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文档简介
朽木易折,金石可镂。千里之行,始于足下。第页/共页1、病毒的复制周期主要包括吸附、穿入和脱壳、生物合成、组装和释放四个延续的步骤。(1)吸附第一阶段:病毒与细胞接触,举行静电结合(非特异性、可逆的)第二阶段(真正的吸附):病毒表面位点(蛋白结构)与宿主细胞膜上的相应受体结合。与异常受体的结合是病毒特异性的,是限制病毒感染的关键步骤。(2)穿入和脱壳病毒吸附在宿主细胞膜上后,可通过多种穿入方式进入细胞:①内吞小体脱壳:普通通过细胞膜吞入,称为病毒胞饮。形成内吞小体。如:流感病毒②穿入胞浆膜,发生膜融合:囊膜与宿主细胞膜融合,病毒的核衣壳直接进入细胞浆内,如副黏病毒③核膜脱壳:细胞吞饮,释放入胞浆;病毒基因组通过核孔复合物进入细胞核内。如腺病毒④有的病毒表面有位点与细胞受体结合后,由细胞表面的酶类协助病毒脱壳,使病毒核酸直接进入宿主细胞内,如噬菌体(3)生物合成病毒成分的合成,是在病毒基因指令下,利用细胞生物合成的场所和原材料举行合成的过程。包括:病毒核酸的复制和病毒蛋白质的合成(早期及晚期)mRNA的转录mRNA的翻译:译制出具有病毒信息的酶(包括RNA或DNA聚合酶)以及其他早期蛋白质。病毒核酸的复制mRNA的再度转录mRNA的再度翻译:晚期蛋白的合成,包括病毒衣壳蛋白以及病毒编码的其他结构蛋白(4)组装与释放核酸进一步被修饰;病毒蛋白亚单位以最佳物理方式形成衣壳。组装:病毒核酸进入衣壳形成残破的病毒粒子。释放:无囊膜病毒:如微RNA病毒,通过极迅速度的合成造成病毒粒子在胞浆中大量积聚,以致细胞胀破,释放出病毒。细胞的生物合成被阻断,发生变性及死亡。有囊膜病毒:释放过程就是病毒核衣壳获得囊膜的过程。随病毒的复制和组装地点不同,病毒可以从胞浆膜或核膜上以出芽方式获得囊膜。可在数小时或数天内通过出芽大量释放,对细胞膜无显然伤害。往往与持续性感染有关。2、病毒的生物合成过程分类按照病毒基因组转录mRNA的方式,可基本归为6大类1.双股DNA病毒(痘病毒、疱疹病毒等)在细胞核内合成DNA,在胞浆内合成病毒蛋白。DNA和蛋白质成分均在胞浆内合成。痘病毒等携带自身的RNA聚合酶;疱疹病毒依赖细胞内的RNA聚合酶过称:亲代病毒体吸附、穿入、脱壳→病毒DNA:(1)合成子代DNA→转录出晚期的mRNA,转译病毒的衣壳蛋白和结构蛋白→子代病毒利用宿主核内的RNA聚合酶→转录出早期的mRNA→在胞浆内核蛋白体上,转译成早期蛋白(DNA聚合酶、胸苷激酶等)单股DNA病毒3.单正股RNA病毒(微RNA病毒、黄病毒等)这类病毒的特点是不含RNA多聚酶,其本身就具有mRNA的功能。冠状病毒及动脉炎病毒独特的套式转录方式,合成全长负链RNA,套式转录产生亚基因组4.单负股RNA病毒(副黏病毒、正黏病毒等)单股RNA本身不起mRNA作用,但病毒含有依赖RNA的RNA多聚酶,病毒首先依赖多聚酶转录出互补的正股RNA。5.双股RNA病毒如呼肠孤病毒分10~12个独特的、非重叠的双股RNA节段。每个节段均可转录出mRNA,因此mRNA也是分节段的。6.逆转录病毒具有单链RNA,在复制过程中,以病毒RNA为模板,在反转录酶的作用下,反转录生成双链DNA中间体。双链DNA整合到细胞基因组DNA中。子代RNA由整合的病毒DNA转录而来。子代RNA展示mRNA的作用。