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文档简介
小麦花粉致死基因Ki的遗传与分子标记小麦雄性不育材料对小麦杂种优势的利用具有重要意义和价值,国外研究表明,某些特定普通小麦品种间杂交F1代表现的花粉部分不育现象,受控于核基因组花粉致死基因Ki。为了高效选择具有花粉致死基因Ki的材料,利用现代分子生物学技术对Ki进行定位,筛选与此连锁的标记,克隆出花粉致死基因连锁标记片段,建立稳定的筛选体系,对于小麦Ki种质材料的转育和利用将具有重要的作用和意义。本研究取得的主要结果如下:1.通过对可育和不育材料的形态学特征观察,发现二者除了花粉活力外,没有表现出明显的差异。采用花粉活性鉴定发现,败育花粉基本占到总花粉数的1/2,败育花粉染色较浅,由此可知,与花粉完全可育植株相比,花粉败育植株的花粉近半数发育不良,且失去活力。2.根据普通小麦“中国春”与澳大利亚春小麦品种“Timstein”的F1植株的花粉育性检测结果,统计显示,F1植株中花粉不育植株比率占到1/2,在BC1F1群体中,不育和可育植株的比例为1/2,说明小麦花粉致死基因为单基因遗传模式。3.以“中国春”和澳大利亚春小麦品种“Timstein”与83份不同小麦品种杂交获得相应F1,用碘液为染料,对其杂交BC1F1进行花粉染色显微镜观察并对花粉致死基因携带种质进行鉴定筛选,根据结果从中筛选出携带相应等位显性Ki基因的品种有6个,携带相应等位隐性ki基因的品种有18个。4.以“中国春”和“Timstein”的BC1F1代作为定位群体,提取基因组DNA构建“可育池”和“不育池”:用位于小麦6B染色体上85对SSR引物,利用分离群体分组分析法(BSA)进行多态性筛选,其中在育性池间存在差异的有4对引物(Xgwm644、Xgwm311、Xgpw4138和Xgwm626)。将具有多态性的引物再通过BC1F1定位群体进行验证,从中筛选出与目的基因连锁且多态性稳定的2个SSR标记Xgwm626和Xgpw4138。5.运用Mapmaker3.0软件进行连锁分析,结果表明,Xgwm626和Xgpw4138标记位于目的基因两侧,与Ki基因的遗传距离分别为9
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