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附件1:3-植酸酶与6-植酸酶的区别植酸酶是水解植酸极其盐类的酶,属于磷酸单脂水解酶。自然界有6位和3位二种植酸酶。6—植酸酶与主要存在于植物籽实的胚是从肌醇的6碳位上催化无机磷盐,最终脂解菌产生,首先从肌醇的3碳位上催化释放无菌(Aspergillusfieuum)和黑曲酶(A.niger)产生的植酸酶。3—植酸酶由于性植酸酶的分类:3-植酸酶(主要来源于真菌和大多数细菌微生物)6-植酸酶(主要来源于植物和大肠杆菌)3-植酸酶:从肌醇的第3个碳位上水解释放磷。6-植酸酶:从肌醇的第6个碳位上水解磷,类似于植物性植酸酶。3-植酸酶与6-植酸酶属于二种不同类型的植酸酶,二者的作用效果完全不目前中国植酸酶市场的主导产品是3—植酸酶如酶他富5000G,但也有与植物性植酸酶同源的6—植酸酶产品开始销售。6—植酸酶畜禽消化道正常的pH是5.5-6°在猪胃中,由于盐酸的作用使pH降在家禽,植酸酶主要在嗦囔起作用,它的pH是4.5-5°上图是二种植酸酶在不同pH环境下活性变化的曲线。3-植酸酶他富有2.5和5.5二个pH作用高峰,而6-植酸酶仅有pH5.5一个作用高峰。在pH低于3的酸性环境和高pH-6(相当于猪、鸡小肠)的环境中,3-植酸酶酶他富的活性明显高于6-植酸酶产品。这说位的T植酸酶和6位的条件下,T植酸酶和N植酸酶的相对酶活分别是77.82%和49.61%63.7%。稳定性。在高温、高温的严酷条年下和在预混料中的稳定性都显著高于6-植酸酶产品。二种产品在温度35℃,相对温度70%,打开包装储存4周后,3-植酸酶放4周,3-植酸酶酶他富活性存留77%,而6-植酸酶产品只有62%。3-植酸酶酶他富5000G和6—植酸酶产品的稳定性(35℃)3-植酸酶酶他富5000G和6—植酸酶产在严醋条件下的稳定性(温度40℃,相对湿度70%,打开包装)3-植酸酶酶他富5000G和6—植酸酶产品在严酷条件下的稳定性3-植酸酶他富耐热性能良好,制粒温度78℃时,酶活仍在96%左右。与植物性植酸酶同源的6-植酸酶产品进行了多层包被处研究发现6-植酸酶产品在畜禽体内的水解效率只有3-植酸酶酶他富的50%。1gP=902g体增重水解效率3-植酸酶酶他富1g=26.88mg趾灰酶他富588FIU/kg=26.88mg趾灰1087FIU/kg=26.88mg趾灰对猪的消化试验发现,500单位微生物性的3-植酸酶酶他富相当于0.80克的无机磷(6.35克磷酸氢钙,含磷18%,利用率70%)。而500单位与小麦同源的6-植酸酶只相当于0.46克无机磷(3.65克磷酸氢钙),利用效率只有酶他富的57.5%。3-植酸酶酶他富5000G在畜禽采食后迅速释放,几分钟内达酶活高峰,而6-植作正确使用植酸酶的重要参数来参与最成本配方设计。但6-植酸酶产品没有成是在体外pH5.5,温度37℃的环境下反应测定的。植酸酶活性:不低于5000FTU/g;粒度:90%的颗粒小于0.80mm;容重(20℃):大约0.65g/cm3;保质期:15个月;包装:20/25kg;颗粒饲料:制粒温度不高于85℃。添加量,g/t稳定性好,常温存放,保持期内植酸酶含量不低于5000单位;特殊的后镶嵌成型保护工艺使3-植酸酶首创植酸酶的高温耐受极限;适用于替代颗粒饲料排泄量达50%,减少对水源和土壤造成的污染。结论6-植酸酶和3-植酸酶酶他富是二种完全不同类型的植酸酶产品。二者的作附件2:饲用植酸酶活性的测定标准配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料。样品最低检出量为90U/kg。GB/T6682—19分析实验家用水规格和试验方法(neeIS03696,样品在植酸钠浓度为5.0mmol/L、温度37℃、PH值5.50的条件下,每分钟从植酸钠中释放1μmol无机磷,即为一个植酸酶活性单位,以U表示。