病毒蛋白质合成的场所:核糖体病毒核酸复制的场所:高尔基体、内质网等病毒合成的蛋白质成分:引起细胞自噬、细胞凋亡等变化3、突变是病毒核酸复制过程中不可避免的错误。有两种结果:致命,不再具有存活和复制的能力—致死性突变;适应环境挑选(极少数)—非致死性突变突变的缘故:自发性:聚合酶的错误、碱基的互变异构体人工诱导(诱变)突变的类型基因组变异替换:单个核苷酸,点突变。缺失或插入:单个、小段或大段核苷酸。点突变发生的机率最大,小片段核苷酸缺失或插入次之,大片段核苷酸缺失发生的很少。突变的核苷酸有可能发生回复突变或抑制性突变。2.表型变异:表现为病毒颗粒的理化特性和复制性质的改变。1)空斑变异株2)抗体逃逸变异株:持续性感染3)条件致死性突变株宿主范围突变株温度突变株:温度敏感变异株-流感弱毒疫苗4、基因重组基因重组:两种不同的病毒或同一种病毒的两个不同毒株同时感染同一细胞时,在其核酸复制的过程中发生的核酸水平的互换。包括重组、重配或复活。重组将两个有亲缘关系但生物学性状不同的毒株感染同一个宿主细胞,从而可发生核酸水平上的互换,产生兼有两个亲本特性的子代,称为重组。重配:概念发生在基因组分节段的RNA病毒。病毒的两个毒株在同时感染某一个细胞时,通过交换RNA节段而举行的重组,或称重排。如蓝舌病毒。复活又称增殖性复活指用同一株病毒产生不同程度致死性突变的若干病毒颗粒同时感染某一细胞时,病毒重新具有传染性。5、病毒基因产物间的互相作用①补偿作用:是指在感染的细胞中,病毒蛋白质之间因为互相作用的结果,拯救了一种或两种病毒或增强了病毒的产量。同一种病毒的不同毒株、两种相关或不相关的病毒之间;将加热灭活的强毒痘病毒和另一型无毒的活痘病毒同时接种动物会发生强毒痘病毒感染发病;依赖DNA的RNA聚合酶②表型混合:是两种病毒混合感染细胞后,子代病毒获得二者表型特性。6、病毒与细胞的互相作用病毒对细胞的作用可分为三个类型:①杀细胞性感染:痘病毒、微RNA病毒非杀细胞性感染:持续性感染(生产性、非生产性)整合性感染:可致肿瘤,如腺病毒、Rous肉瘤病毒②生产性:病毒感染细胞后可产生和释放子代病毒。非生产性:顿挫感染③允许性细胞:可让病毒在其中完成其复制过程。非允许性细胞:可阻断病毒复制的某个环节。7、细胞内病毒增殖的鉴定1.细胞变化:①细胞病变:由病毒增殖引起的细胞形态学改变。常见的细胞变化为细胞圆缩、坏死、崩解或脱落。②包容体:细胞在感染病毒后,浮上于胞浆和胞核内的特征性形态变化。可通过固定、染色,在显微镜下检测到。病毒种类不同,产生包容体的形态、大小、多少及染色嗜性不同。(病毒鉴定的根据)如狂犬病毒、痘病毒、副黏病毒等。③合胞体:是病毒感染细胞后导致感染细胞及相邻细胞细胞膜融合的产物,表现为若干细胞的相邻细胞膜出现,成为多核巨细胞。④细胞凋亡:病毒感染造成的细胞程序性死亡。与细胞死亡形态不同:凋亡细胞染色质浓缩、边缘化;细胞DNA被降解形成梯带,是宿主细胞重要的防御机制。血吸附作用是一种异常形式的血凝作用,是将红细胞吸附于病毒感染的宿主细胞表面,用于病毒检测。如非洲猪瘟病毒3.细胞代谢的改变4.病毒的干扰现象两种不同种类的病毒同时接种于一个培养容器时,其中一种病毒的增殖对另一种病毒的增殖展示显然的抑制作用。用于不产生细胞病变或没有血凝和红细胞吸附特性的病毒的鉴定。如猪传染性胃肠炎病毒干扰牛病毒性腹泻-黏膜病病毒在猪肾细胞上CPE的产生。5.荧光抗体法(酶标记抗体法)病毒感染细胞一定时光后,在细胞上参加特异性的病毒抗体,再参加特异性的荧光标记的二抗,在荧光显微镜下看见。