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人教版高中生物选修一专题3课题1《菊花的组织培养》课件人教版高中生物选修一专题3课题1《菊花的组织培养》课件人教版高中生物选修一专题3课题1《菊花的组织培养》课件通过必修课的学习,我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么,有没有不用种子来培育植物的方法呢?组织培养营养繁殖无性生殖扦插压条嫁接人教版高中生物选修一专题3课题1《菊花的组织培养》课件人教1

通过必修课的学习,我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么,有没有不用种子来培育植物的方法呢?组织培养营养繁殖无性生殖扦插压条芽接嫁接通过必修课的学习,我们已经了解到大多绿色开花植物都是2专题3植物的组织培养技术金塔县中学高二生物备课组李发军专题3植物的组织培养技术金塔县中学高二生物备课组李发3专题3植物的组织培养技术课题1菊花的组织培养金塔县中学高二生物备课组李发军专题3植物的组织培养技术课题1菊花的组织培养金塔县中学4学习目标能说出植物组织培养的基本原理、过程学会植物组织培养的基本技术熟悉菊花的组织培养的过程学习目标5

指植物的离体部分(包括任何器官、组织、细胞或原生质体),在人工控制的培养基及环境条件(温度及光照)下,得以生长和分化成完整植株的一种无菌培养技术。又称:植物离体培养(一)植物组织培养的概念和原理一、基础知识1、概念指植物的离体部分(包括任何器官、组织、细胞或原生6人教版高中生物选修一专题3课题1《菊花的组织培养》-课件7人教版高中生物选修一专题3课题1《菊花的组织培养》-课件8概念:细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。原因:是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质2、原理:植物细胞的全能性概念:2、原理:植物细胞的全能性91、什么叫细胞分化?其实质是什么?2、什么叫脱(去)分化?3、愈伤组织的细胞有什么特点?4、什么叫再分化?阅读32页解决下列问题:

(二)植物组织培养的基本过程1、什么叫细胞分化?其实质是什么?阅读32页解决下列问题:10脱分化:再分化:细胞分化:愈伤组织细胞特点:基因的选择性表达概念、实质让已经分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。细胞排列疏松、无规则、高度液泡化的无定形的薄壁细胞。脱分化的细胞,在一定的条件下,又重新分化成各种特异性的组织细胞的过程。脱分化:再分化:细胞分化:愈伤组织细胞特点:基因的选择性11(二)植物组织培养的基本过程外植体(二)植物组织培养的基本过程外植体12(三)影响植物组织培养的因素植物材料的选择直接关系到实验的成败离体的植物组织和细胞,对营养、环境等条件的要求相对特殊,需要配制适宜的培养基

MS培养基生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素适宜的PH、温度、光照等条件那么如何控制细胞的脱分化与再分化?(三)影响植物组织培养的因素植物材料的选择直接关系到实验的成131、植物材料的选择烟草和胡萝卜的组织培养较为容易枸杞愈伤组织的芽诱导比较难同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影响实验结果菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝(三)影响植物组织培养的因素1、植物材料的选择烟草和胡萝卜的组织培养较为容易枸杞愈伤组织14人教版高中生物选修一专题3课题1《菊花的组织培养》-课件152、不同的离体组织和细胞对营养、环境等条件的要求相对特殊,需配置不同的培养基MS培养基主要成分包括:A、大量元素:N、P、S、K、Ca、Mg等B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等C、有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等2、不同的离体组织和细胞对营养、环境等条件的要求相16讨论:你能说出各种营养物质的作用吗?答:微量元素和大量元素:蔗糖:甘氨酸、维生素等:提供植物细胞生活所必需的无机盐提供碳源,同时能够维持细胞的渗透压满足离体植物细胞特殊营养需求微生物培养基:MS培养基:同专题2中微生物培养基的配方相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同?以有机营养为主则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。

请回答:在MS培养基配制好之后,常常需要加入_____________植物激素讨论:你能说出各种营养物质的作用吗?答:微量元素和大量元素:17(1)常用的植物激素:生长素、细胞分裂素和赤霉素3、植物激素的影响使用顺序实验结果先使用生长素,后使用细胞分裂素先使用细胞分裂素后使用生长素同时使用

有利于细胞分裂,但细胞不分化细胞既分裂也分化分化频率高(2)生长素和细胞分裂素作用(1)常用的植物激素:生长素、细胞分裂素和赤霉素3、植物激素18生长素细胞分裂素:>有利于根的分化生长素细胞分裂素:<有利于芽的分化,抑制根的分化生长素细胞分裂素:≈促进愈伤组织生长(3)生长素和细胞分裂素同时使用,用量的比例对植物细胞发育方向的影响4、pH、温度、光照pH控制在5.8左右,温度控制在18-22。C,每日用日光灯照射12h生长素细胞分裂素:>有利于根的分化生长素细胞分裂素:<有利于19植物组织培养过程:离体组织或细胞植物体脱分化生长素≈细胞分裂素愈伤组织芽根生长素<细胞分裂素生长素>细胞分裂素再分化不需要光需要光

