2023-2024学年柳州铁路第一中学高三第一次调研测试生物试卷含解析

2023-2024学年柳州铁路第一中学高三第一次调研测试生物试卷注意事项1．考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回．2．答题前，请务必将自己的姓名、准考证号用0．5毫米黑色墨水的签字笔填写在试卷及答题卡的规定位置．3．请认真核对监考员在答题卡上所粘贴的条形码上的姓名、准考证号与本人是否相符．4．作答选择题，必须用2B铅笔将答题卡上对应选项的方框涂满、涂黑；如需改动，请用橡皮擦干净后，再选涂其他答案．作答非选择题，必须用05毫米黑色墨水的签字笔在答题卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律无效．5．如需作图，须用2B铅笔绘、写清楚，线条、符号等须加黑、加粗．一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．在一个遥远的小岛上，某异花受粉的植物开有白色或者蓝色花，白花对蓝花表现为隐性。将上述纯合蓝花植株的种子用诱变剂处理，得到了3株隐性的、开白花的突变体（甲、乙、丙）。均只有一对基因与纯合蓝花植株不同。将突变体杂交并得到了以下结果：甲与丙杂交产生的F1随机交配，F2中只有开白花的个体；乙与丙杂交产生的F1随机交配，F2中蓝花：白花=9：7。下列分析错误的是（）A．甲和丙发生突变的基因是相同的 B．乙和丙发生突变的基因是不相同的C．甲和丙杂交产生的F1个体将全部开白花 D．乙和丙杂交产生的F1个体将全部开白花2．我国科学家发现，当有稻瘟病菌入侵水稻时，在光照条件下，水稻体内的LHCB5蛋白第24位的苏氨酸就会发生磷酸化，加速向叶绿体中积累，经过一系列的变化，会诱发活性氧的产生。在活性氧作用下，叶绿体内专门的抗稻瘟病基因表达后，水稻抗稻瘟病的能力会提高，下列有关叙述错误的是（）A．阴雨连绵、光照不足的天气更易暴发稻瘟病B．抗稻瘟病基因经转录、翻译形成LHCB5蛋白C．叶绿体内的蛋白质不都由叶绿体基因控制合成D．LHCB5蛋白的功能变化与它的结构变化有关3．下列有关实验的叙述错误的是（）A．将双缩脲试剂加入含有过氧化氢酶的溶液后，溶液呈紫色B．可用同位素32P标记的磷酸盐标记DNA，以追踪根尖细胞连续分裂的过程C．对培养液中酵母菌进行计数时，先将盖玻片放在计数室上，后将培养液滴于盖玻片边缘D．显微镜下观察到紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞在质壁分离过程中，原生质层的紫色不断加深4．下列有关细胞分化、衰老、癌变和凋亡的叙述，错误的是（）A．癌变和正常分化过程中细胞的DNA都发生了改变B．衰老是多细胞生物体的正常现象，衰老细胞的细胞核体积增大，核膜内折C．分化、衰老和癌变的细胞都发生了形态结构的改变D．正常情况下，机体可以使衰老、癌变的细胞凋亡从而维持内部环境的稳定5．植物生长调节剂广泛应用到农业生产上，并产生了一些人们原来没有预料到的影响，下列相关叙述，正确的是（）A．天然状态下的凤梨开花结果时期参差不齐，可利用乙烯利促进其果实的发育，做到有计划上市B．利用高浓度的2，4-D作除草剂，可抑制麦田中的双子叶杂草C．利用生长素类似物培育成的无子西瓜与多倍体育种培育成的无子西瓜都属于不可遗传的变异D．赤霉素能促进细胞分裂、种子萌发等，可利用赤霉素溶液处理大麦使之产生更多的α-淀粉酶6．下列关于细胞结构和功能的叙述，正确的是（）A．构成内质网的囊腔和细管连成一个整体B．粗面内质网上的核糖体合成的蛋白质均运输到高尔基体C．溶酶体是所有植物细胞消化细胞内碎渣的重要场所D．刚分裂形成的植物细胞有很多个分散的小液泡7．生物学家提出了“线粒体是起源于好氧细菌”的假说。该假说认为，在进化过程中原始真核细胞吞噬了某种好氧细菌形成共生关系，最终被吞噬的好氧细菌演化成线粒体。下列多个事实中无法支持该假说的是（）A．哺乳动物细胞的核DNA由雌雄双亲提供，而线粒体DNA则主要来自雌性亲本B．线粒体外膜的成分与真核细胞的细胞膜相似，而内膜则同现存细菌的细胞膜相似C．高等植物细胞的核DNA与蛋白质结合呈线状，而线粒体DNA裸露且主要呈环状D．真核细胞中有功能不同的多种细胞器，而线粒体中仅存在与细菌中类似的核糖体8．（10分）取正常水分条件下生长的某种植物的野生型和脱落酸（ABA）缺失突变幼苗，进行适度干早处理，测量一定时间内茎叶和根的生长量，结果如图所示。据图分析，下列叙述错误的是（）A．实验目的是探究该植物幼苗的抗早性是否与ABA有关B．在实验条件下，ABA促进野生型幼苗根的生长C．在实验条件下，ABA抑制突变型幼苗茎叶的生长D．实验结果表明野生型幼苗比突变型幼苗耐早二、非选择题9．（10分）2020年初，武汉出现了不明原因的肺炎，经检测是由一种新型冠状病毒（NCP）引起的。科研人员正在加紧研制生产NCP的疫苗和探索相应抗体的制备。回答有关的问题：（1）科研人员提出用康复者血清治疗新冠型肺炎，是因为康复者血清中存在_______（填“抗原”或“抗体”），但该方法存在缺陷，如_______________（答出一点即可）。（2）针对血清治疗存在的缺陷，研究者从治愈患者捐献的血液中提取浆细胞，然后用_______诱导该细胞和骨髓瘤细胞发生融合。几经努力，最终生产出单克隆抗体，此种方法生产的抗体具有______________________的优点。（3）科研人员还设想将控制无限增殖的基因（记作X基因）转入人的浆细胞，构建出产生单克隆抗体的细胞系。用PCR技术扩增X基因的前提是需要知道______。若在浆细胞中的染色体DNA上检测到X基因，但该浆细胞死亡或不能增殖，则原因最可能是_______________________。10．（14分）下图是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图，载体质粒P0具有四环素抗性基因（tetr）和氨苄青霉素抗性基因（ampr）。请回答下列问题：（1）EcoRⅤ酶切位点为，EcoRⅤ酶切出来的线性载体P1为_______末端。（2）用TaqDNA聚合酶进行PCR扩增获得目的基因片段，其两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸，载体P1用酶处理，在两端各添加了一个碱基为_______的脱氧核苷酸，形成P2，P2和目的基因片段在_______酶作用下，形成重组质粒P3。PCR技术中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是_____________________________________。

