SN-T4524-2016出口粮谷中6钟麦角碱的测定液相色谱-质谱质谱法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4524—2016出口粮谷中6种麦角碱的测定液相色谱-质谱/质谱法LC-MS/MSmethod2016-06-28发布I本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国厦门出入境检验检疫局。1出口粮谷中6种麦角碱的测定液相色谱-质谱/质谱法2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法3方法提要试样用乙腈/碳酸铵混合溶液提取，提取液经多功能净化柱净化后，液相色谱-质谱/质谱仪检测和确证，外标法定量。鉴于该方法涉及的麦角碱在室温条件下，易消旋为差向异构体，建议尽量缩短前处4试剂和材料4.3碳酸铵溶液(3mmol/L):称取0.20g碳酸铵，用水溶解并定容至1L。4.4乙腈-碳酸铵混合溶液(84+16):量取160mL碳酸铵溶液(4.3),乙腈定容至1L。4.6麦角碱标准储备溶液(100mg/L):分别称取10.0mg的麦角碱标准物质(4.5),用乙腈溶解并转移4.7混合标准中间溶液(1mg/L):准确移取各麦角碱标准储备溶液(4.6)1mL于100mL容量瓶中，4.8混合标准工作溶液：根据需要，使用前吸取适量的混合标准中间溶液(4.7),用碳酸铵溶液(4.3)配制成浓度为2.0pg/kg、5.0pg/kg、10μg/kg、20μg/kg、50pg/kg的混合标准工作溶液。现用现配。1)非商业性声明：本标准方法采用在MycoSep@150麦角碱多功能净化柱完成样品净化和提取的，此处所列的固相净化柱型号仅是为了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同型号的固相净化柱。25仪器与设备5.4涡旋混合器。6试样制备与保存于清洁样品容器中，密封，并做好标记。将制备好的试样于0℃~4℃冷藏保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染。7测定步骤试样经粉碎后，称取4g(精确到0.01g)于50mL离心管中.加入20mL乙腈-碳酸铵混合溶液(4.4),振荡提取30min,离心10min(10000r/min柱管内洗脱液0.5mL于另一试管中，再加入0.5mL碳酸铵溶液(4.3),混合均匀，微孔滤膜(4.9)过滤液相色谱条件为：f)梯度洗脱条件见表1。3表1流动相及梯度洗脱条件时间/min01267.3.2质谱条件质谱条件为：a)电离方式：电喷雾电离(ESI)。b)扫描方式：正离子扫描。c)电喷雾电压、离子源温度、雾化气、辅助气、气帘气和碰撞气均为高纯氮气，使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求，具体参数参见附录A。d)监测方式：多反应监测(MRM).具体参数参见附录A中表A.1。7.3.3定性测定按照上述仪器条件测定样品和标准工作溶液，如果检出的质量色谱峰保留时间与标准样品一致，并且在扣除背景后的样品谱图中，各定性离子的相对丰度与浓度接近的同样条件下得到的标准溶液谱图相比，最大允许相对偏差不超过±30%则可判断样品中存在对应的被测物。标准溶液的液相色谱-质谱/质谱多反应监测(MRM)色谱图参见附录B中图B.1。7.3.4定量测定以混合标准工作液中麦角碱的浓度为横坐标.以峰面积比为纵坐标，绘制标准曲线，按照外标法进行定量计算，由标准曲线得到相应目标化合物的浓度。样液平行测定次数不少于两次。待测样液中麦角碱的响应值应在标准曲线范围内，超过线性范围则应重新分析：7.4空白试验除不称取试样外，均按上述步骤进行：7.5结果计算和表述按式(1)计算试样中麦角碱的含量： (1)式中：X,——试样中麦角碱含量，单位为微克每千克(μg/kg);c,——根据标准曲线上计算得出的试样溶液中麦角碱的浓度，单位微克每升(μg/L);c。——根据标准曲线上计算得出的空白溶液中麦角碱的浓度，单位微克每升(μg/L);V,——试样溶液体积，单位为毫升(mL);m——试样溶液所代表的试样质量，单位为克(g)。计算结果保留3位有效数字。4本方法在20μg/kg～400pg/kg添加浓度下，回收率为72.5%～103.3%。5(资料性附录)质谱参考条件如下：a)毛细管电压：5500V;i)监测方式：多反应监测(MRM),各参数见表A.1。表A.1麦角碱MRM质谱参中文名称英文名称CAS号母离子m/z子离子m/z去簇电压V碰撞电压V麦角新碱麦角