4方法原理植酸酶在一定温度和pH条件下,水解低物植酸钠,生成正磷酸和肌醇衍生5试剂和溶液本标准中所用试剂,在没有注明其他要求时,均指分析纯试剂和符合5.1乙酸缓冲液(I),c(CH3C0ONa·3H2O)为0.25mol/L:称取34.02g三水乙酸钠,0.1g吐温20于1000mL容量瓶中,加入900mL水溶解,用盐酸调节pH至5.50~0.01,并用蒸馏水定容至1000mL。,室温下存放2个月有5.2乙酸缓冲液(Ⅱ),c(CH3COON取34.02g三水乙酸钠,5g吐温20,30g乙二胺四乙酸二钠(EDTA)于1000mL,容量瓶中,加入900mL。水溶解,用盐酸调节pH至5.50±0.01,并用蒸馏水定容至1000mL,室温下存放2个月有效。5.3植酸钠溶液,c(C6H6024P6Na12)为7.5mmol/L:称取0.6929g肌醇六磷酸钠(C6H6024P6Na12)于100mL。容量瓶中,用乙酸缓冲液(5.1)溶解并定容至刻度,现用现配(实际反应液中的最终浓度为5.0mmol/L)。5.4硝酸溶液:1十2水溶液。于100mL。容量瓶中,加入1.0mL氨水(25%)用水溶解定容至刻度。5.62.35g/L钒酸铵溶液:称取0.235g钒酸铵(NH4VO3)于100mL棕色容量瓶中,加入2mL硝酸溶液(5.4),用水溶解定容至刻度。避光5.7颜色终止液:移取2份硝酸溶液(5.4),1份钼酸铵溶液(5.5),1份钒酸铵溶液(5.6)混合后使用,现用现配。6.2恒温水浴:(37±0.1)℃。56.6酸度计:精确至小数点后2位。6.7离心机:转速为4000r/min以上。取有代表性样品,用四分法将试样缩分至200g,植酸酶产品不需粉碎,配合饲料和添加剂预混合饲料需粉碎通过0.45mm标准筛,装入密封容器,8测定步骤8.1绝对法(仲裁法)8.1.1标准曲线准确称取0.6804g在105℃烘至恒重的基准磷酸二氢钾(5.9)于100mL容量瓶中,用乙酸缓冲液(5.1)溶解,并定容至100mL浓度为50.0mmol/L。按表1的比例稀释成不同浓度,与试样一起反应测定,以无机磷浓度为横标准序号稀释量/mL浓度/(mmol/L)2344858.1.2试样溶液的制备按照附录A中建议的称样量称取试样两份,精确至0.0001g,置于100mL容量瓶中,加入约70mL乙酸缓冲液(5.1)1),一个磁力棒,在磁力搅拌器(6.4)上高速搅拌30min,用乙酸缓冲液(5.1)定容至刻度(减去磁力棒的体积)。摇匀,在离心机(6.7)上以4000r/min离心10min。分取不同体积的上清液用乙酸缓冲液(5.1)稀释,使样液浓度保持在0.4U/建议在测定样品时附加一个已知活性的植酸酶参考样,便于检验整个操作过程是否有偏差。8.1.3反应取10mL试管按下面的反应顺序进行操作,在反应过程中,从加入底物(5.3)开始,向每支试管中加入试剂的时间间隔要绝对一致,37℃水解30min。反应步骤及试剂、溶液用量见表2。1.加乙酸缓冲液(5.1或5.2)√√V样品测定反应后的试样在室温下静置10min,如出现混浊需在离心机(6.7)上以4000r/rain离心10min,上清液以标准曲线的空白调零,在分光光度计(6.3)415nm波长处测定样品空白(A。)和样品溶液(A)的吸光8.2相对法8.2.1标准曲线准确称取一定量的标准植酸酶(5.8),精确至0.0001g,于50mL容量瓶中,用0.25mol/L乙酸缓冲液(5.1)溶解并定容至刻度。做两次稀释使植酸酶活性大约在o.05U/mL左右,当日配制。将上述植酸酶标准液再按表3比例用缓冲液(5.1)进行稀浓度为横坐标,吸光值为纵坐标,列出直线回归方程(y=ax+b01大约酶活性/(U/大约酶活性/(U/mL)00010样品溶液的制备以下操作步骤按8.1.2进行,使样液浓度保持在o.02U/mL左右。注:添加剂预混合饲料样品需采用乙酸缓冲液(5.2)。8.2.3反应取10mL试管按下面的反应顺序进行操作,在反应过程中,从加入底物(5.3)开始,向每支试管中加入试剂的时间间隔要绝对一致,37℃水解30min。反应步骤及试剂、溶液用量见表4。√5√6.