维生素C的测定方法

维生素C的测定方法一、本文概述维生素C，也被称为抗坏血酸，是一种对人体至关重要的水溶性维生素。它在人体中发挥着多种作用，包括增强免疫系统、促进铁的吸收、参与胶原蛋白的合成等。由于其对人体健康的重要性，准确测定食物和生物样本中的维生素C含量显得尤为重要。本文旨在全面介绍维生素C的测定方法，包括常见的化学分析法、色谱法、电化学法以及近年来新兴的测定技术。我们将详细讨论这些方法的原理、操作步骤、优缺点以及适用范围，以便读者能够根据实际需求选择合适的测定方法。通过本文的阅读，读者将能够深入了解维生素C测定的基本原理和实际操作，为食品营养、药物研发、生物医学研究等领域提供有力支持。二、维生素C的基本性质维生素C，也被称为抗坏血酸，是一种重要的水溶性维生素，对人体健康起着至关重要的作用。维生素C具有许多独特的化学和生物性质，这些性质不仅影响了其在生物体内的功能，也影响了其测定方法的选择。维生素C是一种具有还原性的化合物，能够参与许多氧化还原反应。这一特性使得维生素C在生物体内发挥着重要的抗氧化作用，可以保护细胞免受氧化应激的损害。然而，这种还原性也使得维生素C在测定过程中容易受到氧化而失去活性，因此在测定维生素C时需要选择适当的抗氧化剂以防止其氧化。维生素C具有酸性，是一种较弱的有机酸。这一性质使得维生素C可以在水溶液中电离出氢离子，从而影响溶液的酸碱度。在测定维生素C时，可以利用其酸性性质，通过酸碱滴定等方法来测定其含量。维生素C还具有旋光性，即可以旋转光线的偏振面。这一性质使得维生素C可以通过旋光法来测定其含量。旋光法是一种简便、快速且灵敏的测定方法，适用于对维生素C的快速筛选和初步定量分析。维生素C还具有与特定试剂发生颜色反应的性质。例如，维生素C可以与2,4-二硝基苯肼反应生成红色的脎，这一反应可以用于测定维生素C的含量。还有其他的颜色反应方法，如与铁离子反应生成蓝色的络合物等，也可以用于维生素C的测定。维生素C的基本性质包括其还原性、酸性、旋光性和与特定试剂发生颜色反应的性质。这些性质不仅影响了维生素C在生物体内的功能，也为其测定提供了多种可选的方法。在实际应用中，需要根据具体的测定要求和条件选择合适的方法。三、维生素C的测定方法概述维生素C，也被称为抗坏血酸，是一种对人体健康至关重要的水溶性维生素。它在人体内扮演着多种重要角色，包括参与胶原蛋白的合成、促进铁的吸收以及具有抗氧化作用等。因此，准确测定食物和生物样本中的维生素C含量对于营养学、食品科学、医学等多个领域的研究和实践都具有重要意义。目前，测定维生素C的方法主要有多种，这些方法根据其原理和应用场景的不同，各有其特点和适用范围。其中，光度法是一种常用的测定方法，它基于维生素C与某些化学试剂发生反应后产生的颜色变化，通过测量吸光度来推算维生素C的含量。这种方法操作简便，成本较低，适用于大规模样本的测定。高效液相色谱法（HPLC）则是一种更为精确的测定方法，它利用高效液相色谱仪对维生素C进行分离和检测。这种方法具有分离效果好、灵敏度高、重现性好等优点，特别适用于复杂基质中维生素C的测定。但是，HPLC法需要昂贵的仪器和专业的操作人员，因此成本较高。还有电化学法、荧光法、毛细管电泳法等测定维生素C的方法，这些方法各有其优缺点，可根据具体需求选择合适的方法进行测定。准确测定维生素C的含量对于了解其在食物和生物样本中的分布、评估其营养价值、研究其生理功能等方面都具有重要意义。在实际应用中，应根据具体需求选择合适的测定方法，并注意方法的准确性和可靠性。四、碘量法测定维生素C碘量法是一种常用的测定维生素C含量的方法，其原理是基于维生素C的还原性质，将碘还原为碘离子，通过测定碘的消耗量来间接计算维生素C的含量。这种方法操作简便，结果准确，因此在食品、药品、生物样品等领域得到广泛应用。样品处理：将待测样品进行适当的处理，如研磨、匀浆等，以保证维生素C能够充分溶解在提取液中。提取：将处理后的样品与提取液混合，使维生素C溶解在提取液中。常用的提取液有草酸溶液、磷酸盐缓冲液等。