用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体B．用BglⅡ和EcoRI切割目的基因和P1噬菌体载体C．用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体D．用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体〖答案〗D〖祥解〗限制酶选择原则：（1）应选择切点位于目的基因两端的，不能位于目的基因内部，防止破坏目的基因，同时为避免目的基因和质粒自身环化或随意连接，可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒。（2）根据质粒特点确定限制酶种类具体原则：①保证切割的黏性末端与目的基因的相同，以便两者能够连接。②保证切割后的质粒至少保留一个标记基因，以便进行筛选；保留复制原点，以便在受体细胞中维持稳定和表达。【详析】A、用EcoRⅠ切割目的基因和P1质粒载体，产生相同的黏性末端，用DNA连接酶连接时可能会发生反向连接，A错误；B、用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1质粒载体，这与A选项中仅用EcoRⅠ切割一样，B错误；C、用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1质粒载体，会产生相同的黏性末端，可能会发生反向连接，C错误；D、只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1质粒载体，产生不同的黏性末端，防止发生反向连接，且这样目的基因插入运载体后，RNA聚合酶的移动方向与图丙实线方向相同，D正确。故选D。13．胰岛素用于治疗糖尿病，但胰岛素注射后易在皮下堆积，需较长时间才能进入血液，进入血液后又易被分解，因此治疗效果受到影响。科研人员研制了速效胰岛素，其生产过程如图所示。下列说法错误的是（）A．速效胰岛素的生产需要用到蛋白质工程和发酵工程B．大肠杆菌合成的新的胰岛素不能正常发挥作用C．除人工合成DNA外，还可以通过定点突变技术获得目的基因D．可以用Ca2+处理的方法直接将新的胰岛素基因导入大肠杆菌细胞中〖答案〗D〖祥解〗蛋白质工程的过程：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）。蛋白质工程得到的蛋白质一般不是天然存在的蛋白质。【详析】A、图示的前半部分是利用蛋白质工程设计速效胰岛素的生产过程，后半部分是利用发酵工程生产速效胰岛素的过程，A正确；B、大肠杆菌是原核生物，没有内质网和高尔基体对胰岛素原进行加工，因此大肠杆菌合成的新的胰岛素不能正常发挥作用，B正确；C、基因定点突变是指按照特定的要求，使基因的特定序列发生插入、删除、置换、重排等变异，除人工合成DNA外，还可以通过定点突变技术获得目的基因，C正确；D、可以用Ca2+处理的方法可以将含有新的胰岛素基因的基因表达载体导入大肠杆菌细胞中，D错误。故选D。14．下列有关生物技术的安全性与伦理问题的说法正确的是（

）A．转基因食品中的外源基因经过食用后会进入人体细胞并整合到人体的基因组中B．任何情况下我们必须坚决抵制生物武器，防止生物武器及其技术和设备的扩散C．试管婴儿技术已经成熟，为保证婴儿的健康可对植入前的胚胎进行遗传学诊断D．生殖性克隆和治疗性克隆都涉及到核移植技术，中国政府不接受任何克隆试验〖答案〗B〖祥解〗目前对转基因生物安全性的争论主要是食物安全和环境安全，另外还有生物安全问题，转基因生物的安全性问题。转基因食品、产品上都要标注原料来自转基因生物。当今社会的普遍观点是反对生殖性克隆人实验，但不反对治疗性克隆；试管婴儿可以设计婴儿的性别，反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿。【详析】A、转基因食品中含有外源基因，但是食用后外源基因会被酶水解，不能进入人体细胞并改变人体遗传物质，A错误；B、在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，反对生物武器及其技术和设备的扩散，以确保人类生存安全，B正确；C、试管婴儿技术已经成熟，设计试管婴儿技术对植入前胚胎进行遗传学诊断，判断其是否含有遗传病基因或者异常染色体，C错误；D、克隆人技术并未完全成熟，中国政府不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验，但是不反对治疗性克隆，D错误。