依次加入终止液(5.7)7合√√8.2.4样品测定反应后的试样在室温下静置10min,如出现混浊需在离心机上以4000r/min离心10min,上清液以标准曲线的空白调零,在分光光度计(6.3)415nm波长处测定样品空白(Ao)和样品溶液(A)的吸光值,A-A0为实测吸光值。用直线回归方程计算植酸霉的活性。9结果计算和表示9.1植酸酶活性U按式(1)和式(2)计算9.1.1绝对法 9.12相对法;U=F×C/m…..9.2结果表示9.3重复性同一样品两个平行测定值的相对偏差,植酸酶产品不大于8%,添加植酸酶的各种饲料样品不大于10%。植酸酶活性/(U/g)称样量/g1)添加剂预混合饲料样品需采用乙酸缓冲液(5.2)。附件3:中国饲料添加剂工业现状及发展前景一、中国饲料工业概况中国饲料工业在80年代初期进入快速的发展阶段,到了90年代末期饲料工业体系基本成龙配套,进入稳定成熟的发展时期。20年来形成的五大支撑体系2002年,全国饲料工业产品产量8319万吨,比上年增长6.6%,实现工业总产值1906亿元,比上年增长15.9%。配合饲料6239万吨,比上年增长2.5%,浓缩饲料1764万吨,比上年增长24.3%,添加剂预混合饲料316万吨,比上年增长5.3%。饲料工业生产的总体水平继续提高。从饲料品种看:配合饲料中,猪配合饲料总产量1962万吨,蛋禽配合饲料1391万吨,肉禽配合饲料1883万吨,水产配合饲料676万吨,反刍动物精料补充料178万吨,其它配合饲料149万吨。浓缩饲料中,猪浓缩饲料产量982万吨,蛋禽浓缩饲料产量357万吨,肉禽浓缩饲料产量284万吨,反刍动物浓缩饲料产量86万吨,水产浓缩饲料30万吨,其它浓缩饲料产量25万吨。预混合饲料中,猪预混合饲料产量153万吨,蛋禽预混合饲料产量料产量47万吨,水产预混合饲料产量18万吨,反刍预混合饲料产量10万吨,其它预混合饲料产量25万吨。加剂预混合饲料的比重稳步上升,特别是2002年浓缩饲料增幅更快。配合饲料占全部饲料的比重,由2001年的78%下降到2002年的75%;浓缩饲料占全部饲料的比重,由2001年的18.2%上升到2002年的21.2%;2002年添加剂预混料占全部饲料的比重为3.8%,基本与2001年相同。一是在配合饲料产品中,猪配合饲料占配合料的比重为31%,比2001年下降5%;蛋禽配合饲料的比重为22.3%,提高0.3%;肉禽配合饲料的比重为30.2%,提高2.2%;水产配合饲料的比重为10.8%,提高0.8%;反刍动物精料补充料的比重为2.9%,提高0.9%;其它配合饲料的比重为2.4%,提高0.4%。二是在浓缩饲料产品中,猪浓缩饲料的比重为56%,比2001年下降6%;蛋禽浓缩饲料的比重为20%,下降1%;肉禽浓缩饲料的比重为16%,提高3%;反刍动物浓缩饲料的比重为4.9%,增长1.9%。三是在预混合饲料产品中,猪预混合饲料的比重为48.3%,比2001年下降2.7%;蛋禽预混合饲料的比重为20.1%,上升3.1%;肉禽预混合饲料的比重为14.7%,提高1.7%;水产预混合饲料的比重为5.7%,提高0.7%;反刍动物预混合饲料的比重为3.3%,提高2.3%。2002年,全国饲料企业按经济类型统计总数为13163家,比2001年增长19%。其中,国有企业954家,集体企业979家,私营企业7459家,联营企业409家,股份企业2119家,港澳台资企业115家,外商企业239家,其它企业889家。与2001年相比,国有企业、集体企业、联营企业数均呈现明显下降趋势,共减少504家,降幅17.7%。私营、股份制企业数分别增加1826家、574家,其增长率分别为32.47%、37.2%;港台及外商投资企业均有所增加。企业的发展趋势以饲料企业为龙头的先进实用技术的推广,正在全国各业化生产的配合饲料总量为6.04亿t。目前,排名前五位的饲料生产国其工业化生产配合饲料约占世界总产量的50%;排名前十位的国家其产量之和超过世界饲料总产量的60%;排名前50位国家的饲料产量则占世界总产量的90%以上。