小结芽发育成叶,叶肉细胞中叶绿素的合成需要光照条件植物组织培养过程:离体组织或细胞植物体脱分化生长素≈细胞分裂20二、实验操作制备MS固体培养基外植体消毒

接种

培养栽培

移栽二、实验操作制备MS固体培养基外植体消毒接种培21(一)制备MS固体培养基MS培养基包括20多种营养成分,实验室一般使用4℃保存配制好的培养基母液来制备1、配制各种母液2、配制培养基分装到锥形瓶中,每瓶分装50ml或100ml①配制培养液②调PH③培养基的分装阅读思考:菊花茎段的组织培养,在培养基中是否需要添加植物激素?为什么?由于菊花的茎段的组织培养比较容易,因此不必添加植物激素3、灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌(一)制备MS固体培养基MS培养基包括20多种营养成221、选材:菊花茎段,取生长旺盛的嫩枝(二)外植体消毒2、消毒①流水冲洗

菊花茎段用流水冲洗后可加少许洗衣粉,用软刷轻轻刷洗,刷洗后在流水下冲洗20min左右②酒精处理

用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入体积分数为70%的酒精中摇动2-3次,持续6-7s,立即将外植体取出,在无菌水中清洗③消毒液处理

取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中1-2min,取出后在无菌水中至少清洗3次,漂净消毒液什么是外植体?1、选材:菊花茎段,取生长旺盛的嫩枝(二)外植体消毒2、消毒23(三)接种1、接种室消毒2、无菌操作要求3、材料的切取和接种4、接种注意事项①每接种一块外植体前,都要对镊子灭菌②外植体在培养基中要分布均匀,放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定③插入时应注意方向,不要倒插(三)接种1、接种室消毒2、无菌操作要求3、材料的切取和接种24人教版高中生物选修一专题3课题1《菊花的组织培养》-课件25思考:

你打算做几组重复?你打算设置对照实验吗?答:每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶,与接种操作后的锥形瓶一同培养,用以说明培养基制作合格,没有被杂菌污染。思考:答:每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置26(四)培养接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养,培养期间应定期消毒培养温度控制在18-22℃每日用日光灯光照12h(四)培养接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养,培养期间应定期27(五)移栽移栽生根的菊花试管苗之前,应先打开培养瓶的封口膜,让试管苗在培养间生长几日1、打开封口膜2、清洗转移用流水清洗根部的培养基,将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间3、移栽幼苗长壮后,移栽到土壤中珍珠岩蛭石含水量高、蓄水性强、透性好(五)移栽移栽生根的菊花试管苗之前,应先打开培养瓶的28(六)栽培

幼苗移栽后,每天观察并记录幼苗的生长情况,适时浇水、施肥,直至开花三、结果分析与评价(一)对接种操作中污染情况的分析(二)是否完成了对植物组织的脱分化和再分化(三)是否进行了统计、对照与记录(四)生根苗的移栽是否合格(六)栽培幼苗移栽后,每天观察并记录幼苗的生长情况,291、培养基的灭菌2、外植体的消毒3、接种的无菌操作

在整个操作过程中,是如何来实现无菌环境的?高压蒸汽灭菌流水(洗衣粉)酒精、氯化汞酒精、酒精灯——灼烧4、无菌箱中的培养;5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。1、培养基的灭菌在整个操作过程中,是如何来实现30正常苗污染苗正常苗污染苗311、外植体带菌2、培养基及接种器具灭菌不彻底3、接种操作时带入4、环境不清洁污染途径1、外植体带菌2、培养基及接种器具灭菌不彻底3、接种操作时带32四、课题延伸1、一般来说,容易进行无性繁殖的植物,也容易进行组织培养2、实例:芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季四、课题延伸1、一般来说,容易进行无性繁殖的植物,33本课题内容小结菊花组织培养基础知识实验操作植物体的组织培养影响组织培养的因素细胞分化细胞全能性组织培养过程营养激素环境条件MS固体培养基制备外植体消毒接种培养移栽栽培本课题内容小结菊花组织培养基础知识实验操作植物体的组织培养影34练习(课本P36)1.答:植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长,如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染,就会导致实验前功尽弃,因此要进行严格的无菌操作。2.答:外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好,容易诱导脱分化和再分化。练习(课本P36)35

草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染的病毒传播给后代,导致产量降低。品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本过程如下:外植体愈伤组织芽、根植株请回答:(1)微型繁殖培育无病毒草莓苗时,一般选取_________作为外植体,其依据是________________。(2)在过程①中,常用的MS培养基主要成分包括大量元素、微量元素和______,在配制好的培养基中,常常需要添加________,有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组织。接种后2~5d,若发现外植体边缘局部污染,原因可能是__________________。(3)在过程②中,愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根,但分化出了芽,其原因可能是_______________。茎尖、根尖茎尖、根尖不含病毒有机物植物激素外植体消毒不彻底

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