二、多项选择题：共5题，每题3分，共15分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。15．某种物质A（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解A。研究人员按照如图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解A的细菌菌株。图中③将M中的菌液稀释一定倍数后，取0.1mL涂布到平板上，初步估测摇瓶M中1mL菌液中细菌数为2.4×108个。下列说法错误的是（）

A．实验时，淤泥及盛有培养基的摇瓶通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌B．③接种方法为稀释涂布平板法，涂布时用涂布器蘸取菌液均匀涂布于平板上C．乙平板中大小不同的菌落是分解菌分解能力不同导致的D．乙平板上菌落数平均为240个，菌液稀释倍数为105〖答案〗ABC〖祥解〗分析题图：①为淤泥取样进行稀释，②为接种到液体培养基上，③稀释涂布平板法接种到以S为唯一碳源和氮源的选择培养基上，其中Y为琼脂，④为挑取单菌落接种，⑤在以A为唯一碳源和氮源的选择培养基上进一步筛选出高效降解A的菌株。【详析】A、实验时，从淤泥中分离得到能高效降解A的细菌菌株，则图①为淤泥取样进行稀释，可以取淤泥加无菌水制成菌悬液，淤泥中有菌种，因此不能进行灭菌处理；盛有培养基的摇瓶通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，A错误；B、识图分析可知，③稀释涂布平板法接种到以A为唯一碳源和氮源的选择培养基上，因此步骤③的接种工具是涂布器，但是不能用涂布器蘸取菌液，应该将菌液加入到培养基中，用涂布器进行均匀涂抹，B错误。C、乙平板中大小不同的菌落说明分解菌对物质A的分解能力不同，但是乙平板中可能还存在其他分解菌，也可能是不同分解菌所形成的菌落大小不同，C错误。D、利用稀释涂布平板法对细菌进行计数，要保证每个平板上长出的菌落数平均为240个，假设稀释倍数为a，根据摇瓶M中1mL菌液中细菌数为2.4×108个，在每个平板上涂布100μL（即0.1mL）稀释后的菌液，则有240×a÷0.1=2.4×108，则稀释倍数a=105，D正确。故选ABC。16．为了培育新型苜品种，科学家们用野生型清水紫花苜和里奥百脉根为材料进行了实践研究。研究的主要流程如图所示，判断以下说法正确的是（

）

（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，里奥百脉根原生质体对其较为敏感。R-6G可阻止线粒体的呼吸作用，清水紫花蓿原生质体对其较为敏感。）A．制备两种原生质体所需的酶溶液含纤维素酶和果胶酶B．本研究主要用到的技术是植物组织培养技术，目的是获得杂种植株C．图中①的完成依赖细胞膜的流动性，②需要给予适当的光照，③一般不需要光照D．用IOA和R-6G处理的目的是筛选出杂种细胞，杂种细胞能够存活的原因是代谢途径互补〖答案〗ABD〖祥解〗分析题图：图中①表示原生质体融合形成杂种细胞以及杂种细胞的增殖，②表示脱分化过程，③表示再分化过程。【详析】A、由于植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，根据酶的专一性可知，制备两种原生质体所需的酶溶液含纤维素酶和果胶酶以去除细胞壁制备原生质体，A正确；B、本研究所用技术是植物体细胞杂交技术，其中包括原生质体融合和植物组织培养技术，主要用到的技术是植物组织培养技术，目的是获得杂种植株，B正确；C、图中①示原生质体融合形成杂种细胞的过程，该过程的完成依赖细胞膜的流动性，②表示脱分化过程，脱分化需要避光处理，③表示再分化过程，再分化需要给予光照处理，C错误；D、由题意可知，IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，里奥百脉根原生质体对其较为敏感，R-6G可阻止线粒体的呼吸作用，清水紫花蓿原生质体对其较为敏感，用IOA和R-6G处理的目的是筛选出杂种细胞，杂种细胞能够存活的原因是代谢途径互补，D正确。故选ABD。17．如图所示为治疗性克隆的基本过程，首先取病人的体细胞核，移植到去核的卵母细胞中，在早期胚胎形成后，从中分离获得胚胎干细胞（ES细胞），对ES细胞进行基因修饰和定向分化处理，将定向分化后的细胞移植给病人，从而达到治疗疾病的目的。下列相关叙述正确的是（