2002年世界排名前10位国家配合饲料生产预计排名123456789国家美国中国巴西日本法国加拿大墨西哥德国西班牙配合饲料产量(万吨)同比增长来自FAO的统计表明,2002年世界肉类总产量达到24505万吨,其中,中国肉类总产量为6785万吨(我国农业部统计为:6586万吨),占世界总产量的27.7%;世界猪肉产量9418万吨,其中,中国的猪肉产量为4460万吨(我国农业统计为:4326万吨),占世界总产量的47.4%;世界鸡肉产量6340万吨,中国的鸡肉产量为947万吨,占世界总量的15%;世界鸡蛋产量5375万吨,其中,中国鸡蛋产量2062万吨,占世界产量的38.4%。从这些数据可以表明,我中国饲料添加剂工业经过20余年的发展,为饲料加工业的发展起到了积极的支撑作用。截止2002年底,已注册登记的添加剂预混料企业3100家,添加剂生产企业1200家。产品中饲用磷酸盐类产量最大,占饲料添加剂总产量的70%(一)维生素22万t左右,实际生产量约占总生产能力的85%。来自中国饲料工业协会信息中心的统计分析认为:2002年全国维生素产量约19万t,其中氯化胆碱10万t左右;维生素C约6万t;其他维生素产量2万~3万t。由此可见,我国饲料量约12万t,占全球饲料级维生素市场需求量的1/5。我国已成为世界维生素生产与需求的重要市场。国内14种维生素生产基本实现国产化,告别了饲料级维1、维生素A2002年,中国VA产品的产量约4500t,主要用于饲料公司、罗氏泰山(上海)维生素厂、厦门金达威维生素有限公司、浙江新和成股很大的突破。厦门金达威维生素有限公司率先引进国际技术,进行维生生产。在此后,浙江花园生物高科有限公司嫁接中国科学院研发的维生素D3的高新技术产业化项目,使中国的维生素D3产品在国际市场上的竞争力得到进一浙江新和成股份有限公司等。2002年维生素D3粉的生产能力达到2600吨,预计D3粉的生产量达到1500吨。3、维生素EVE是发展最快的维生素产品之一,自上世纪80年代以未来的高增长。2002年VE国内主要生产厂家有:浙江医药股份有限公司新昌制药厂、浙江新和成股份有限公司、罗氏(上海)维维生素有限公司等,总体VE的生产能力超过4万吨,实际生产量超过25000吨。从目前看,我国VE用在饲料中约占50%~70%、,食品化妆品用量约占10%,其他作为药用,有大量出口。国内合成VE生产随着中间体依赖进口发展到完全上世纪80年代初期无论产量,质量,成本上差距都是很大的.而今生产技术水平,产品质量与国外相差不大,VE收率国内各生产厂家均在95%以上。因此,上看,国外品种有d1-a-游离VE、d-a-游离VE、d1-a-VE醋酸酯、d-a-VE醋酸酯;VE衍生物有VE烟酸酯、琥珀酸酯、亚油酸酯等,制剂品种有23种之多,衍生物只有VE烟酸酯,制剂仅有片剂、胶丸,50%VE粉(饲料用)等品种,远远不及国外,而且,我国VE在医疗,食品,饲料,化妆品,塑料等各种工业上成市东方精细化工厂等。目前形成生产能力预计为1500吨,2002年维生素K3生产量800吨。5、维生素B1B1又称硫胺(Thiamine)是人体必需营养物质。鉴于制药有限公司等,生产能力超过3600吨,生产量达到2200吨以上。6、维生素B2国内的VB2生产厂家主要是湖北广济药厂,生产规模在1000t以上,仅次于罗氏、BASF之后世界第3大生产厂。国内的生产企业还有天津太河制药有限公司、上海迪赛诺维生素有限公司(上海永信)等。2002年国内形成生产能力1800吨,产量预计超过1500吨,有批量出口。料受控与国际市场,产品在价格上缺乏竞争力。预计2002年国内的总量为300业,生产能力超过3500吨,此外还有天津市兽药二厂、天津河北制药厂三分厂等。2002年形成生产能力超过4000吨,预计产量超过3600吨。国内外市场需8、泛酸钙几年来,泛酸钙的生产得到了快速的发展,生产技术的提达到4000吨,预计2002年的实际产量达到2600吨。9、维生素B6维生素B6的主要生产企业有罗氏新亚(上海)维生素制药有限公司、上海辰福化工厂。2002年形成生产能力2500吨,产量2000吨。10、叶酸国内从事叶酸生产的企业有:常熟市华港制药有限公司常药业公司、衡水市冀衡药业有限公司等形成年生产能力500吨,实际产量370量由上世纪80年代的5794t扩大到现在的6万。