有特异性的黄绿色荧光浮上的为阳性,否则呈红色。6.中和实验特异性抗体能够抑制病毒感染或降低病毒在细胞上的滴度。8、病毒数量与感染力的测定①病毒蚀斑:又称空斑,是病毒在已长成单层的细胞上形成的局限性病灶。一个蚀斑是由一个以上感染性病毒体复制形成的,类似于细菌的菌落。不同的病毒引起的空斑形态和大小不同。蚀斑形成单位(plaqueformingunit,PFU):表示病毒悬液中的感染性病毒浓度,通常以每毫升病毒悬液中含有多少个PFU表示。蚀斑技术主要用于病毒的克隆与纯化。②ID50:半数感染量TCID50:半数细胞感染量EID50:半数鸡胚感染量测定病毒感染鸡胚、动物或细胞后,引起50%发生病变的病毒最小量。半数动物致死量(LD50:测定病毒感染动物后,引起半数动物死亡的病毒最小量。③病毒载量:指动物血液中的病毒数量。用定量PCR主意测定。可作病毒动态研究。④RNA干扰:细胞利用内源或外源性的小分子双股RNA片段,特异性的降解同源基因的mRNA,从而导致靶基因转录后的基因沉默。用于抗病毒感染研究。如流感病毒、乙肝病毒等⑤病毒干扰:缺陷型病毒突变株和干扰素干扰素:属于正常细胞调节蛋白即细胞因子。是细胞对强烈刺激时的一过性分泌物,不是细胞持续合成的。具有一定的宿主特异性,但无病毒特异性。9.病毒致病机理病毒对细胞的伤害细胞自身蛋白质和核酸代谢发生障碍,及病毒粒子的堆积,造成细胞死亡病毒物质的直接毒性作用。流感病毒上的H和N蛋白。细胞性继发作用。细胞自身的酶性活动(溶酶体)。核型紊乱。(疱疹病毒-秋水仙素,分裂终止)有些病毒可直接溶解动物红细胞。(副黏病毒-酶)细胞自身抗原成分发生变化。(自身免疫病)病毒感染对宿主组织器官的损伤①对宿主组织和器官的直接损伤对呼吸道上皮的损伤:伤害上皮细胞,破坏粘膜的保护作用;早期纤毛摆动有助于子代病毒蔓延消化道上皮的损伤:多数埋伏期短,没有任何前驱症状。引起动物腹泻的病毒主要为轮状病毒,其他还有冠状病毒、细小病毒、嵌杯病毒、某些腺病毒等②无组织器官损伤时所致的病理变化某些病毒感染引起的损伤不显然,感染细胞仍能低效地执行正常细胞功能,不表现临床症状,但丧失了系统自身平衡必须的特定功能。如:脑心肌炎病毒(微RNA病毒)持续感染胰岛细胞时,会导致胰岛素的终生减少和血糖浓度增高,发生糖尿病。③易致继发感染的组织和器官损伤除造成直接损伤外,还易使动物发生继发感染:流感、轮状病毒与冠状病毒等感染后易发生细菌继发感染,导致更严重的病状病毒感染对免疫系统的损伤①病毒感染免疫细胞导致免疫系统的损伤,宿主浮上获得性免疫缺陷和普遍的免疫抑制,从而加重疾病。如双重感染:使宿主易于再感染另一种病毒②分子模拟引起的自身免疫损伤:分子模拟是指宿主细胞成分与病毒蛋白质之间存在分子结构的线性或构象同源性。倘若病毒及宿主的抗原决定簇既相似又不相同,即二者的相似的程度足以引起交错反应,但差异程度又能突破正常的免疫耐受,这样的分子模拟就会导致自身免疫病。10、病毒感染的类型按照病程长短分为:急性、慢性和亚急性。急性感染:普通埋伏期短,发病急,恢复或死亡快。如口蹄疫、新城疫。按照症状和病理变化的主要感染发生部位分为:局部感染和全身感染按照感染症状的显然程度分为:显性感染和隐性感染隐性感染:不引起临床症状的病毒感染。(传染源)显性感染:有症状的感染持续性感染:病毒在体内持续存在,达数月或终生。无论发病或不发病,感染后会持续排毒。可能很迟才发生免疫病理病或肿瘤病。预后大多不良。宿主范围窄,有遗传倾向。