滴定：在提取液中加入已知浓度的碘标准溶液，维生素C将碘还原为碘离子。通过滴定至终点，记录碘标准溶液的消耗量。计算：根据碘标准溶液的消耗量和已知的维生素C与碘的摩尔比例，计算样品中维生素C的含量。需要注意的是，碘量法在测定维生素C时，可能受到一些干扰物质的影响，如亚硝酸盐、硫化物等。因此，在实际操作中，需要采取一些措施来排除干扰，如添加掩蔽剂、选择合适的提取液等。碘量法还需要注意操作条件的控制，如温度、pH值等。对于不同种类的样品，可能需要采用不同的处理方法和提取液，以保证测定结果的准确性和可靠性。碘量法是一种常用的测定维生素C含量的方法，具有操作简便、结果准确等优点。在实际应用中，需要注意操作条件和干扰物质的影响，并采取相应的措施来保证测定结果的准确性和可靠性。五、2,4-二硝基苯肼法测定维生素C2，4-二硝基苯肼法是一种常用的维生素C测定方法，具有操作简便、灵敏度高、选择性好的特点。该方法基于维生素C与2，4-二硝基苯肼在酸性条件下发生反应，生成一种橙红色的产物，其颜色深浅与维生素C的含量成正比。原理：在酸性环境中，维生素C的还原性使其与2，4-二硝基苯肼发生偶联反应，生成一种稳定的橙红色偶氮染料。该反应具有高度的特异性，因此可用于测定样品中维生素C的含量。（1）样品处理：根据样品类型进行适当的预处理，如液体样品可直接取样，固体样品需研磨并溶解于适当的溶剂中。（2）显色反应：将处理后的样品与2，4-二硝基苯肼溶液在酸性条件下混合，摇匀后静置一段时间，使反应充分进行。（3）比色测定：将反应后的溶液与标准比色液进行比色，根据比色结果计算样品中维生素C的含量。（1）由于维生素C易被氧化，因此在实验过程中应注意避免光照和高温，以保证测定结果的准确性。（2）在显色反应过程中，应严格控制反应时间和温度，以保证反应的完全进行。（3）比色时，应使用与样品溶液相同浓度的标准比色液，以消除误差。（1）优点：该方法操作简便、快速，且具有较高的灵敏度和选择性，适用于多种类型样品中维生素C的测定。（2）缺点：由于显色反应受多种因素影响，如pH值、反应时间等，因此在实际操作中需要注意控制这些因素，以保证测定结果的准确性。2，4-二硝基苯肼法是一种常用的维生素C测定方法，具有广泛的应用价值。在实际应用中，应根据样品类型和实验条件选择合适的方法进行测定，并注意控制实验过程中的各种因素，以保证测定结果的准确性和可靠性。六、高效液相色谱法测定维生素C高效液相色谱法（HPLC）是一种高效、精确的分离和分析技术，广泛应用于生物化学、药物分析、食品科学等领域。在维生素C的测定中，HPLC以其高分离效能、高灵敏度、高选择性等优点，成为了一种重要的测定方法。高效液相色谱法测定维生素C的原理基于样品中的维生素C在固定相和流动相之间的分配平衡。当样品溶液通过装有固定相的色谱柱时，维生素C与固定相发生相互作用，根据作用力的大小在固定相和流动相之间进行分配。由于不同物质与固定相的作用力不同，因此它们在色谱柱上的移动速度也会有所不同，从而实现了物质的分离。随后，通过检测器对分离后的维生素C进行检测，从而得到其含量。高效液相色谱仪、色谱柱（如C18柱）、紫外检测器、流动相（如甲醇-水混合液）、标准品维生素C、样品等。（1）样品处理：将待测样品进行适当的处理，如稀释、过滤等，以便后续测定。（2）色谱条件优化：根据维生素C的性质选择合适的色谱柱、流动相和检测波长等条件，以确保最佳的分离效果和检测灵敏度。（3）进样测定：将处理后的样品注入高效液相色谱仪，记录色谱图和峰信息。（2）在色谱条件优化过程中，应充分考虑维生素C的极性和稳定性等因素。（3）进样时应确保样品完全溶解在流动相中，避免产生气泡或沉淀物影响测定结果。高效液相色谱法是一种准确、可靠的维生素C测定方法，具有较高的分离效能和灵敏度。通过优化色谱条件和数据处理方法，可以实现对复杂样品中维生素C的快速、准确测定。该方法在生物化学、药物分析、食品科学等领域具有广泛的应用前景。七、其他测定方法简介除了上述常见的维生素C测定方法外，还有一些其他的方法也被用于维生素C的测定。