抗生素效价的测定-微生物检定法讲解

抗生素效价的测定-微生物检定法吴爽讲师●生化药物和生物制品●生物药物的有效性是指单位剂量的生物药物应能产生的特定生物效应。●有效性评价需采用能够测定药品生物学活性的生物技术方法。●常用的有效性测定技术：

生物测定法、生物活性测定法和效价测定法●用于确证药品的真伪和效价。生物药物定义抗生素效价的测定-微生物检定法●《中国药典》2015年版四部

通则3400生物测定法●27种技术一、生物测定法抗生素效价的测定-微生物检定法（一）生物活性测定法二、生物活性/效价测定法●《中国药典》2015年版四部

通则1200生物活性测定法●17种技术

生化药物的效价/活力测定技术抗生素效价的测定-微生物检定法●抗生素微生物检定法二、生物活性/效价测定法●在适宜条件下，根据量反应平行线原理设计，通过检测抗生素对微生物的抑制作用，计算抗生素活性（效价）的方法。●以抗生素的抗菌活性为指标，测定原理与临床应用一致，直接反映抗生素的医疗价值，试验灵敏度较高，供试品用量较小，对产品纯度限度要求较宽。●《中国药典》方法：管碟法、浊度法抗生素效价的测定-微生物检定法（1）检定原理二、生物活性/效价测定法●量反应平行线原理：因标准品和供试品为同种抗生素，在相同试验条件下，标准品溶液和供试品溶液对试验菌所得的量反应曲线，在一定剂量范围内互相平行。●检定方法：一剂量法（标准曲线法）、二剂量法、三剂量法等。●抗生素微生物检定法抗生素效价的测定-微生物检定法（2）试验菌二、生物活性/效价测定法●管碟法

枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、

大肠杆菌、啤酒酵母、肺炎克雷伯菌、支气管炎博德特菌●浊度法

金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白念珠菌●抗生素微生物检定法抗生素效价的测定-微生物检定法（3）管碟法二、生物活性/效价测定法●利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用，比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小，以测定供试品效价的一种方法。●国际上抗生素药品检定的经典方法。●

《中国药典》法定方法：二剂量法和三剂量法。●抗生素微生物检定法抗生素效价的测定-微生物检定法（3）管碟法二、生物活性/效价测定法双碟底层、菌层牛津杯二剂量法三剂量法测量各个抑菌圈的直径（或面积）●抗生素微生物检定法抗生素效价的测定-微生物检定法（4）浊度法二、生物活性/效价测定法●利用抗生素在液体培养基中对试验菌生长的抑制作用，通过测定培养后细菌浊度值的大小，比较标准品与供试品对试验菌生长抑制的程度，以测定供试品效价的一种方法。●

《中国药典》法定方法：

标准曲线法、二剂量法或三剂量法。●抗生素微生物检定法微生物比浊法测定仪抗生素效价的测定-微生物检定法【实例】《中国药典》2015年版硫酸链霉素【含量测定】方法：精密称取本品适量，加灭菌水定量制成每1ml中约含1000单位的溶液，照抗生素微生物检定法（通则1201)测定。1000链霉素单位相当于1mg的C21H39N7O12。分析：按照“抗生素微生物检定试验设计表”规定，链霉素的试验菌为枯草芽孢杆菌，培养条件为Ⅰ号培养基、35～37℃、14～16小时，选择链霉素标准品（理论计算值798.3U/mg），抗生素浓度范围0.6～1.6U/ml。抗生素效价的测定-微生物检定法（二）生物活性/效价测定法二、生物活性/效价测定法●《中国药典》2015年版四部