免疫学检测技术的基本原理-免疫学课件

免疫学检测技术的基本原理-免疫学课件CATALOGUE目录免疫学概述免疫学检测技术基础抗原抗体反应检测技术免疫标记检测技术细胞免疫检测技术免疫学检测技术在临床中的应用01免疫学概述研究生物体对抗原的免疫应答以及免疫系统结构和功能的科学。免疫学定义包括抗原、抗体、免疫细胞、免疫器官、免疫分子等。研究对象免疫学定义与研究对象免疫系统组成包括固有免疫和适应性免疫两大部分，其中固有免疫包括组织屏障、固有免疫细胞和固有免疫分子，适应性免疫包括T淋巴细胞和B淋巴细胞。免疫系统功能识别和清除外来抗原、维持机体内环境稳定、免疫防御、免疫自稳和免疫监视。免疫系统组成及功能根据抗原性质和进入机体的方式不同，可分为固有免疫应答和适应性免疫应答。固有免疫应答是非特异性的、快速的，而适应性免疫应答是特异性的、慢性的。免疫应答类型具有特异性、记忆性和耐受性。特异性是指免疫系统能够针对特定抗原产生应答；记忆性是指免疫系统在初次应答后能够长期保留对该抗原的记忆，当再次遇到相同抗原时能够快速而有效地产生应答；耐受性是指免疫系统在发育过程中对自身抗原不产生应答，从而避免自身免疫病的发生。免疫应答特点免疫应答类型与特点02免疫学检测技术基础

抗原抗体反应原理抗原与抗体的特异性结合抗原表面的抗原决定簇与抗体分子的抗原结合位点之间具有高度的特异性，能够实现精确的相互识别和结合。抗原抗体结合的亲和力抗原抗体结合的亲和力是指两者之间相互作用的强度，高亲和力有利于形成稳定的抗原抗体复合物。抗原抗体反应的可逆性在一定条件下，抗原抗体复合物可以解离，释放出游离的抗原和抗体，这种可逆性有利于免疫反应的调节和终止。免疫学检测方法分类及应用领域免疫沉淀法利用抗原抗体特异性结合形成沉淀物的原理，常用于检测可溶性抗原或抗体，如免疫比浊法、免疫电泳等。免疫凝集法通过抗原抗体结合形成凝集物的现象进行检测，常用于细菌、病毒等微生物的快速检测，如直接凝集试验、间接凝集试验等。免疫标记法利用抗原抗体反应的特异性和标记物的可检测性，对抗原或抗体进行定量或定位检测，如酶联免疫吸附试验（ELISA）、放射免疫测定（RIA）等。免疫荧光法利用荧光素标记抗体或抗原，通过荧光显微镜观察荧光信号，实现对抗原或抗体的定性、定位和半定量检测，如直接免疫荧光法、间接免疫荧光法等。病原微生物检测利用免疫学检测技术对病原微生物进行快速、灵敏的检测，如新冠病毒的抗原检测、艾滋病毒的抗体检测等。通过检测患者体内自身抗体的种类和含量，辅助诊断自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等。利用免疫学检测技术对肿瘤相关抗原或抗体进行检测，实现肿瘤的早期诊断、个性化治疗和预后评估，如癌胚抗原（CEA）、甲胎蛋白（AFP）等肿瘤标志物的检测。应用免疫学检测技术对食品、药品中的药物残留进行检测，确保食品和药品的安全和质量，如瘦肉精、抗生素等药物残留的检测。自身免疫性疾病诊断肿瘤标志物检测药物残留检测免疫学检测技术应用实例03抗原抗体反应检测技术将可溶性抗原与相应抗体直接混合，在电解质参与下形成肉眼可见的凝集现象。直接凝集试验将可溶性抗原或抗体先吸附于适当大小的颗粒性载体表面，再与相应抗体或抗原混合，在电解质参与下形成凝集现象。间接凝集试验用抗体致敏颗粒性载体，再与相应可溶性抗原混合，形成凝集现象。反向间接凝集试验凝集试验絮状沉淀试验将可溶性抗原与相应抗体在试管内混合，形成肉眼可见的絮状沉淀物。环状沉淀试验将可溶性抗原与相应抗体在琼脂扩散试验中彼此相遇，形成白色沉淀线。免疫比浊法在自动生化分析仪上利用透射比浊法或散射比浊法检测抗原抗体复合物形成的浊度，判断待测物质的含量。沉淀试验传统补体结合试验将已知抗原、待测抗体和补体按一定比例混合，观察是否出现溶血反应来判断待测抗体是否存在。