这些方法或因其特定的应用场景，或因其独特的原理和技术，而在某些特定领域或特殊情况下被使用。高效液相色谱法（HPLC）：这是一种高灵敏度和高分辨率的分析方法，能够准确地测定维生素C。通过色谱柱将样品中的维生素C与其他成分分离，然后用紫外或可见光检测器进行检测。该方法适用于复杂样品中维生素C的定量分析。毛细管电泳法：这是一种基于电场作用下带电粒子在毛细管中迁移速度不同的原理进行分离和测定的方法。毛细管电泳法在维生素C的测定中具有较高的灵敏度和分辨率，特别适用于生物样品中维生素C的测定。荧光法：某些特定的荧光试剂能够与维生素C发生反应，生成具有荧光特性的产物。通过测量荧光强度，可以间接地测定维生素C的含量。荧光法具有较高的灵敏度和选择性，适用于痕量维生素C的测定。电化学方法：包括伏安法、电导法等，这些方法基于维生素C的电化学性质进行测定。电化学方法具有快速、灵敏、简便等优点，特别适用于现场快速测定或在线监测。以上这些方法各有其优缺点，应根据具体的实验条件和需求选择合适的方法进行维生素C的测定。随着科学技术的发展，新的测定方法和技术也将不断涌现，为维生素C的测定提供更多的选择。八、实验设计与注意事项维生素C的测定实验设计需要考虑到准确性、可行性和安全性。选择适当的测定方法，如碘量法、荧光法、高效液相色谱法等，根据实验条件和需求进行选择。确定样品处理步骤，确保能够提取出样品中的维生素C并去除干扰物质。设定合适的实验参数，如反应时间、温度、pH值等，以优化实验条件。样品处理过程中应避免维生素C的损失和氧化。因此，在取样、保存和处理过程中应尽量减少光照、氧气和金属离子的接触。实验过程中应注意操作规范，避免误差的产生。例如，准确称量样品、精确控制反应时间和温度、使用洁净的玻璃器皿等。对于不同来源和类型的样品，可能需要采用不同的处理方法。因此，在实验前应充分了解样品的性质，并选择合适的处理方法。在使用化学试剂时，应注意安全操作。例如，避免直接接触皮肤、眼睛等敏感部位，使用防护眼镜、手套等个人防护措施。实验结束后，应及时清理实验现场，将废弃物妥善处理，避免对环境造成污染。通过合理的实验设计和注意事项的遵守，可以确保维生素C测定结果的准确性和可靠性。也能保障实验过程的安全性和环保性。九、结论与展望维生素C，作为一种关键的微量营养素，在维持人体健康、增强免疫力以及预防多种疾病中起着至关重要的作用。本文详细介绍了维生素C的多种测定方法，包括滴定法、高效液相色谱法、紫外-可见分光光度法、电化学分析法以及荧光分析法等。这些方法各具特点，适用于不同样品类型和维生素C含量的测定。滴定法以其操作简便、成本较低的优点，在实验室和工业生产中得到广泛应用。然而，该方法易受干扰物质影响，准确性有待提高。高效液相色谱法具有高分辨率、高灵敏度以及高重复性的优点，是测定复杂样品中维生素C含量的首选方法。紫外-可见分光光度法虽然操作简便，但易受样品色泽和浊度的影响。电化学分析法具有较高的灵敏度和选择性，特别适用于痕量维生素C的测定。荧光分析法虽然应用较少，但其高灵敏度和高选择性的优势在特定条件下可发挥重要作用。随着科技的进步和分析方法的不断创新，维生素C的测定方法将不断完善和优化。未来，研究方向可关注以下几点：一是提高测定方法的准确性和灵敏度，以满足痕量维生素C测定的需求；二是开发适用于现场快速测定的新方法，以适应食品安全、临床诊断等领域的实际需求；三是加强多维分析方法的研究，以同时测定多种维生素和矿物质，提高分析的效率和准确性；四是推动自动化和智能化技术在维生素C测定中的应用，提高分析过程的便捷性和可靠性。维生素C的测定方法研究对于保障食品安全、促进人类健康具有重要意义。未来，我们应继续关注和探索新的测定方法和技术，以满足不断发展的分析需求。参考资料：维生素C，也被称为抗坏血酸，是一种重要的营养素，它在许多生物过程中起着关键的作用，包括维持免疫系统健康和促进胶原蛋白的生产。由于其在维持人体健康中的重要性，准确地测定果蔬中的维生素C含量就显得尤为重要。本文将介绍几种测定果蔬中维生素C含量的方法。