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文档简介

白喉棒状杆菌、病毒白喉棒状杆菌、病毒1一,白喉棒状杆菌Albert染色法(操作)

一人一组一,白喉棒状杆菌Albert染色法(操作)

一人一组2白喉棒状杆菌(Corynebacteriumdiphtheria)白喉棒状杆菌(Corynebacteriumdiphth3

PseudomembraneDiphtheria,atypicaltoxigenicinfectiousdiseasePseudomembraneDiphtheria,at4九年级部编版(山西)上册课件第二素养提升5异染颗粒

metachromaticgranules细胞内颗粒,主要成分为RNA及嗜碱性的多偏磷酸盐,对某些染料有特殊反应,产生与所用染料不同的颜色,因而得名异染颗粒。其染色有助于细菌鉴定。亚甲蓝染色Albert染色异染颗粒

metachromaticgranules细胞内6实验步骤(制备玻片标本)涂片:先取一接种环生理盐水放于载玻片的一端,左手持菌液试管,右手持接种环,用接种环从试管培养液中挑取少许白喉棒状杆菌培养物与盐水混匀,涂成直径约1厘米的涂片,涂片应薄而均匀。干燥:涂片最好放置室温中,待其自然干燥。固定:手执玻片的一端,标本面向上,在火焰外层较快地来回通过三次,约2~3秒,以玻片反面触及皮肤,以不觉过分地烫为度。(待放置冷却后,进行染色。)实验步骤(制备玻片标本)涂片:先取一接种环生理盐水放于载玻片7实验步骤(Albert染色法)甲液染5分钟→水洗再以乙液(碘液)染1分钟→水洗沥干→油镜检甲液:甲苯胺蓝0.15g,孔雀绿0.2g,冰醋酸1ml,95%乙醇2ml,蒸馏水100ml乙液:碘2g,碘化钾3g,蒸馏水300ml实验步骤(Albert染色法)甲液染5分钟→水洗8二,病毒血凝试验(操作)

2人一组二,病毒血凝试验(操作)

2人一组9HA-hemagglutinin(血凝素)HA-hemagglutinin(血凝素)10血凝素(hemagglutinin,HA)由某些病毒基因编码的糖蛋白刺突;与病毒吸附和进入宿主细胞有关;HA能与人或其它动物多种红细胞表面N-乙酰神经氨酸酶结合引起红细胞凝集。血凝素(hemagglutinin,HA)由某些病毒基因编码11病毒血凝试验原理根据HA能与人或其它动物多种红细胞表面N-乙酰神经氨酸酶结合引起红细胞凝集的原理,滴定病毒的导致血凝效价(稀释度)。病毒血凝试验原理根据HA能与人或其它动物多种红细胞表面N-乙12实验步骤将有机玻璃板孔从1~9进行编号,从第1孔起至第9孔,按下表加样。将病毒液按下表进行稀释。孔号123456789生理盐水(ml)病毒液(ml)0.9+0.10.5+0.50.5+0.50.5+0.50.5+0.50.5+0.50.5+0.50.5+0.50.50.5弃掉病毒稀释度1∶101∶201∶401∶801∶1601∶3201∶6401∶12801:2560实验步骤将有机玻璃板孔从1~9进行编号,从第1孔起至第9孔,13自第9孔开始反方向向前每孔加入0.5%鸡红血球0.5ml,摇匀后放置室温45分钟孔号123456789生理盐水(ml)病毒液(ml)0.9+0.10.5+0.50.5+0.50.5+0.50.5+0.50.5+0.50.5+0.50.5+0.50.50.5弃掉病毒稀释度1∶101∶201∶401∶801∶1601∶3201∶6401∶12801:2560鸡红血球细胞悬液(ml)各0.5ml自第9孔开始反方向向前每孔加入0.5%鸡红血球0.5ml,摇14血凝试验结果判定结果判定:薄层(凝集)圆点(不凝集)凝集特别显著:“++++”凝集现象次之:“+++”凝集清楚可见:“++”稍显凝集者:“+”血凝单位:呈“++”凝集时的最高稀释度。此时的稀释度即为1个血凝单位。血凝试验结果判定结果判定:薄层(凝集)15示教一,血凝抑制试验二、培养特性观察破伤风梭菌(Clostridiumtetani)产气荚膜梭菌(Clostridiumperfringens)结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis)病原性真菌(黑曲霉、白色念珠菌、新型隐球菌)示教一,血凝抑制试验16实验原理病毒引起的血凝现象能被相应的抗血凝素抗体所抑制,称血凝抑制。利用血凝素特异性抗体与病毒表面相应的HA相互作用,使病毒血凝现象抑制的试验称血凝抑制试验。实验原理病毒引起的血凝现象能被相应的抗血凝素抗体所抑制,称血17圆点(不凝集)薄层(凝集)圆点(不凝集)圆点薄层圆点18二、培养特性观察破伤风梭菌(Clostridiumtetani)产气荚膜梭菌(Clostridiumperfringens)结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis)病原性真菌(黑曲霉、白色念珠菌、新型隐球菌)二、培养特性观察19血平板庖肉培养基牛奶培养基破伤风梭菌37℃48h,薄膜状爬行生长物,边缘不齐,伴轻度β溶血肉汤混浊,肉渣部分被消化,呈灰白色产气荚膜梭菌菌落平整,光滑,边缘齐。有双层溶血环:内层完全溶血(θ毒素引起),外层不完全溶血(α毒素引起)分解肉渣中糖类而产生大量气体。分解乳糖产酸,指示剂变黄,培养基凝固,产生大量气体,呈蜂窝状,将液面凡士林上推,甚至冲走管口棉筛。“汹涌发酵”示教:破伤风梭菌及产气荚膜梭菌的培养特性的培养特性血平板庖肉培养基牛奶培养基破伤风梭菌37℃48h,薄膜状20Formdoublehemolysiscirclesonbloodagarplates.Theα-hemolysisiscausedbyα-toxinwhiletheβ-hemolysisbyθ-toxin.Formdoublehemolysiscircles21StormyfermentationClostridiumperfringensshows“stormyfermentation”inlitmus(石蕊)milk.AcidturnsthepHindicatorlitmusfrombluetopink.Theacidandenzymescoagulateproteinstocurd.Thegasgeneratedinthemilkbreaksthecoagulatedproteins.StormyfermentationClostridium22九年级部编版(山西)上册课件第二素养提升23示教:结核分枝杆菌的培养特性专性需氧,最适37℃,营养要求高,生长缓慢,18h分裂一代。罗氏(Lowenstein-Jensen)培养基含蛋黄、甘油、马铃薯、无机盐、孔雀绿,2~6周可见菌落生长菌落特点:菜花、颗粒或结节状菌落,乳白色或黄色,不透明。示教:结核分枝杆菌的培养特性专性需氧,最适37℃,营养要求24Thecoloniesareformedafter3-6weeksofincubationonLowenstein-Jensenmedium.Thecoloniesarebuffcoloredanddrybreadcrumb-like.Thecoloniesareformedafter25黄曲霉示教

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