改良补体结合试验采用酶标记抗补体抗体，当补体与抗原抗体复合物结合后，酶标记抗补体抗体可与复合物中的补体结合，加入底物后产生颜色反应，提高了试验的敏感性和特异性。补体结合试验04免疫标记检测技术基本原理将抗原或抗体吸附于固相载体表面，使抗原抗体反应在固相载体表面进行，通过洗涤去除未结合的成分，最后通过酶对底物的催化作用产生有色产物，从而进行定性或定量分析。类型根据试剂的来源和标本的情况，ELISA可分为双抗体夹心法、间接法、竞争法和捕获法等类型。应用广泛应用于各种蛋白质、激素、药物等物质的检测，具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点。酶联免疫吸附试验（ELISA）基本原理以放射性核素标记抗原或抗体进行的免疫测定。标记抗原与待测抗原竞争限量抗体，待反应平衡后，用免疫分离剂去除未结合的标记抗原，测定上清液中的放射性强度，根据标准曲线计算待测抗原的含量。优点灵敏度高，可测定微量物质；特异性强，能准确识别抗原抗体复合物；标记物稳定，易于保存和运输。缺点存在放射性污染问题；操作繁琐，需要专门的设备和实验室条件。放射免疫测定（RIA）利用化学发光物质作为底物，在酶催化下产生发光现象，通过测量发光强度对待测物进行定量分析。与ELISA相似，CLIA也采用固相载体和酶标记技术。基本原理灵敏度高，可检测极低浓度的待测物；线性范围宽，适用于不同浓度的样本分析；自动化程度高，可实现高通量检测。优点广泛应用于临床医学、生物科学、环境科学等领域中的痕量物质检测和分析。应用化学发光免疫分析（CLIA）05细胞免疫检测技术T淋巴细胞分类01根据T细胞表面标志物的不同，可分为CD4+T细胞和CD8+T细胞等亚群。T淋巴细胞功能02不同亚群的T淋巴细胞在免疫应答中发挥着不同的作用，如辅助性T细胞（Th）和细胞毒性T细胞（Tc）等。T淋巴细胞亚群检测方法03常用的方法包括流式细胞术、免疫荧光技术等，可检测外周血、淋巴组织等样本中的T淋巴细胞亚群比例和功能状态。T淋巴细胞亚群检测细胞因子检测细胞因子是由免疫细胞和非免疫细胞分泌的小分子蛋白质，具有广泛的生物学活性，如白细胞介素（IL）、干扰素（IFN）、肿瘤坏死因子（TNF）等。细胞因子作用细胞因子在免疫应答的调节、炎症反应、抗肿瘤等方面发挥着重要作用。细胞因子检测方法常用的方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、生物活性测定、细胞内染色等，可检测血清、细胞培养上清液等样本中的细胞因子水平。细胞因子种类123细胞凋亡是指细胞在特定生理或病理条件下，通过一系列信号转导途径和基因调控机制，主动结束生命的过程。细胞凋亡概念细胞凋亡在免疫系统的发育、稳态维持和免疫应答过程中发挥着重要作用，如淋巴细胞的克隆删除、免疫细胞的自稳等。细胞凋亡与免疫常用的方法包括流式细胞术、DNA片段化检测、TUNEL染色等，可检测细胞凋亡的比例和程度。细胞凋亡检测方法细胞凋亡检测06免疫学检测技术在临床中的应用通过检测病原体特异性抗原或抗体，确定感染的存在及类型，如HIV抗原抗体检测、乙肝病毒表面抗原检测等。抗原抗体检测通过对免疫细胞数量、比例、功能的检测，评估机体免疫状态，如T淋巴细胞亚群检测、NK细胞活性检测等。免疫细胞检测通过检测细菌对抗菌药物的敏感性，指导临床合理用药，减少耐药性的产生。细菌耐药性监测感染性疾病诊断与治疗监测自身抗体检测免疫复合物检测治疗药物监测自身免疫性疾病诊断与治疗监测通过检测针对自身组织器官的特异性自身抗体，辅助诊断自身免疫性疾病，如抗核抗体、抗双链DNA抗体等。通过检测血液中循环免疫复合物的存在，了解自身免疫性疾病的活动度和病情严重程度。通过对治疗药物浓度的监测，确保药物在有效治疗浓度范围内，提高治疗效果并减少副作用。肿瘤标志物检测通过检测肿瘤相关抗原、抗体或肿瘤细胞代谢产物等肿瘤标志物，辅助肿瘤的早期诊断、个性化治疗和预后评估，如CEA、AFP等肿