11、持续性感染的类型埋伏感染:病毒基因组存在于一定的组织或细胞中,不产生有感染性的病毒体,在一定条件下可被激活而急性发作。急性发作期可以检测到病毒的存在。如奶牛传染性鼻气管炎、水痘-带状疱疹病毒。慢性感染:显性或急性感染后,病毒未彻低清除,可持续存在于血液和组织中,并不断排出体外,感染全过程可检出或分离到病毒。如小鼠的淋巴细胞性脉络丛脑膜炎。迟发性临床症状的急性感染:此类病毒的持续性复制与疾病的进程无关。例如猫全白细胞减少症病毒12、病毒的分离和鉴定㈠标本的采集和运送1.标本采集部位标本材料包括血液、组织器官如脑、肝、肌肉等;鼻液、乳汁、脓汁等分泌物或渗出物;咽喉拭子;粪便;无菌的体液或鸡胚液。按照临床症状、流行病学举行分析,初步判断可能是哪一种病,再决定采集何种标本。大多数情况采集动物脏器或淋巴组织;腹泻动物,采集粪便,检测细小病毒或轮状病毒;疑似口蹄疫,采集水疱皮或水疱液等。用拭子采集到的标本(如鼻、肛),应赶紧浸泡于生理盐水、PBS或细胞培养液中。有的病毒不稳定,如单纯疱疹病毒、流感病毒等,应尽早接种敏激动物或组织。2.标本采集时光在发病的早期,普通越早越好。晚期:①可能发生继发感染,增强判断艰难;②体内易产生抗体,病毒成熟释放减少,分离病毒比较艰难尸体标本最好在死后6小时内采集,否则病毒容易死亡。3.标本的运送大多数病毒对热不稳定,以赶紧接种为好。如需运送或保存,必须在冷环境。48小时内能送至实验室,普通在50%中性甘油中4℃保存;如需要保存较长时光,最好放在-20℃以下、干冰或液氮保存。分离材料尽量避免反复冻融。㈡标本的处理将组织标本中的病毒游离出来和除菌。1.研磨与稀释组织:充足研磨以释放病毒。稀释液常用pH7.2~7.6的细胞营养液、生理盐水、0.5%水解乳蛋白、Hanks液。中性甘油保存的标本作脑内注射,应以生理盐水洗2-3次再研磨,2000r/min离心20分钟,用上清液接种动物和细胞。倘若疑惑有细菌污染,应该作除菌处理。2.除菌处理采集标本时应尽可能无菌操作。但有些标本,如粪便、鼻拭子等,本身常带有大量的细菌必须除菌除菌主意:抗生素处理,4℃过夜。抗生素的浓度及作用时光视标本而定(104IU/mL青霉素,10mg/mL链霉素,等量)。10,000r/min,离心20分钟,大部分细菌和杂质可以去除。对乙醚有抵御力的病毒如肠病毒、鼻病毒、呼肠孤病毒、腺病毒、痘病毒等可以加等量乙醚,4℃过夜。(三)标本的接种途径标本接种于哪一种动物、鸡胚或细胞,以及挑选哪一种接种途径,主要决定于病毒的嗜性。普通嗜神经性病毒主要举行动物脑内接种嗜呼吸道病毒接种动物的鼻腔或鸡胚尿囊腔嗜皮肤性病毒接种动物皮内、皮下或鸡胚绒毛尿囊膜嗜内脏病毒可接种动物的腹腔、静脉、肌肉等注重:尽量选用级别较高的实验动物。鸡胚羊膜腔和尿囊腔:普通是测定其血凝素的产生,如流感病毒、新城疫病毒绒毛尿囊膜接种主要看见其痘斑卵黄囊接种主要看见鸡胚的死亡不同病毒复制需要的宿主细胞不同。从临床标本中分离病毒,要挑选适当的细胞系。原代细胞最敏感。培养主意很重要(静臵或旋转、传代)。(四)病毒增殖的判断1、细胞病变有的病毒初次分离时病变很不显然,初次从天然界分离病毒,经过盲传二代为阴性时,才干判断为阴性。偶尔第一代病毒引起的动物死亡和细胞病变不逻辑,常常惟独个别死亡。浮上病变应赶紧时机收获传代,才干分离到病毒。病毒分离时要细致看见CPE及细胞的生长状态。