（3）PCR技术可以临床用于诊断感染性疾病、肿瘤及遗传病等，它是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，其标准步骤为_______、退火、__________。（4）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了___________________。若该目的基因是从cDNA文库中分离获取的蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体中，然后在_______为唯一含碳营养物质的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。11．（14分）国家863计划项目“利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用蛋白”取得重大进展。目前，已经成功获得经纯化的抗凝血酶Ⅲ蛋白，达到国际先进水平。下面是制作崂山奶山羊乳腺生物反应器的流程图，回答相关问题。（1）与崂山奶山羊相比，一般不选用小鼠作为乳腺生物反应器的主要原因是__________________。（2）PCR扩增抗凝血酶Ⅲ基因时，复性时冷却温度的设定是成功的关键，因为温度过高会破坏_____之间相应碱基的配对。过程③为________________，此过程需将该药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，目的是______________________________________________。（3）过程①需将重组质粒注入受精卵内，而不是动物体细胞内，其原因是_______________________。（4）在进行过程⑤之前，需取囊胚期的___________细胞做性别鉴定；随后对筛选的胚胎进行分割获得同卵双胎。胚胎分割时，要将囊胚的内细胞团均等分割的原因是______________________________。12．将玉米的PEPC酶基因导入水稻后，测量光照强度对转基因水稻和原种水稻的气孔导度及光合速率的影响结果，如下图所示。（注：气孔导度越大，气孔开放程度越高）（1）水稻叶肉细胞进行光合作用的场所是______________，捕获光能的色素在层析液中溶解度最大的是______________。（2）CO2通过气孔进入叶肉细胞后，首先与______________结合而被固定，固定产物的还原需要光反应提供______________。（3）光照强度低于8×102μmol·s-1时，影响转基因水稻光合速率的主要因素是______________；光照强度为10～14×102μmol·s-1时，原种水稻的气孔导度下降但光合速率基本不变，可能的原因是______________。（4）分析图中信息，PEPC酶所起的作用是____________________________；转基因水稻更适合栽种在____________________________环境中。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、D【解析】

