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文档简介
特异性启动子调控ACC氧化酶反义基因载体构建及对甜瓜‘玉金香’的转化
摘要:氨基乙烯(ACC)是植物中一个重要的激素,其氧化酶(ACCOX)参与调控植物的生长和发育。本研究旨在构建特异性启动子调控甜瓜(CucumismeloL.)中ACC氧化酶(ACCOX)反义基因载体,并通过基因转化的方式将其导入到甜瓜‘玉金香’中,探讨其对甜瓜生长和果实品质的影响。
1.引言
甜瓜作为一种重要的经济蔬菜,其生产量和质量一直受到人们的关注。然而,过度应用植物生长调节剂如氨基乙烯(ACC)会导致植物生长异常和果实品质下降。因此,调控ACC代谢的途径对于提高甜瓜的产量和品质具有重要意义。
2.实验材料与方法
2.1实验材料
本研究选取了甜瓜‘玉金香’作为研究材料,以其为外植体进行基因转化实验。
2.2构建特异性启动子调控ACCOX反义基因载体
本实验设计了一个特异性启动子调控ACCOX反义基因载体,目的是抑制ACC的代谢过程,从而降低ACC含量,提高甜瓜果实的品质。具体方法为...
2.3基因转化
利用农杆菌介导的遗传转化方法,将构建好的特异性启动子调控ACCOX反义基因载体导入甜瓜‘玉金香’中。通过筛选和验证,获得稳定表达ACCOX反义基因的转基因甜瓜植株。
3.结果与讨论
3.1构建特异性启动子调控ACCOX反义基因载体
通过PCR扩增、酶切、连接和转化等步骤,成功构建了具有特异性启动子调控ACCOX反义基因载体。
3.2基因转化
经过农杆菌介导的遗传转化,获得了30株抗生素筛选阳性的转基因植株,并通过PCR和Southernblot分析验证其是否稳定地表达ACCOX反义基因。
3.3影响甜瓜生长和果实品质
与野生型‘玉金香’相比,转基因甜瓜‘玉金香’在生长过程中呈现出更短的节间和更大的叶片面积。此外,果实的品质也得到了显著提高,包括果实重量、可溶性固形物含量和维生素C含量等。
4.结论
本研究成功构建了特异性启动子调控ACCOX反义基因载体,并将其导入到甜瓜‘玉金香’中。经过基因转化后,转基因甜瓜‘玉金香’表现出更短的节间、更大的叶片面积和提高的果实品质。这一研究为利用基因工程手段改良甜瓜品质提供了理论基础。
关键词:甜瓜‘玉金香’;氨基乙烯;ACC氧化酶;反义基因载体;基因转通过本研究成功构建了特异性启动子调控ACCOX反义基因载体,并将其导入到甜瓜‘玉金香’中。经过基因转化后,转基因甜瓜‘玉金香’表现出更短的节间、更大的叶片面积和提高的果实品质。这表明ACCOX反义基因的稳定表达对甜瓜
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