病毒感染引起异常的细胞病变:肠道病毒:细胞圆缩、小、凝聚、不聚拢、所有细胞受破坏腺病毒:细胞肿大、颗粒增多、病变细胞聚拢成葡萄状虫媒病毒:细胞圆缩、聚拢、脱离、不彻低破坏囫囵细胞,有的病毒能在细胞内繁殖而无显然的病变猴病毒40(SV40):胞浆中有空泡形成痘病毒、疱疹病毒、合胞体病毒:有多核巨细胞形成2、病毒间的干扰现象3、细胞代谢:腺病毒可造成pH值的显然降低(变酸),这是腺病毒所特有,在鉴定腺病毒上有一定参考价值。4、血细胞吸附5、免疫荧光实验若分离到的病原能稳定传代,并确证无细菌污染或经除菌过滤仍无碍其繁殖力与致病力,则认为已分离出病毒。结合病例的临床症状、流行病学特点、分离病毒的材料、感染动物范围、细胞病变特点及其形态学、生物学特性、理化特性等作出初步判断。(五)新分离病毒的理化性质测定1.病毒核酸型鉴定2.脂溶剂敏感性实验3.耐酸性实验4.胰蛋白酶敏感实验5.耐热性实验二、血清学检测或鉴定1、抗体水平监测:疫苗免疫后、病毒的天然感染状态等2、已知抗病毒血清检测未知的病毒抗原将分离到的病毒与已知病毒的标准血清作中和实验,补体结合实验或HI实验。将分离到的病毒与疾病急性期和恢复期血清举行补体结合实验,HI实验。如恢复期较急性期血清抗体有4倍升高,基本上可以说是本病的病原。3、已知病毒抗原检测动物或人血清中相应的抗体将分离到的病毒(或灭活)注射动物,制备高免血清与标准病毒作中和实验。4、交错保护实验:即用分离到的病毒和已知的标准病毒分离感染动物,同时留一组健康动物作对照,经一段时光(普通为2周)后,用标准病毒袭击,看见其保护效果。普通以上有1~2项显然的结果,即可以决定该病毒的种类以及某种病的病原。5、免疫荧光抗体技术、免疫酶技术(ELISA)、琼脂蔓延实验、中和实验、HI实验、免疫沉淀技术、免疫转印三、病毒颗粒检测1.电镜技术电子显微镜可直接看见病毒形态。条件:样本中必须含有一定数量。少于107/mL则不易检出。2.HA正黏病毒科、副黏病毒科、腺病毒科等3.病毒酶活性测定用于不能转化细胞,不能形成蚀斑的反转录病毒4.绿色荧光蛋白标记示踪技术,用于重组病毒和转基因生物四、病毒滴度测定蚀斑实验PFU、尽头稀释法(LD50等)、荧光-斑点实验、转化实验五、病毒核酸检测 基因组电泳分析、核酸杂交、PCR、酶切图谱分析、寡核苷酸指纹图、DNA芯片技术①探针杂交检测技术用一定序列的核苷酸合成探针,通过分子杂交检测组织样品中的病毒的互补碱基序列。可举行抗原定位。倘若探针具有一定长度,核苷酸序列挑选得适当则具有极强的特异性。200-300bp的探针特异性最好。过短特异性差,过长敏感性差。挑选保守的核酸序列。②PCR技术通过体外扩增可使待检样品中的目的基因片段呈级数扩增。检测灵巧度可达ng级水平,因此可以检出普通主意不易检出的病毒特异性DNA,甚至可用在环境中病毒污染物的检测。敏感性极高,常常浮上假阳性结果,偶尔也浮上假阴性。原位PCR、荧光定量PCR③序列分析技术在病毒诊断中,仅在特定的条件下对新毒株鉴定时使用。包括对基因序列和蛋白质多态序列的分析,最后决定新病毒的分类及归属。④DNA芯片技术新型的分子生物学技术将病毒的DNA片段有序的固定于支持物表面,与已标记的待测样品中的靶分子杂交,用特定的仪器分析杂交信号可检测样品中靶分子的数量高效、大批量处理六、病毒感染的迅速诊断1.形态学检查:光学显微镜、电子显微检查2.病毒抗原检查免疫荧光技术酶免疫技术3.