实验：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质说课讲解

实验1：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质必修一实验:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一.实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如：①.还原性糖的鉴定：还原性糖+②.脂肪的鉴定：

脂肪+脂肪+

③.蛋白质的鉴定：蛋白质+④淀粉+斐林试剂砖红色沉淀苏丹Ⅲ染液橘黄色苏丹Ⅳ染液红色双缩脲试剂紫色碘蓝色2可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀，说明植物组织样液中含有还原糖。注入2mL苹果组织样液注入1mL刚配制好的斐林试剂水浴加热约2min呈色反应变成砖红色50----650C的温水结论：甲乙液等量混匀现配现用振荡、混合摇匀呈现蓝色4①还原糖有

。

②试剂：

.（甲液：0.1g/ml

的

,乙液：0.05g/ml的

.）甲乙液必须

后再加入样液中，

。

③必须

。葡萄糖，果糖，麦芽糖用水浴加热斐林试剂NaOHCuSO4等量混合均匀现配现用注意事项：④颜色变化：浅蓝色棕色砖红色5思考：

1.为什么加入斐林试剂甲液和斐林试剂乙液时必须混合后再加入？因为若先加入NaOH溶液，还原性糖中的还原性半缩醛羟基易被氧化而失去还原性，再加入CuSO4溶液后不能产生Cu2O砖红色沉淀，只有将其先配成Cu(OH)2悬浊液，才可产生砖红色沉淀。62.斐林试剂甲液和乙液既然混合后使用，为什么不能在实验前配制好，一定要使用时临时配制？

由一分析可知，鉴定试剂实质上是Cu(OH)2悬浊液，很不稳定，容易生成蓝色Cu(OH)2沉淀，所以应将甲液、乙液分别配制储存，使用时再临时配制7二、脂肪的检测方法一：制作临时切片（1）选材：经浸泡去种皮的花生种子。（2）检测过程：制片选取最薄的切片置于洁净的载玻片中央制成临时装片：滴12滴蒸馏水，盖上盖玻片染色：在薄片上滴加23滴苏丹Ⅲ染液，染色23min洗去浮色：用吸水纸吸去染液，滴加体积分数为50%的酒精12滴镜观察：在低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒，然后用高倍镜观察。切片：花生种子（浸泡３－４h），去皮，将子叶削成薄片。视野中有橘黄色颗粒橘黄色小圆颗粒即为脂肪颗粒脂肪+苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液橘黄色（或红色）注意事项：

①切片要薄，如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰有的地方模糊。

②酒精的作用是：

。

③需使用显微镜观察

④使用不同的染色剂染色时间不同颜色变化：

。洗去浮色橘黄色或红色113、蛋白质的检测和观察：选材应该选择含

丰富的豆浆或鸡蛋清溶液（避免材料自身的颜色对实验变化颜色的掩盖）蛋白质黄豆浆滤液或蛋清稀释液制备组织样液呈色反应组织样液2mL双缩脲试剂A液1mL双缩脲试剂B液4滴摇匀后变成紫色结论：说明组织样液中存在蛋白质。12（3）注意事项：①试剂：

（

A液：0.1g/ml的

；B液：0.01g/ml的

）先加

，再加

。注意：先加入试剂A，造成碱性环境，而只有在碱性环境中，蛋白质才容易与Cu离子发生颜色反应，形成紫色的络合物。

B液要求量适中，否则多余的B液将会与A液发生反应生成大量蓝色Cu(OH)2沉淀而遮盖试验中所产生的紫色。同样为了防止生成较Cu(OH)2沉淀遮蔽实验结果，在配制溶液时，双缩脲试剂B比斐林试剂乙液浓度小得多，这也是斐林试剂和双缩脲试剂不能互换使用的道理。②鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比。

③用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免实验后粘住试管壁，不易洗刷双缩脲试剂A液1mlB液4滴NaOHCuSO4蛋白质的检测结果13斐林试剂与双缩脲试剂的比较：A液:0.1g/mLNaOHB液:0.01g/mLCuSO4甲液:0.1g/mLNaOH乙液:0.05g/mLCuSO4紫色物质生成砖红色沉淀先加A液，再加B液，不需加热甲液与乙液先混再用，且现配现用，需加热蛋白质还原性糖试剂组成检验结果试剂用法检测对象双缩脲试剂斐林试剂14斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成，但二者有如下三点不同：①溶液浓度不同。斐林试剂中NaOH的浓度为0.1g/mL，CuSO4的浓度为0.05g/mL；双缩脲试剂中NaOH的浓度为0.1g/mL，CuSO4的浓度为0.01g/mL。②使用原理不同。斐林试剂实质是新配制的Cu(OH)2溶液；双缩脲试剂实质是在碱性环境下的Cu2＋。③使用方法不同。使用斐林试剂时，先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合，然后立即使用。使用双缩脲试剂时，先加入NaOH溶液，然后再加入CuSO4溶液。淀粉的检测和观察：取材：马铃薯匀浆检测组织样液2mL碘液2滴结论：说明组织样液中存在淀粉。注意：常用材料：马铃薯试剂：

。颜色变化：

。碘液变蓝摇匀后变成蓝色17四种物质颜色反应的对比还原糖蛋白质淀粉脂肪18下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是

Ａ．用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