滴定法是最常用的测定维生素C的方法之一。其基本原理是利用碘与维生素C之间的反应，通过滴定来确定维生素C的含量。具体步骤包括：称取一定量的样品，将其中的维生素C提取出来，然后加入碘液进行氧化反应，最后用标准氢氧化钾溶液进行滴定。通过这种方式，我们可以得到维生素C的含量。尽管滴定法相对简单和便宜，但它的精度和准确性相对较低。高效液相色谱法是一种分离和分析复杂混合物中特定成分的强大工具。这种方法可以用于测定果蔬中的维生素C含量。将样品中的维生素C提取出来，然后使用高效液相色谱仪进行分析。色谱柱会将不同的成分分离，并通过检测器检测各组分的含量。通过与标准品进行比较，可以确定维生素C的含量。尽管HPLC法具有较高的精度和准确性，但它需要昂贵的设备和专业的操作人员。分光光度法是一种利用物质吸收光谱特性进行定量分析的方法。在测定果蔬中维生素C的含量时，首先将维生素C从样品中提取出来，然后使用特定的显色剂进行反应，生成有色产物。通过测量有色产物的吸光度值，可以确定维生素C的含量。这种方法相对简单、快速且经济，但可能受到其他色素或物质的干扰，导致准确性下降。以上介绍了三种测定果蔬中维生素C含量的方法：滴定法、高效液相色谱法和分光光度法。这三种方法各有优缺点，适用范围也不尽相同。在实际应用中，应根据具体情况选择最合适的方法。无论是选择哪种方法，都需要遵循正确的操作步骤和注意事项，以确保测定的准确性和可靠性。我们也应该注重饮食的多样性，合理摄入各种富含维生素C的果蔬，以保持身体健康。维生素C，也被称为抗坏血酸，对人体健康有着重要的作用。它是一种强大的抗氧化剂，可以保护身体免受自由基的伤害，促进免疫系统的健康，并支持胶原蛋白的合成。在新鲜果蔬中，维生素C的含量是评价其营养价值的重要指标。因此，建立准确、可靠的维生素C测定方法具有重要意义。实验所用的新鲜果蔬包括柑橘类水果（如橙子、柚子）、浆果（如蓝莓、草莓）、蔬菜（如菠菜、番茄）等。所有样品均购自当地农贸市场或超市，并按照相同的标准进行预处理，以保证实验结果的准确性。实验采用2，4-二硝基苯肼比色法进行维生素C的测定。该方法基于维生素C在酸性条件下与2，4-二硝基苯肼反应生成橙红色化合物的原理。通过比色法测定反应后的颜色变化，可以推算出样品中维生素C的含量。具体操作步骤如下：（1）将新鲜果蔬样品进行预处理，称取一定量的样品，用榨汁机榨取果汁或蔬菜汁。（2）在50毫升比色管中加入1毫升2，4-二硝基苯肼溶液和5毫升样品提取液。通过对比实验，发现不同种类的果蔬中维生素C的含量存在较大差异。柑橘类水果如橙子、柚子的维生素C含量较高，其次是蓝莓、草莓等浆果类水果，而蔬菜中的维生素C含量相对较低。这些结果与实际生活经验相符，也进一步证明了该测定方法的准确性。本研究通过2，4-二硝基苯肼比色法对新鲜果蔬中的维生素C含量进行了测定。结果表明，不同种类的果蔬中维生素C含量存在差异。该方法具有操作简便、准确可靠等优点，可用于新鲜果蔬中维生素C含量的快速测定。对于指导消费者选择营养价值高的果蔬产品具有一定的参考价值。同时，对于果蔬加工行业和农业科学研究也有一定的指导意义。虽然本研究已经取得了一定的成果，但仍有一些方面需要进一步改进和完善。实验中发现部分果蔬样品的干扰物质会影响2，4-二硝基苯肼比色法的准确性，因此需要进一步优化样品预处理方法以减少干扰。考虑到不同种类的果蔬可能存在不同的维生素C含量和组成特点，未来可以进一步拓展实验范围，对更多种类的果蔬进行测定和分析。为了更好地指导消费者选择果蔬产品，可以结合其他营养成分指标进行综合评价，以提供更全面的营养价值信息。维生素C是人体必需的一种重要营养物质，对于维持人体健康具有重要作用。然而，对于维生素C的测定方法，目前存在多种不同的方法。本文将对两种常用的维生素C测定方法进行比较，以便更好地了解它们的优缺点和应用范围。荧光光度法是一种灵敏度较高的维生素C测定方法。该方法的原理是利用维生素C在特定波长下的荧光特性，通过测量荧光强度来计算维生素C的含量。