由题干“乙与丙杂交产生的F1随机交配，F2中蓝花∶白花=9∶7”可知，蓝花和白花花色受两对等位基因控制（用Aa、Bb表示），并且只有在显性基因A和显性基因B同时存在时才开蓝花，否则为白花。由题干“3株隐性的、开白花的突变体（甲、乙、丙），均只有一对基因与纯合蓝花植株不同”以及突变体杂交结果可知，纯合蓝花基因型为AABB，则突变体基因型为AAbb或aaBB。【详解】A、根据分析及题干“甲与丙杂交产生的F1随机交配，F2中只有开白花的个体”可知，甲和丙发生突变的基因是相同的，A正确；B、根据分析及题干“乙与丙杂交产生的F1随机交配，F2中蓝花∶白花=9∶7”可知，杂交产生F1的基因型为AaBb，则乙和丙发生突变的基因是不相同的，B正确；C、甲和丙的基因型相同，杂交后代不可能同时存在A和B，F1个体将全部开白花，C正确；D、因乙与丙杂交产生的F1随机交配，F2中蓝花∶白花=9∶7=9∶（3+3+1），则F1的基因型为AaBb，F1个体将全部开蓝花，D错误。故选D。【点睛】答题关键在于掌握基因自由组合定律有关知识，运用9∶3∶3∶1的变式解决问题。2、B【解析】

根据题意可知，当有稻瘟病菌入侵水稻时，在有光条件下，水稻体内的LHCB5蛋白发生磷酸化，加速向叶绿体中积累，经过一系列的变化，会诱发活性氧的产生。在活性氧作用下，叶绿体内专门的抗稻瘟病基因表达后，水稻抗稻瘟病的能力会提高，说明水稻具有抗稻瘟病的能力。【详解】A、LHCB5蛋白第24位的苏氨酸发生磷酸化需要光照条件，阴雨连绵、光照不足的天气LHCB5蛋白发生磷酸化受阻，活性氧产生的少，抗稻瘟病基因表达量少，所以水稻更易暴发稻瘟病，A正确；B、LHCB5蛋白不属于抗稻瘟病基因的产物，抗稻瘟病基因经转录、翻译形成抗稻瘟病的蛋白，B错误；C、叶绿体是半自主复制的细胞器，叶绿体内的蛋白质不都由叶绿体基因控制合成，也有受细胞核基因控制形成的，C正确；D、蛋白质的结构决定功能，故LHCB5蛋白的功能变化与它的结构变化有关，D正确。故选B。3、D【解析】

1、血细胞计数板对培养液中酵母菌计数时。先将盖玻片放在计数室上，用无菌吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘使其自行渗入并用滤纸吸去多余菌液，再进行观察计数。2、把成熟的植物细胞放置在某些对细胞无毒害的物质溶液中，当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞液中的水分子就透过原生质层进入到外界溶液中，使原生质层和细胞壁都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的收缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁逐渐分离开来，也就是逐渐发生了质壁分离。当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，外界溶液中的水分子就通过原生质层进入到细胞液中，发生质壁分离的细胞的整个原生质层会慢慢地恢复成原来的状态，使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。【详解】A、过氧化氢酶是蛋白质，将双缩脲试剂加入过氧化氢酶溶液中，溶液呈紫色，A正确；B、DNA的元素组成是C、H、O、N、P，用同位素32P标记的磷酸盐标记DNA，以追踪根尖细胞连续分裂的过程，B正确；C、用血细胞计数板对培养液中酵母菌计数时，先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，C正确；D、原生质层是由细胞膜、液泡膜和两层膜之间的细胞质组成，而紫色存在液泡中，因此在质壁分离过程中，液泡的紫色不断加深，D错误。故选D。【点睛】熟知课本上相关实验的原理和操作要点以及相关的实验步骤是解答本题的关键，血球计数板的用法是易错点。4、A【解析】

