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文档简介
二次谐波成像操作说明开启硬件，包括计算机、显微镜、扫描装置、双光子激光器（图1、图2）、光电调节器EOM（图3）。图2图2图1图图3开启LASAF软件，Configuration选择machine_MP-Laser-on选项，点击OK进入软件界面（图4）。图图4进入Acquire面板，进行参数设置。scan1（二次谐波通道）参数设置如下（图5、图6）。图5AcquisitionMode：xyz；图5Format：1024x1024；Speed：400Hz；LineAverage：4；FrameAverage：1；Objective：63x1.40oil；Pinhole：600μm图图6点击MP，红色指示灯亮起（图7）。图图7点击MPlaser，进入MPLaserConfiguration，设置Laser为880nm，长按MP-Shutter，红色指示灯亮起，双光子激光即刻输出，待OutputPower上升到2390mw（图8）。MFP选择SP715（图9），发射波长为570-700nm（图10）。图8图8图10图10图9scan2（绿色荧光通道）参数设置如下（图11、图12）。AcquisitionMode：xyzFormat：1024x1024Speed：400HzLineAverage：4FrameAverage：1Objective：63x1.40oilPinhole：95.54μm图12图12图11在LeicaSettings中选择FITC通道（图13），Laser为488nm（图14），发射波长设为500
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