病毒粒子直径大小的判断(电镜和过滤实验)13、病毒分类的基本根据①病毒的基因组:如核酸类型;基因组大小;单双股;线状或环状;正负链;分节段、节段大小数目;核酸序列等②病毒形状与大小:如直径、球形、砖形或多形态③病毒体的形态和结构:衣壳结构及其对称性、有无囊膜、病毒衣壳的壳粒数目或核衣壳直径④对乙醚和氯仿的敏感性⑤抗原性:如结构蛋白和非结构蛋白的数量,大小以及功能和活性,氨基酸序列等;⑥在细胞培养上的生长特性:包括对细胞种类的特异性、病毒在感染细胞内的复制过程及组装部位,成熟情况,细胞病变和包容体特点⑦对理化因素的敏感性:如分子量,沉降系数,浮密度,病毒粒子在不同pH、温度、Mg2+、Mn2+、变性剂、辐射中的稳定性⑧病毒生物学特性:包括病毒天然的宿主范围、病毒在天然状态下的传扬与媒介体的关系、流行病学特点及临床病理学特征细菌1、衣原体形态结构与发育周期特点在光学显微镜下可见到两种不同的颗粒衣原体:1.较小的称元体(EB)/原体:卵圆形,电子密度大,是有感染性的形态。有致密的类核结构,有胞壁,发育成熟。无繁殖能力,胞外稳定性强。2.较大的称为网状体(RB):呈圆形或不规矩形,电子密度较小,是无感染性形态,也称为始体。体大电子致密度较低,无胞壁。代谢活泼,以二分裂方式繁殖。胞外稳定性弱。包容体指在易感细胞内含增殖的网状体和子代元体的空泡。因为发育时期不同,包容体的形态和大小都有差别。成熟的包容体含有大量的元体。含有繁殖型始体和子代原体的膜包裹吞噬体或胞浆吞噬泡称为衣原体包容体。发育周期:支原体主要特征霉形体又称支原体,是一类无细胞壁的原核单细胞微生物;二分裂或芽生方式繁殖;具有多形性,能通过细菌滤器,是目前所知的能够在无生命人工培养基中生长繁殖的最小微生物。主要特征:⑴缺乏细胞壁;三层结构C膜,C外胞浆膜。革兰氏染色呈阴性。姬姆萨染色呈淡紫色。⑵在固体培养基上形成“煎荷包蛋”状菌落;⑶能通过200-450nm的细菌滤器;⑷基因组富含A、T;⑸在任何条件下不能回复为具有细胞壁的细菌.(与L型细菌有本质上的区别)发射菌的主要特点分枝丝状体,原核微生物革兰氏染色阳性;不运动,无芽孢;大部分腐生菌,少数寄生菌,也有致病菌;抗生素的主要产生菌;许多酶和维生素的产生菌;甾体转化、石油脱蜡、污水处理;某些与植物共生固氮。分支杆菌的四怕四不怕“四怕”(治疗):乙醇湿热紫外线抗痨药物(链霉素、异烟肼、利福平等)“四不怕”:干燥酸(3%HCl或6%H2SO4)或碱(4%NaOH)有抵御力碱性染料青霉素等抗生素气性坏疽产生过程和特点气性坏疽,主要由A型产气荚膜梭菌引起,经创伤感染,在感染部位发育繁殖,产生毒素而引起疾病。埋伏期短,发展疾驰,病情险恶,死亡率高,以组织坏死,气肿和全身中毒为特征过称:①组织坏死、血管内皮损伤,通透性升高→出血、水肿、局部坏死②分解糖产气,压迫软组织、血管→加重组织坏死③分解组织,病变疾驰蔓延,引起全身中毒症状炭疽杆菌的抵御力、抗原、致病性抵御力①本菌繁殖体的抵御力差,常用消毒剂均能将其杀死,对青霉素等多种抗生素高度敏感。②芽孢的抵御力异常强,干燥保存40年以上的炭疽芽孢仍有活力。炭疽芽孢对碘异常敏感,过氧乙酸、环氧乙烷、次氯酸钠等效果较好,可用于皮毛等消毒。抗原结构①荚膜多肽抗原:具有抗吞噬作用,与毒力有关。②菌体多糖抗原:有热耐受性。能与特异性抗体发生反应形成环状沉淀,称为Ascoli实验。此抗原的特异性不高,能与其它芽孢杆菌,甚至14型肺炎球菌多糖抗原发生交错反应。③炭疽毒素:由保护性抗原(PA)、致死因子(LF)和水肿因子(EF)三种蛋白质形成的复合物。注射实验动物可浮上炭疽典型中毒症状。具有抗吞噬作用。