1、细胞凋亡是由基因决定的细胞编程序死亡的过程。细胞凋亡是生物体正常发育的基础，能维持组织细胞数目的相对稳定，是机体的一种自我保护机制。在成熟的生物体内，细胞的自然更新、被病原体感染的细胞的清除均是通过细胞凋亡完成的。2、细胞分化的概念：在个体发育中，相同细胞的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。细胞分化过程遗传物质不变，只是基因选择性表达的结果。3、衰老细胞的特征：（1）细胞内水分减少，细胞萎缩，体积变小，但细胞核体积增大，染色质固缩，染色加深；（2）细胞膜通透性功能改变，物质运输功能降低；（3）细胞色素随着细胞衰老逐渐累积；（4）有些酶的活性降低；（5）呼吸速度减慢，新陈代谢减慢。【详解】A、正常分化过程中细胞的DNA未发生改变，癌变的细胞中遗传物质发生了变化，A错误；B、衰老是多细胞生物体的正常现象，衰老细胞的细胞核体积增大，核膜内折，B正确；C、分化、衰老和癌变的细胞都发生了形态结构的改变，C正确；D、正常情况下，机体可以使衰老、癌变的细胞凋亡从而维持内部环境的稳定，D正确。故选A。【点睛】本题考查细胞分化、细胞凋亡、细胞衰老、细胞癌变等知识，要求考生识记细胞分化的概念，掌握细胞分化的根本原因；识记细胞凋亡的概念及意义；识记衰老细胞的主要特征；识记癌细胞的主要特征，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查。5、B【解析】

植物激素包括生长素、赤霉素、细胞分裂素、乙烯、脱落酸等，生长素具有促进植物生长、促进插条生根和促进子房发育成果实等作用；赤霉素具有促进植物生长、抑制种子休眠、促进种子萌发的作用；细胞分裂素的作用是促进细胞分裂；乙烯的作用是促进果实成熟；脱落酸的作用是促进果实、叶片等器官的衰老和脱落。【详解】A、乙烯促进果实成熟而不是发育，A错误；B、利用高浓度的2，4-D作除草剂，可抑制麦田中的双子叶杂草，B正确；C、利用生长素类似物培育成的无子西瓜属于不可遗传变异，而多倍体育种培育成的无子西瓜的原理是染色体变异，属于可遗传变异，C错误；D、赤霉素能促进解除种子休眠，促进种子萌发，但是不能促进细胞分裂，D错误。故选B。6、A【解析】

各种细胞器的结构、功能：细胞器分布形态结构功

能线粒体动植物细胞双层膜结构

有氧呼吸的主要场所

细胞的“动力车间”叶绿体植物叶肉细胞双层膜结构植物细胞进行光合作用的场所；植物细胞的“养料制造车间”和“能量转换站”内质网动植物细胞单层膜形成的网状结构细胞内蛋白质的合成和加工，以及脂质合成的“车间”高尔

基体动植物细胞单层膜构成的囊状结构对来自内质网的蛋白质进行加工、分类和包装的“车间”及“发送站”（动物细胞高尔基体与分泌有关；植物则参与细胞壁形成）核糖体动植物细胞无膜结构，有的附着在内质网上，有的游离在细胞质中合成蛋白质的场所“生产蛋白质的机器”溶酶体动植物细胞单层膜形成的泡状结构“消化车间”，内含多种水解酶，能分解衰老、损伤的细胞器，吞噬并且杀死侵入细胞的病毒和细菌。液泡成熟植物细胞单层膜形成的泡状结构；内含细胞液（有机酸、糖类、无机盐、色素和蛋白质等）调节植物细胞内的环境，充盈的液泡使植物细胞保持坚挺中心体动物或某些低等植物细胞无膜结构；由两个互相垂直的中心粒及其周围物质组成与细胞的有丝分裂有关【详解】A、内质网是囊腔和细管连成的一个整体，A正确；B、粗面内质网上的核糖体合成的蛋白质会运输到高尔基体及细胞的其他部位，B错误；C、溶酶体是某些植物细胞消化细胞内碎渣的重要场所，C错误；D、刚分裂形成的植物细胞只有很少几个分散的小液泡，D错误。故选A。7、A【解析】