）

A．接受细胞核的卵母细胞处于减数第二次分裂中期B．获得图中去核的卵母细胞时，可通过显微操作去核C．图中形成的器官用于移植，理论上可以避免免疫排斥反应D．治疗性克隆过程采用的技术有核移植技术和胚胎移植技术〖答案〗ABC〖祥解〗减数分裂是有性生殖的生物产生生殖细胞时，从原始生殖细胞发展到成熟生殖细胞的过程。这个过程中DNA复制一次，细胞分裂两次，产生的生殖细胞中染色体数目是本物种体细胞中染色体数目的一半。【详析】A、卵母细胞进行减数分裂时停止在减数第二次分裂中期，因此接受细胞核的卵母细胞处于减数第二次分裂中期，A正确；B、显微镜下可以通过显微操作去核，B正确；C、图中形成的器官来源于病人的细胞，用于移植，理论上可以避免免疫排斥反应，C正确；D、治疗性克隆过程采用的技术有核移植技术，不用进行胚胎移植技术，D错误。故选ABC。18．线粒体脑肌病是由线粒体DNA异常而引起的人类遗传病，“三亲婴儿”技术的应用可避免该遗传病基因传递给子代，培育过程如下图，下列相关叙述正确的是（

）

A．该过程涉及细胞核移植、体外受精、胚胎移植等技术B．卵母细胞在MⅡ期与获能后的精子受精C．“三亲婴儿”胚胎早期发育依次经历了受精卵、囊胚、桑葚胚、原肠胚阶段D．“三亲婴儿”的基因来自于自己的父亲、母亲和捐献者〖答案〗AD〖祥解〗核移植技术指的是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体；用核移植的方法得到的动物称为克隆动物，原理是动物细胞核的全能性；动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。【详析】A、试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术，图示表示三亲婴儿的培育过程，由图可知，三亲婴儿的培育采用了细胞核移植、体外受精、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等技术，A正确；B、精子与卵子结合前，受精过程若想顺利进行必须满足两个条件：来自父方的精子要进行精子获能；来自母方的卵子要培养至培养至减数第二次分裂中期，B错误；C、胚胎发育的过程为受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚→幼体，所以哺乳动物胚胎的早期发育依次经历桑葚胚、囊胚、原肠胚等不同发育阶段，C错误；D、分析题意可知，“三亲婴儿”的细胞核基因一半来自母亲，一半来自父亲，线粒体基因来自于卵母细胞捐献者，D正确。故选AD。19．OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶，研究人员将这些基因分别与叶绿体转运肽（引导合成的蛋白质进入叶绿体）基因连接，构建多基因表达载体（载体中部分序列如图所示），利用农杆菌转化法转化棉花，在棉花叶绿体内构建了一条新的代谢途径，提高了棉花的产量。下列叙述错误的是（）A．四个基因都在棉花叶绿体内进行转录、翻译B．OsGLO1、EcCAT基因转录时以DNA的不同单链为模板C．应选用含卡那霉素的培养基筛选被农杆菌转化的棉花细胞D．若转基因棉花的产量提高则可确定四个基因在棉花中成功表达〖答案〗AC〖祥解〗基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，标记基因可便于目的基因的鉴定和筛选。