该方法的优点如下：高灵敏度：荧光光度法具有较高的检测灵敏度，能够检测到较低浓度的维生素C，有助于更准确地反映人体维生素C的营养状况。特异性高：由于荧光光度法是利用维生素C的荧光特性进行检测，因此具有较高的特异性，不易受到其他物质的干扰。操作简便：荧光光度法操作简便，所需仪器设备也比较常见，因此适合于在实验室或现场进行测定。对样品处理要求较高：为了获得准确的测定结果，需要对样品进行适当的处理和纯化，这可能会增加测定时间和工作量。荧光光度法需要使用特定的仪器设备，且仪器价格较高，这可能会增加测定成本。高效液相色谱法是一种分离和分析复杂混合物的重要方法，可用于维生素C的测定。该方法的原理是利用不同物质在固定相和流动相之间的分配系数差异，通过洗脱和分离来达到分离和测定各种物质的目的。高效液相色谱法的优点如下：分离效果好：高效液相色谱法能够有效地分离和纯化复杂样品中的维生素C，消除其他物质的干扰，提高测定的准确性和可靠性。适用范围广：高效液相色谱法可以用于测定各种不同来源的样品，如食品、药品、生物样品等。可同时测定多种维生素：高效液相色谱法可以同时测定多种维生素，如维生素A、维生素E等，提高了测定的效率。对操作人员要求较高：高效液相色谱法的操作较为复杂，需要专业的操作人员才能获得准确的测定结果。样品处理要求较高：为了获得准确的测定结果，需要对样品进行适当的处理和纯化，这可能会增加测定时间和工作量。荧光光度法和高效液相色谱法是两种常用的维生素C测定方法。荧光光度法具有高灵敏度和特异性，操作简便等优点；而高效液相色谱法则具有分离效果好、适用范围广等优点。在实际应用中，应根据具体情况选择合适的测定方法。维生素C测定就是对维生素C的测定。在测定维生素C的国标方法中，荧光法为测定食物中维生素C含量的第一标准方法，4－二硝基苯肼法作为第二法。1．原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。本方法的最小检出限为022g/ml。2．适用范围GB12392-90本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定3．仪器3．1．实验室常用设备。3．2．荧光分光光度计或具有350nm及430nm波长的荧光计。3．3．打碎机。4．试剂本实验用水均为蒸馏水，试剂不加说明均为分析纯试剂。（1）偏磷酸－乙酸液：称取15g偏磷酸，加入40ml冰乙酸及250ml水，搅拌，放置过夜使之逐渐溶解，加水至500ml。4℃冰箱可保存7～10天。（2）15mol/L硫酸：取10ml硫酸，小心加入水中，再加水稀释至1200ml。（3）偏磷酸－乙酸－硫酸液：以15mol/L硫酸液为稀释液，其余同配制。（4）50%乙酸钠溶液：称取500g乙酸钠（CH3COONa·3H2O），加水至1000ml。（5）硼酸-乙酸钠溶液：称取3g硼酸，溶于100ml乙酸钠溶液（4）中。临用前配制。（6）邻苯二胺溶液：称取20mg邻苯二胺，于临用前用水稀释至100ml。（7）04%百里酚蓝指示剂溶液：称取1g百里酚蓝，加02mol/L氢氧化钠溶液，在玻璃研钵中研磨至溶解，氢氧化钠的用量约为75ml，磨溶后用水稀释至250ml。变色范围：pH=2红色pH=8黄色pH>0兰色（8）活性炭的活化：加200g炭粉于1L1+9盐酸中，加热回流1~2h，过滤，用水洗至滤液中无铁离子为止，置于110~120℃烘箱中干燥，备用。（9）标准抗坏血酸标准溶液（1mg/ml）：准确称取50mg抗坏血酸，用溶液（1）溶于50ml容量瓶中，并稀释至刻度。抗坏血酸标准使用液（100μg/ml）:取10ml抗坏血酸标准液，用偏磷酸-乙酸溶液稀释至100ml。定容前试pH值，如其pH>2时，则应用溶液（3）稀释。标准曲线的制备：取下述"标准"溶液（抗坏血酸含量10μg/ml）5和0ml标准系列，取双份分别置于10ml带盖试管中，再用水补充至0ml。操作步骤1样品制备全部实验过程应避光。称取100g鲜样，加100g偏磷酸-乙酸溶液，倒入打碎机内打成匀浆，用百里酚蓝指示剂调试匀浆酸碱度。