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ICS65.020.30CCSICS65.020.30CCSB44内蒙古自治区地方标准DB15/T3358—2024绵羊腹腔镜活体采卵技术规程Technicalcodeonlaparoscopicovumpick-upinsheep2024-02-232024-02-232024-03-23内蒙古自治区市场监督管理局发布DB15/T3358—2024前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会(SAM/TC19)归口。本文件起草单位:内蒙古赛诺种羊科技有限公司、内蒙古农业大学。IIDB15/T3358—2024DB15/T3358—2024DB15/T3358—2024DB15/T3358—2024绵羊腹腔镜活体采卵技术规程范围本文件规定了绵羊腹腔镜采卵中术语和定义、供体绵羊选择、抽卵液配制及采卵操作等内容。本文件适用于绵羊腹腔镜活体采卵。(NY/T1571羊胚胎移植技术规程下列术语和定义适用于本文件。活体采卵ovumpick-up活体采卵ovumpick-up借助腹腔镜及其他装置在绵羊活体状态下采集卵母细胞的一系列过程。供体donor提供卵母细胞的绵羊个体。4供体绵羊的选择及预处理供体绵羊的选择1.5~690d供体羊预处理供体埋置孕酮海绵栓13d,撤除海绵栓前3d间隔24h分别注射重组FSH3mL诱导卵泡发育,撤除海绵栓前1d进行采卵。5采卵操作1供体羊空腹,冬季控水控料36h、夏季控水24h控料36h、羔羊手术前12h空腹。手术室术前一天清扫手术室并用紫外线消毒60min;术前30min用酒精消毒工作台。两把长臂钳、三个套管、三个穿刺针、腹腔镜镜头和负压机。30min755min10minNY/T157112cm~5cm)10cm~15cm3cm~6cm将腹腔内窥镜放入第一孔,将长臂钳放入第三孔,观察穿刺套管是否进入腹腔内,如果腹部脂肪过厚,导致视野内未看见套管,可用长臂钳或穿刺针拨开脂肪使套管暴露在视野内。第二孔中也放入一支长臂钳用于辅助右侧的长臂钳将卵巢固定好。如卵巢固定好,第二孔长臂钳拔出,将采卵针放进套管,准备采卵。采卵采卵液配方见附录A。准备采卵前将采卵针和吸管用采卵液冲洗一遍,试管内采卵液不少于2mL。22mm0.2mL33附录A(资料性)采卵液配置DPBS+10%(v:v)FBS+1mg/mLBSA+6IU/mL肝素
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