致病性本菌可引致各种家畜、野兽和人类的炭疽,牛、绵羊、鹿等易感性最强,马、驼、猪、山羊等次之,犬、猫、食肉兽等则有相当大的抵御力,禽类普通不感染。人类对炭疽杆菌的易感性介于食草动物与猪之间.致病物质:荚膜、炭疽毒素所致疾病:败血症,肠炭疽,肺炭疽,咽喉感染,皮肤炭疽。李氏杆菌的特点短杆G+不形成荚膜,无芽孢有鞭毛,需氧兼性厌氧菌。普通平板可生长光洁蓝绿色光泽菌落,血平板狭窄的β溶血环。半固体沿穿刺线呈云雾状生长。兼性胞内寄生菌,侵犯中枢神经系统,产生内化素、李氏杆菌溶血素。耐碱耐盐不耐酸。丹毒和李氏杆菌鉴别溶血:丹毒α李氏β明胶穿刺:丹毒:沿穿刺线(不运动)李氏:云雾状(运动)VP甲基红:李氏阳性,丹毒阴性;感染实验:李氏:豚鼠丹毒:鸽子4℃李氏长丹毒不长新生霉素:李氏敏感丹毒抵御大肠杆菌致病物质和特点(1)产肠毒素大肠杆菌(ETEC)引起人和动物腹泻,主要毒力因子有两类:黏附素(定居因子):ETEC特有菌毛,其上含有大量的能识别相应宿主小肠上皮细胞受体的亚单位蛋白质分子称黏附素,能黏附宿主小肠长皮细胞,虽不是直接的致病因子,却是首要的毒力因子(2)肠毒素:在体内或体外生长时产生的分泌到胞外的蛋白质性毒素对人或动物的肠有毒性作用。按照对热的耐受性分为:①不耐热肠毒素(LT)对热敏感可转化为类毒素,有A、B亚单位。LT-I先以其B亚单位与小肠上皮细胞上的神经节苷脂受体结实结合并形成通道,毒素的A亚单位经此通道进入细胞内,活化胞内腺苷酸环化酶,导致cAMP浓度急剧升高,使肠细胞分泌机能亢进,溢出,因而造成水和电解质大量积蓄于肠管。临床上水样腹泻和疾驰脱水死亡的症状。有免疫原性②耐热肠毒素(ST)耐热,100℃加热10~30min不失活。激活小肠上皮细胞鸟苷酸环化酶,导致胞内cGMP增多,引起肠内水盐代谢不平衡。分子量小,无免疫原性(2)产类致贺毒素大肠杆菌(SLTEC)引起猪水肿病。毒力因子:(1)粘附性菌毛F18有助于细菌在肠粘膜上皮细胞定居和繁殖。(2)致水肿病2型类致贺毒素:导致该病发生的主要毒力因子。布鲁氏菌对人的危害波浪热,1-6周的埋伏期,胞内菌,反复形成菌血症及内毒素血症,发热呈波浪型。淋巴结-菌血-发热-定位腺体、生殖器官链球菌的主要致病物质致病物质:脂磷壁酸(LTA):粘附素 M蛋白:抗吞噬作用一旦病菌大量繁殖则产生链球菌溶血素、致热外毒素等毒性物质,透明质酸酶、链激酶、DNA酶等侵袭性物质。细菌基因转移和重组的方式特点基因转移:外源性的遗传物质由供体菌转入某受体菌细胞的过程重组:转移的基因与受体菌DNA整合在一起称为重组,使受体菌获得供体菌的某些性状细菌的基因转移和重组可通过转化、转导、接合、溶源性转换和原生质体融合等方式举行。1、转化:供体菌游离的DNA片段被受体菌直接摄取,使受体菌获得新的性状,称为转化。主要发生于亲缘关系临近的细菌之间。要求细菌细胞必须处于感触态,此时细菌具有摄取外源性DNA的能力。发生受到多种因素制约。如转化DNA的浓度、纯度,温度,pH,离子浓度等转导:以温暖噬菌体为媒介,把供体菌的DNA小片段转移到受体菌中,通过交换与整合,使受体菌获得供体菌的部分遗传性状。按照转导基因片段的范围,可将转导分为两类:普遍性转导和局限性转导普遍性转导:供体菌的染色体的任何基因或任何片段都有可能被噬菌体转入受体菌的过程。普遍性转导的结果有两种:受体DNA与供体DNA整合,使受体菌成为遗传性状稳定的转导子即彻低转导
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