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详析】A、四个基因在叶绿体外合成蛋白质，由叶绿体转运肽引导合成的蛋白质进入叶绿体，即这四个基因的转录和翻译过程都在叶绿体外完成，A错误；B、启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，图中OsGLO1、EcCAT基因启动子的位置不同，因而，转录时以DNA的不同单链为模板，B正确；C、卡那霉素抗性基因不在T-DNA上，没有转移到宿主细胞的染色体DNA上，因此应用潮霉素培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞，C错误；D、通过导入四个基因，在棉花叶绿体内构建了一条新的代谢途径，提高了棉花的产量，据此推测，若转基因棉花的产量提高则可确定四个基因在棉花中成功表达，D正确。故选AC。三、非选择题：共5题，共57分。20．青梅果肉营养丰富，成熟的青梅果实易腐烂，不易运输保存。进行青梅果酒研究，既可提高青梅资源利用率，又可提高产品附加值。图1为制作青梅果酒的简易装置图；由于青梅果肉含糖量低，往往在青梅果浆中加入白砂糖后再进行酿制，图2为在青梅果浆中添加白砂糖对酒精度和果酒感官评分的影响（感官评分越高，果酒的品质越高）。(1)在青梅果酒发酵过程中，图1装置中的充气口应处于状态，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，目的是。可在酸性条件下，用（填试剂名称）检测有无果酒产生。(2)生产酒和醋都需要严格筛选菌种和控制温度条件。在酒精发酵时，使用的菌种为；在醋酸发酵时，使用的菌种为。从图2可看出，青梅果酒酿制时果浆中初始糖浓度为时效果最佳，在此浓度之前，果酒酒精度随初始糖浓度的增加而增加，原因是。（答出2点）在青梅果酒酿制过程中，若发酵时间过长，产酒率不再增加，但会增加被杂菌污染的风险，若被醋酸菌污染，（填“会”或“不会”）经发酵产生大量醋酸，理由是。（答出2点）〖答案〗（1）关闭避免空气中其他微生物进入发酵装置（或防止空气中的微生物污染）重铬酸钾溶液（2）酵母菌醋酸菌20%糖类是主要的能源物质，可为酵母菌的生长、繁殖提供能源物质，还可作为酒精发酵的原料不会酒精发酵是无氧环境，而醋酸发酵需要氧气，且酒精发酵与醋酸发酵的温度不同〖祥解〗1、果酒工艺生产流程：选料一冲洗一压榨过滤一灭菌一接种一发酵一过滤一果酒。2、果酒制作过程中温度控制在18-25℃，先通气后密封，发酵10-12d；果醋制作过程中温度控制在30-35℃，全程通气，发7-8d。【详析】（1）果酒发酵是在无氧环境中进行的，因此在青梅果酒发酵时，图1装置中的充气口应关闭，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，目的是避免空气中其他微生物进入发酵装置(或防止空气中的微生物污染)。酒精可用酸性重铬酸钾来检测，颜色由橙色变成灰绿色，因此，可在酸性条件下，用重铬酸钾溶液与发酵液反应检测有无果酒产生。（2）酒精发酵的菌种是酵母菌，醋酸发酵的菌种是醋酸菌。从图2曲线可看出，当初始糖浓度为20%时，酒精度及果酒感官评分均最高，效果最佳。糖类是主要的能源物质，在果汁中加入糖可为酵母菌的生长繁殖提供能源物质，另外，糖是发酵的原料，加入的糖可作为酒精发酵的原料，所以在初始糖度低于20%时果酒酒精度随初始糖度的增加而增加。果酒发酵后期若被醋酸菌污染，仍不会经发酵产生醋酸，因为酒精发酵是无氧环境，而醋酸菌是需氧型生物，醋酸发酵需要氧气，且酒精发酵与醋酸发酵的温度不同，果酒制作过程中温度比果醋制作的温度低。21．土壤中的有些细菌可以利用石油中的多环芳烃，据此研究人员通过实验从土壤中分离得到了能降解石油的细菌菌株M和N，实验所用的培养基成分如下表所示：成分培养基1K2HPO4、MgSO4、NH4NO3、石油培养基ⅡK2HPO4、MgSO4、石油(1)实验时，培养基通常采用的方法进行灭菌。培养基中提供碳源的是。(2)用稀释涂布平板法对菌株M计数时，每毫升菌液中细菌细胞数为2×107个，每个平板上涂布0．1mL，且每个平板上长出的菌落数约200个，则至少应将菌株M的菌液稀释倍。(3)为进一步探究并比较M和N两个菌株在不同条件下降解石油的能力，科研人员继续进行了如下实验：步骤一：将M、N两个菌株分别接种在两液体培养基Ⅰ中，得到M、N菌液。步骤二：另取培养基Ⅰ、Ⅱ，添加琼脂分别制成平板Ⅰ、Ⅱ，在平板Ⅰ上制作两个直径相等的孔标号ⅠA、ⅠB，平板Ⅱ重复以上的操作，两个孔分别标号ⅡA、ⅡB。步骤三：将等量等浓度的M菌液和N菌液分别接种到平板Ⅰ的ⅠA和ⅠB，平板Ⅱ也进行同样的操作。