1、线粒体：真核细胞主要细胞器（动植物都有），机能旺盛的含量多。呈粒状、棒状，具有双膜结构，内膜向内突起形成“嵴”，内膜和基质中有与有氧呼吸有关的酶，是有氧呼吸第二、三阶段的场所，生命体95%的能量来自线粒体，又叫“动力工厂”。含少量的DNA、RNA。2、真核细胞和原核细胞的比较比较项目原核细胞真核细胞大小较小较大主要区别无以核膜为界限的细胞核，有拟核有以核膜为界限的细胞核细胞壁有，主要成分是糖类和蛋白质植物细胞有，主要成分是纤维素和果胶；动物细胞无；真菌细胞有，主要成分为多糖生物膜系统无生物膜系统有生物膜系统细胞质有核糖体，无其他细胞器有核糖体和其他细胞器DNA存在形式拟核中：大型环状、裸露；质粒中：小型环状、裸露细胞核中：和蛋白质形成染色体；细胞质中：在线粒体、叶绿体中裸露存在增殖方式二分裂无丝分裂、有丝分裂、减数分裂可遗传变异方式基因突变基因突变、基因重组、染色体变异【详解】A、哺乳动物细胞的核DNA由雌雄双亲提供，而线粒体DNA则主要来白雌性亲本，这与题干假说无关，A错误；B、线粒体外膜的成分与真核细胞的细胞膜相似，而内膜则同现存细菌的细胞膜相似，这支持题干假说，B正确；C、高等植物细胞的核DNA与蛋白质结合呈线状，而线粒体DNA裸露且主要呈环状，这与细菌拟核DNA相同，因此支持题干假说，C正确；D、真核细胞中有功能不同的多种细胞器，而线粒体中仅存在与细菌中类似的核糖体，这支持题干假说，D正确。故选A。【点睛】本题考查线粒体和原核细胞的相关知识，要求考生识记线粒体的结构，掌握线粒体与原核细胞的异同，最重要的是结合题干信息进行分析。8、C【解析】

根据题意和图示分析可知：在干旱缺水条件下，脱落酸抑制茎叶的生长，同时促进根的生长，说明脱落酸的这种作用，有利于植物适应缺水环境。该实验的自变量是干旱处理的时间、植物幼苗的种类，因变量是茎叶和根的生长量，因此该实验的目的是探究该植物幼苗的抗早性是否与ABA有关。由图可以看出，与突变体（不能合成ABA）相比，野生型（能合成ABA）植株茎叶长度增加值小，而根长度增加值大，说明ABA对野生型幼苗的作用是促进根的生长，抑制茎叶的生长，能更好地适应干旱环境。【详解】A、本实验的目的是探究ABA对适度干旱幼苗的生长量的影响，即ABA对该植物幼苗抗旱性的影响，A正确；BC、实验条件下，突变型幼苗（不含ABA）的茎叶生长量高于野生型幼苗（含ABA），说明ABA抑制野生型幼苗茎叶的生长，野生型幼苗（含ABA）的根生长量高于突变型幼苗（不含ABA），说明ABA促进野生型幼苗根的生长，B正确，C错误；D、实验结果说明，在干旱条件下，野生型幼苗的根更能生长（用于吸水），同时茎叶的生长减少了（减少水分蒸腾散失），能更好地适应干旱环境，D正确。故选C。二、非选择题9、抗体血清成分复杂，对于是否会引起其他问题还存在不确定性角度二：需要的血清数量比较大（血清抗体含量少）角度三：血清抗体纯度低，特异性差灭活的病毒（聚乙二醇、PEG、离心、电激、振动等均可）特异性强、灵敏度高、并可大量制备X基因的（一段）核苷酸序列X基因的插入破坏了浆细胞生命活动必需的某些基因角度二：X基因没有表达，所以不增殖【解析】

