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生物选修三专题一基因工程高三复习-第1页共5页专题一基因工程1.1DNA重组技术的基本工具一、基因工程的基本概念1.概念:基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过_____________和___________等技术,赋予生物以新的__________,从而创造出更符合人们需要的新的__________和___________。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做_________________。2.基本原理:______________3.理论基础(1)不同生物的基因可以拼接的结构基础——细胞生物的遗传物质都是_______,都是以_____________为基本单位构成的双链大分子。(2)目的基因转入后可以表达的基础——所有生物共用一套__________。(3)生物遗传信息的表达都遵循_________。4.优点(1)目的性强,能_______的改造生物的性状。(2)克服________________的障碍。二、限制性核酸内切酶——分子手术刀1.简称:__________。2.来源:主要是从__________中分离纯化而来。3.功能特点:特异性,即识别双链DNA分子某种特定__________,并且使每一条链中____________的两个核苷酸之间的_________断开。4.酶切结果:_______末端和_______末端。画出EcoRⅠ酶切后的结果:↓GAATTCCTTAAG↑三、DNA连接酶——“分子缝合针”1.作用实质:将双链DNA片段“缝合”起来,恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的________。2.作用前提:两个DNA分子必须含有_________。3.种类(1)E·coliDNA连接酶①来源:___________②功能:只能连接___________(2)T4DNA连接酶①来源:____________②功能:既可以连接___________,又可以连接_________,但连接_________时效率比较低。【拓展】比较DNA连接酶与DNA聚合酶DNA连接酶DNA聚合酶作用实质都是催化两个核苷酸之间形成_______是否需模板______________连接DNA链____链____链作用过程在两个DNA片段之间形成__________将_________加到已存在的核苷酸链上,形成____________作用结果将两个DNA片段连接成__________合成___________四、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”1.基因工程中最常用的载体——_______(1)来源:________等微生物(2)结构:裸露的、结构简单、独立于___________之外,并具有____________的___________分子。2.基因的载体必须具备的条件(1)有______________个限制酶切割位点,供外源DNA片段(基因)插入其中。(2)能在宿主细胞内_________,或整合到染色体DNA上,随染色体DNA进行________。(3)有特殊的___________,如四环素抗性基因等,供重组DNA的鉴定和选择。(4)必须是______的,不会对受体细胞有害。(5)_______适合,以便提取和在体外进行操作。3.载体的种类:除质粒外,还有____________、__________________等。4.在进行基因工程操作中,真正被用作载体的质粒,都是在天然质粒的基础上进行过_________的。1.2基因工程的基本操作程序第5页共5页一、基因工程的基本操作程序1._____________的获取。2._____________的构建。3.将目的基因_____________。4.目的基因的_____________。二、目的基因的获取1.目的基因主要是_________的结构基因。2.获取目的基因的方法(1)从基因文库中获取目的基因①基因文库概念:将含有某种生物不同基因的许多__________,导入_______的群体中储存,各个_______分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。②基因文库分类:可分为______文库和________文库(如cDNA文库)。(2)利用PCR技术扩增目的基因①PCR技术是_____________的缩写。PCR是一项在生物体外_____________的核酸合成技术。②PCR技术的原理:DNA的_________。③PCR扩增的前提:要有一段已知目的基因的_______,以便根据这一序列合成引物。④PCR扩增的条件:_____、_____(目的基因),原料——_______________(即dCTP、dATP、dGTP、dTTP),耐高温的__________酶(Taq酶)。⑤PCR扩增的过程a.变性:加热到90-95℃b.复性(退火):冷却到55-60℃c.延伸:加热到70-75℃⑥结果:目的基因以____的方式成指数形式扩增。(3)人工合成法:如果基因比较___,且________,可以通过___________用化学方法直接人工合成。【拓展】PCR技术和DNA复制的比较PCR技术DNA复制相同点原理__________________原料__________________条件_____、_____、_____不同点解旋_____解旋_______催化场所_____复制________酶热稳定的DNA聚合酶细胞内含有的DNA聚合酶结果在短时间内形成_________形成__________三、基因表达载体的构建基因

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