步骤四：相同且适宜条件下培养一段时间，记录平板Ⅰ、Ⅱ的透明圈大小如下表所示：菌株平板Ⅰ平板ⅡⅠAIBⅡAⅡB透明圈大小+++++++—注：“+”表示有透明圈，“+”越多表示透明圈越大，“-”表示无透明圈。①本实验的自变量是。②平板上透明圈出现的原因是。③本实验可以得出的结论是。〖答案〗（1）高压蒸汽灭菌石油（2）10⁴（3）培养基的成分和菌株的类型细菌将平板中的石油分解在有氮源的培养基上，M菌株降解石油的能力高于N菌株；在无氮源的培养基上，N菌株无降解石油的能力，但M菌株降解石油的能力减弱〖祥解〗1、选择培养基是指在培养基中加入特殊营养物质或化学物质，允许特定微生物生长，阻止或抑制其他微生物生长的培养基。2、培养基的成分主要包括碳源、氮源、无机盐和水。【详析】（1）通常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。表中只有石油含有碳元素，所以提供碳源的是石油。（2）若要在每个平板上涂布0.1ml稀释液后的菌液，且每个平板上长出的菌落数不超过200个，则摇瓶M中的菌液稀释的倍数至少为2×107÷1000×100÷200=1×104倍。（3）①本实验中人为改变的量是培养基的成分和菌株的类型，所以培养基的成分和菌株的类型是本实验的自变量。②由于细菌将平板中的石油分解，则在平板上出现透明圈。③培养基Ⅰ和培养基Ⅱ的区别就是培养基Ⅰ有氮源，培养基Ⅱ没有氮源，所以根据本实验中透明圈的大小可以判断在有氮源的培养基上，M菌株降解石油的能力高于N菌株；在无氮源的培养基上，N菌株无降解石油的能力，但M菌株降解石油的能力减弱。22．中医治疗疾病多用复方，三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”，在我国全年可采收两次。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图1。

(1)取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其（填填“消毒”或“灭菌”），每次处理后用（填“蒸馏水”或“无菌水”）冲洗叶片5次，去除残留于叶片上的药剂，处理后的叶片撕去表皮，切成1mm薄片备用。(2)过程①通过酶解法去除获取原生质体，并向三白草和鱼腥草细胞酶解液中分别加入红、绿荧光色素（带荧光色素的原生质体仍能融合和再生）。过程②利用化学诱导剂诱导融合，随后在荧光显微镜下选择带的杂种原生质体。(3)科研人员研究不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如图2。

注：双核异核融合体指具有两个不同来源细胞核的细胞由图2可知促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为，高于此密度不利于形成双核异核融合体的原因是。此外，影响原生质体融合的因素还应包括等。(4)通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。组别A组B组C组（空白对照组）实验处理三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量①在表格中将C组的实验处理补充完整。②若实验结果为，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。〖答案〗（1）消毒无菌水（2）细胞壁PEG/聚乙二醇红、绿荧光色素（3）1×106个/mL密度过高，原生质体的相互黏连、聚集作用过强，PEG的诱导作用受到抑制PEG的浓度（4）等量的蒸馏水A、B两组的胸腺重量相同且都大于C组〖祥解〗分析图可知，图1表示三白草和鱼腥草体细胞杂交过程，其中①为去除细胞壁，②为原生质体融合，③为脱分化形成愈伤组织，④为提取代谢产物。图2柱形图中，随着原生质体密度增大，双核异核融合体比例先升高后降低，其中在1×106个/mL1时，比例最高。【详析】（1）为防止微生物污染，应取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其消毒；为防止杂菌污染，每次处理后用无菌水冲洗叶片5次，去除残留于叶片上的药剂。