如呈红色，即可用偏磷酸-乙酸溶液稀释，若呈黄色或兰色，则用偏磷酸-乙酸-硫酸溶液稀释，使其pH为2。匀浆的取量需根据样品中抗坏血酸的含量而定。当样品液含量在40~100μg/ml之间，一般取20g匀浆，用偏磷酸-乙酸溶液稀释至100ml，过滤，滤液备用。2氧化处理：分别取样品滤液及标准使用液各100ml于带盖三角瓶中，加2g活性炭，用力振摇1min，过滤，弃去最初数毫升滤液，分别收集其余全部滤液，即样品氧化液和标准氧化液，待测定。3各取5ml标准氧化液于2个50ml容量瓶中，分别标明"标准"及"标准空白"。4各取5ml样品氧化液于2个50ml容量瓶中，分别标明"样品"及"样品空白"。5于"标准空白"及"样品空白"溶液中各加5ml硼酸-乙酸钠溶液，混合摇动15min，用水稀释至50ml，在4℃冰箱中放置2h，取出备用。6于"样品"及"标准"溶液中各加入5ml50%乙酸钠溶液，用水稀释至50ml，备用。7荧光反应取"标准空白"溶液，"样品空白"溶液及（6）中"样品"溶液各2ml，分别置于10ml带盖试管中。在暗室中迅速向各管中加入5ml邻苯二胺，振摇混合，在室温下反应35min，用激发光波长338nm、发射光波长420nm测定荧光强度。标准系列荧光强度分别减去标准空白荧光强度为纵坐标，对应的抗坏血酸含量为横坐标，绘制标准曲线或进行相关计算，其直线回归方程供计算时使用。计算=（c×V/m）×F×(100/1000)式中：-----样品中抗坏血酸及脱氢抗坏血酸总含量，mg/100g；c------由标准曲线查得或由回归方程算得样品溶液浓度，μg/ml；m-----试样质量，g；F------样品溶液的稀释倍数；V------荧光反应所用试样体积，ml。例：测定每一制备溶液的荧光强度。用标准溶液每ml含5μg、0μg、5μg及0μg，各标准浓度管读数减去相应的标准空白读数的各平均值做标准曲线。由样品液读数减去样品液空白读数之值，从标准曲线上查得相应的抗坏血酸（μg/ml），按取样量及稀释率计算样品中抗坏血酸的含量。如：取制备好的辣椒样品138g，稀释到100ml，氧化后分别取10ml滤液稀释到50ml样品读数为34，样品空白读数为188，样品读数减去样品空白读数为152，查荧光标准曲线相当标准抗坏血酸的23μg。23×100×50×100------------------------=52（mg/100g）138×10×10001大多数植物组织内含有一种能破坏抗坏血酸的氧化酶，因此，抗坏血酸的测定应采用新鲜样品并尽快用偏磷酸-醋酸提取液将样品制成匀浆以保存维生素C。2某些果胶含量高的样品不易过滤，可采用抽滤的方法，也可先离心，再取上清液过滤。3活性炭可将抗坏血酸氧化为脱氢抗坏血酸，但它也有吸附抗坏血酸的作用，故活性炭用量应适当与准确，所以，应用天平称量。我们的实验结果证明，用2g活性炭能使测定样品中还原型抗坏血酸完全氧化为脱氢型，其吸附影响不明显。1．原理总抗坏血酸包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸。样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4-二硝基苯肼作用生成红色脎，脎的含量与总抗坏血酸含量成正比，进行比色测定。2．适用范围GB12392-90本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。4．试剂本实验用水均为蒸馏水，试剂纯度均为分析纯。5mol/L硫酸：谨慎地加250ml硫酸（比重84）于700ml水中，冷却后用水稀释至1000ml。285%硫酸：谨慎地加900ml硫酸（比重84）于100ml水中。32%2，4-二硝基苯肼溶液：溶解2g2，4-二硝基苯肼于100ml5mol/L硫酸内，过滤。不用时存于冰箱内，每次用前必须过滤。42%草酸溶液：溶解20g草酸于700ml水中，稀释至1000ml。51%草酸溶液：稀释500ml2%草酸溶