红细胞血型血清学检测技术规范

关于红细胞血型血清学检测技术规范主要内容中国输血技术操作规程(血站部分)1997年版中国输血技术操作规程(血站部分)(征求意件稿)

AABBTechnicalManual14thed

AABBStandard21sted第2页,共23页，2024年2月25日，星期天对标本的一般要求

实验室所检测标本须有清晰的惟一性标识；标本须和血液、血液成分制品来自于同一献血者；所检测的标本可为抗凝的或不抗凝的标本,抗凝剂推荐使用乙二胺四乙酸(EDTA)；遵守试剂/仪器使用说明书中所限定的标本制备和保存步骤；当说明书内容不能涵盖相关要求时,可用经确认的标本制备和保存步骤；肉眼判定标本是否存在影响检测结果的因素,如溶血、脂血等。第3页,共23页，2024年2月25日，星期天仪器设备的要求

仪器设备在安装后，需校准方可使用，校准周期至少一年一次，仪器设备需有维护程序。所有的校准、维护须有记录。仪器设备所使用的软件和实验室的信息系统须经过确认。第4页,共23页，2024年2月25日，星期天记录的要求

所有检测标本具有可追溯性。核对当前ABO/RhD定型结果与既往的血型记录是否一致，结果不一致必须查找原因。第5页,共23页，2024年2月25日，星期天

ABO血型鉴定

Rh血型鉴定

红细胞血型抗体鉴定

交叉配血试验

HDN血型血清学检查检测项目

第6页,共23页，2024年2月25日，星期天原理:根据红细胞上和血清(或血浆)中有或无A抗原或/

和B抗原及其抗体,将血型分为A、B、AB及O型。

ABO血型鉴定

第7页,共23页，2024年2月25日，星期天方法:红细胞凝集试验

正定型用已知抗-A或抗-B定型试剂来测定红细胞上有无相应的A抗原或/和B抗原

反定型

用已知A1型细胞和B型细胞来测定血清中有无相应的抗-A或/和抗-B

正反定型结果不一致或有疑问，需进一步行ABO血型确认试验。ABO血型鉴定

第8页,共23页，2024年2月25日，星期天ABO亚型鉴定A1和A2亚型鉴定原理:抗-A血清中含有抗-A和抗-A1两种抗体，抗-A可以凝集A型和AB型红细胞，而抗-A1只能与部分A型和AB型红细胞反应，据此凡与抗-A1强反应者被定为A1或A1B型，不与抗-A1反应，而与抗-A强反应者被定为A2或A2B型。第9页,共23页，2024年2月25日，星期天鉴定其他弱A或弱B亚型红细胞与抗-A、抗-A1、抗-B及抗-AB的凝集程度红细胞上的H物质活性的强弱血清中是否存在抗-A1和不规则抗-B分泌型人唾液中A、B、H物质方法:凝集反应、吸收放散、血凝抑制试验(唾液试验)新生儿红细胞ABO血型抗原较弱，不宜作亚型鉴定。ABO亚型鉴定第10页,共23页，2024年2月25日，星期天Rh血型鉴定原理:

Rh血型系统最常见的抗原主要有C,c,D,E,e5种。可分别用抗C、抗c、抗D、抗E、抗e这5种Rh定型试剂通过血凝试验来检查红细胞上是否存在相应抗原。在临床输血中，一般只做D抗原的鉴定。凡被检红细胞和抗D试剂凝集者为

RhD阳性，不凝集者为RhD阴性。第11页,共23页，2024年2月25日，星期天方法:

根据所选试剂的恃性，Rh血型的鉴定方法可采用试管直接盐水凝集法，酶技术、抗人球蛋白技术、聚凝胺、微柱凝胶等。Rh血型鉴定第12页,共23页，2024年2月25日，星期天

RhD阴性确认试验

D变异型

弱D不完全D

D抗原位点数减少抗原结构产生变异

与常规使用的抗D定型试剂不凝集或弱凝集采用含IgG抗D抗体的采用抗不同D表位的抗D试剂进行抗球蛋白试验抗体测定不同D表位

当确定红细胞上无D蛋白表达时，才能最终判定被检标本为RhD阴性RhD血型鉴定第13页,共23页，2024年2月25日，星期天要求:

红细胞在直接凝集试验中被IgM抗-D凝集的和在RhD阴性确认试验中被任何一种抗-D凝集的都应标记为RhD阳性。在直接凝集试验和在RhD阴性确认试验中与任何一种抗-D都不凝集的血液需标记为RhD阴性。红细胞与IgM抗-D定型试剂在直接凝集试验中不/弱凝集的标本，需进一步进行RhD阴性确认试验。RhD血型鉴定第14页,共23页，2024年2月25日，星期天原理:

用已知抗原表型的试剂红细胞组，通过直接凝集试验和间接抗球蛋白试验，筛选标本中可能存在的血型同种免疫性抗体。避免含有临床意义的血型同种抗体随血液、血液成分制品一同输入。红细胞血型抗体鉴定第15页,共23页，2024年2月25日，星期天红细胞血型抗体鉴定方法:盐水悬浮细胞凝集试验

间接抗球蛋白试验及各种改良的IAT免疫荧光技术、放射免疫技术酶联免疫吸附试验(ELISA)固相红细胞粘附试验以及凝胶试验AABB:有输血史或/和妊娠史的献血者需要进行红细胞血型抗体鉴定(具临床意义的抗体)第16页,共23页，2024年2月25日，星期天试剂:用于筛选的试剂红细胞必须来自至少两名无关O型供者，要求一种细胞为R1R1，另一种为R2R2表型，且表达下列抗原:M,N,S,s,Mur,Dia,k,Fya,Fyb,Jka,Jkb,Lea。并尽可能多的包含Duffy,Kidd血型系统中主要抗原的纯合子以及低频率抗原。红细胞血型抗体鉴定第17页,共23页，2024年2月25日，星期天要求:必须对筛选检测出的抗体进行鉴定，评估其临床意义。不进行抗体鉴定的实验室需将抗体筛选阳性标本送至具有资质的参比实验室进行最后鉴定或确证。红细胞血型抗体鉴定第18页,共23页，2024年2月25日，星期天交叉配血试验原理:

交叉配血试验指检查受血者与供血者的抗原抗体成分是否相容，以及是否含有不规则抗体等,以保证输血安全。第19页,共23页，2024年2月25日，星期天方法:交叉配血分“主侧”交叉试验，即患者血清与献血者红细胞的相容性试验；“次侧”交叉试验即献血者血清与患者红细胞的相容性试验。

患者与献血者的配血血样，每次输血后，4℃保存3～7天。交叉配血试验第20页,共23页，2024年2月25日，星期天新生儿溶血病血型血清学检查原理:

新生儿溶血病(HDN)是由母婴血型不合引起,胎儿和新生儿红细胞被来自母体的IgG抗体致敏,并在其自身网状内皮系统受到免疫性破坏。第21页,共23页，2024年2月25日，星期天方法:

婴儿及其父母ABO/RH血型鉴定