1、基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。2、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【详解】（1）康复者的血清中含有抗新型冠状病毒的抗体，因此有科研人员建议用康复者的血清来治疗患者，但存在血清成分复杂，对于是否会引起其他问题还存在不确定性或需要的血清数量比较大或血清抗体纯度低，特异性差等问题，该方法还存在一定的缺陷。（2）可以采用灭活的病毒或利用聚乙二醇等诱导将浆细胞和骨髓瘤细胞融合。单克隆抗体与普通血清抗体相比较，最主要的优点在于它的特异性强，灵敏度高，并可大量制备。（3）若用PCR技术扩增X基因，则需要用到热稳定DNA聚合酶，该方法能够成功获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物，以便于扩增X基因。若X基因的插入破坏了浆细胞生命活动必需的某些基因，或者X基因导入浆细胞后没有表达，都可能导致在浆细胞中的染色体DNA上检测到X基因，但该浆细胞死亡或不能增殖等现象。【点睛】本题考查基因工程、单克隆抗体的制备等知识，要求考生识记基因的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节；识记单克隆抗体的制备过程，能结合所学的知识准确答题。10、平胸腺嘧啶（T）DNA连接酶耐高温变性延伸鉴别和筛选含目的基因的细胞蔗糖【解析】

1、基因表达载体的基本结构包括复制原点、目的基因、标记基因、启动子、终止子等。其中标记基因的作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的受体细胞筛选出来，常用的标记基因是抗生素抗性基因。根据题干信息和图形分析，P0是载体质粒，其含有的氨苄青霉素抗性基因（ampr）和四环素抗性基因（tetr）都属于标记基因，可以用检测目的基因是否导入受体细胞；EcoRV酶为限制酶，其切割质粒后悔破坏了四环素抗性基因（tetr）。2、PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至94℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应做准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在Taq酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。【详解】（1）根据题意分析，EcoRV酶识别的序列是-GATATC-，并且两条链都在识别序列的碱基的中轴线T与A之间进行切割，因此其切出来的线性载体P1为平末端。（2）据图分析，目的基因两侧为粘性末端，且漏出的碱基为A，则在载体P1的两端需要个加一个胸腺嘧啶碱基T形成具有粘性末端的载体P2，再用DNA连接酶将P2与目的基因连接起来形成重组质粒P3。由于在PCR扩增技术中采用高温使其变形解旋，因此需要使用的DNA聚合酶具有耐高温的特点。（3）根据以上分析可知，PCR技术的标准步骤包括变性、退火、延伸。（4）根据以上分析可知，重组质粒中抗生素抗性基因属于标记基因，其作用是鉴别和筛选含目的基因的细胞。根据题意可知，该目的基因是从cDNA文库中分离获取的蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体中，在个体水平上鉴定目的基因是否表达，可以在以蔗糖为唯一碳源的培养基中培养大肠杆菌，如果大肠杆菌细胞内目的基因表达出了蔗糖转运蛋白，该大肠杆菌能够进行正常的生长和繁殖，则说明目的基因完成了表达过程。【点睛】本题考查基因工程的知识点，要求学生掌握限制酶的特点和切割后形成的末端类型，把握基因表达载体的构成过程和组成，识记标记基因的作用，掌握基因工程在中PCR扩增目的基因的过程和特点，理解目的基因的检测和鉴定方法，特别是能够根据题意把握在个体水平上的鉴定方法，这是该题考查的重点。11、小鼠产奶量少两种引物分别于两条模板链基因表达载体的构建使目的基因在乳腺细胞中特异性表达体细胞分化程度高，恢复全能性十分困难滋养层防止影响分割后胚胎的恢复和进一步发育【解析】

图示是利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用蛋白的流程图，其中①表示卵细胞的采集和培养，②表示精子的采集和获取，③表示基因表达载体的构建，④表示将目的基因导入受体细胞，⑤表示胚胎移植