（2）据图示可知，过程①通过酶解法去除细胞壁获取原生质体，需要用纤维素酶、果胶酶处理破坏细胞壁；过程②诱导植物细胞融合的方法有利用化学诱导剂PEG（（聚乙二醇））诱导融合；由于三百草细胞酶解液中加入了红荧光色素，鱼腥草细胞酶解液中加入了绿荧光色素，所以杂种原生质体应该带红、绿荧光色素。（3）由图2柱形图可知，在密度为1×106个/mL时，双核异核融合体比例最高，说明促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为1×106个/mL；高于此密度不利于形成双核异核融合体，因为密度过高，原生质体的相互黏连、聚集作用过强，PEG的诱导作用受到抑制；此外，影响原生质体融合的因素还应包括PEG的浓度、培养液的渗透压等。（4）①本实验目的是判断融合体对动物免疫力的影响，因为C组为对照组，因此根据对A、B两组的处理，C组应用等量的蒸馏水每天一次等量灌胃，连续一周。②若实验结果为A、B两组的胸腺重量相同且都大于C组，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。23．CD47是一种免疫抑制蛋白，肿瘤细胞通过过量表达CD47抑制巨噬细胞的吞噬作用以实现免疫逃逸。抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，其制备流程如下图甲所示。(1)制备过程中需要用CD47对小鼠进行多次处理，目的是。为保证细胞培养环境无菌、无毒，需要进行的相关操作是。(2)下图乙表示核苷酸合成的两条途径，物质A可以阻断全合成途径，转化酶和激酶是补救合成途径所必需的两种酶。正常细胞中含有转化酶和激酶，骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。已知图甲的筛选1利用的是加入了H、A、T三种物质的“HAT培养基”，其筛选得到是细胞，该细胞能在HAT培养基中存活并增殖的原因是；经筛选2获得的细胞的特点是。(3)为验证抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，研究人员设计如下实验，实验组：将抗CD47的单克隆抗体加入巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养系中，检测巨噬细胞的吞噬指数（与被吞噬肿瘤细胞的比例呈正相关）；对照组为，预期实验结果：。〖答案〗（1）获得较多的已免疫（对CD47产生免疫）的B淋巴细胞对培养液和所有培养用具进行灭菌处理；保证在无菌环境下进行操作；定期更换培养液（2）杂交瘤HAT培养基中的物质A阻断了全合成途径，杂交瘤细胞含有从B细胞获得的转化酶和激酶，可以通过补救合成途径来合成核苷酸，同时又具备骨髓瘤细胞能无限增殖的特性，因此能在HAT培养基中存活和增殖既能大量增殖又能产生抗CD47的抗体（3）不加单克隆抗体的巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养系对照组巨噬细胞的吞噬指数显著低于实验组〖祥解〗单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【详析】（1）用CD47（抗原）对小鼠进行多次处理，可以获得较多的已免疫（对CD47产生免疫）的B淋巴细胞；对培养液和所有培养用具进行灭菌处理；保证在无菌环境下进行操作；定期更换培养液，可以保证细胞培养环境无菌、无毒。（2）在HAT培养基上能生长的为杂交瘤细胞；HAT培养基中的物质A阻断了全合成途径，杂交瘤细胞含有从B细胞获得的转化酶和激酶，可以通过补救合成途径来合成核苷酸，同时又具备骨髓瘤细胞能无限增殖的特性，因此能在HAT培养基中存活和增殖；筛选2是为了得到既能大量增殖又能产生抗CD47的抗体的细胞。（3）为验证抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，实验组为将抗CD47的单克隆抗体加入巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养系中，对照组为不加单克隆抗体的巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养系；由于抗CD4