通过这几年VC市场的激烈竞争,有限公司(靖江葡萄糖厂)、东北制药总厂、石家庄制药集团有限公司。VC是近年来,我国VC外销市场峰回路转,出口由滞转畅。从1998年下半年开始,我国VC出口量呈稳步递增的良好势头。据有关方面统计数据显示,去年,我国C的企业已减少,保证了出口的顺畅;二是VC生产企业从改革入手,改机制、上VC价格大战已进入调整期,价格从1999年开始已出现缓升态势,形势正在向好的方面发展。2002年预计中国维生素C的生产能力仍在70000吨以上,产量达到60000吨。12、维生素B12VB12是结构最为复杂的一个维用生物发酵方法制备。主要由美国Glaxo、法国Roussel-Uclaf、Rhone-Poulec、6吨,2002年实际产量在5吨左右。13、氯化胆碱整体来讲,氯化胆碱的生产工艺相对简单,上游化工明特氯化胆碱(上海)有限公司、阿克苏*诺贝尔三原化学有限公司、济南华菱药业、陕西壮须集团(陕西渭南饲料添加剂厂)、吉林四平中信氯化胆碱有限责药二厂等一批生产企业,氯化胆碱的年生产能力超过15万吨,2002年实际产量超过10万吨。14、生物素(H)生物素为中国维生素产品生产中最近2年中实现产年生物素纯品的生产能力超过80吨,2002年预计生物素纯品的生产量达到29维生素的进出口从以下的列表中可以看出,中国的维生素产品出口中国维生素进出口单位:吨产品名称2002年2003年1-7月出口量出口量维生素E维生素B1维生素B2泛酸钙维生素B626维生素B12(1%)6维生素C氯化胆碱其他未混合的维生素及其衍生物(二)氨基酸1、赖氨酸中国赖氨酸产业起步于20世纪90年代初,由当初的几千吨产量发展到2002年的53331t。主要的生产厂家有长春大成生化工程有限公司、四川川第三期工程能如期投产,届时,国内赖氨酸生产能力将扩2、蛋氨酸我国九十年代初从法国罗纳一普朗克公司引进技术,斯卑希姆公司的设计和关键设备,由中国化学工程总公司承建,投资6.5亿多人民币,在天津化工厂建设1万吨/年规模的DL-蛋氨酸装置,于1992年8月建成。但是由于种种原因,装置设计能力一直不能正常发挥。1997年罗纳一普朗克公司再次与天津化工厂合作,成立了合资企业“渤海(天津)罗纳一普朗克蛋氨酸有限公司”,经对装置进行检修,从1998年1月开工至今产量达到该装置建成以来的最高水平,1999年产量达到3000吨,2000年达到3311吨,2001年1800吨,2002年停止生产。这是我国唯一生产饲料用蛋氨酸的装置,即使这套年份(吨)我国再建一套5万吨/年规模的蛋氨酸生产装置是完全必要的。3、苏氨酸苏氨酸被称为第四限制性氨基酸,国外生产苏氨酸的主要企业有日几乎全部靠进口。近3年来,饲料级苏氨酸的(三)酶制剂2002年,农业部又新批准了9家企业从事饲料用酶制剂产品的生产,使国内从事饲料用酶制剂生产的企业增至80多家,、其中一些企业如广东溢多利2002年全国饲料用复合酶制剂总产量约为8800吨,比2001年增长了17%。不同2002年不同用途的饲料用酶制剂的产量及所占比例用途产量(吨)所占总量的比例(%)蛋禽其它8肉禽乳仔猪生长猪目前,饲料用消化性酶种主要有蛋白酶(酸性蛋白酶和中性蛋白酶)、α-酶主要包括阿拉伯木聚糖酶、β—葡聚糖酶、(四)饲料级矿物质微量元素结晶水已由7水减到1水,如氧化锌、硫酸铜等。再有氨基酸微量元素螯合盐的(五)饲料级微生物添加剂(EffectiveMicroorganisms),主要是通过性能,具有抗病、治病、促进生长多种功能。我国微生态制剂的研究始于70年代,农业部批准使用的饲用微生物添加剂:共我国生产饲料级微生物添加剂的企业、单位有4(六)其他饲料添加剂1991年以来,我国共批准进口抗氧剂饲料添加剂10余种,主要是乙氧喹准使用的防腐剂5类13个品种,即丙酸类包括丙酸、丙酸钠和丙酸钙;甲酸类剂有:美国安肥1000,美国健宝、西班牙肥得乐,国20万吨以上,生产能力完全可以满足饲料工业的需要。我国乳酸的生产近年来也取得了较大的进步,现有生产单位10余家,最大装置生产能力已达到5000t/4、色素随着饲料工业的发展,各种饲料添加剂和加工助剂越来越多地5、调味剂随着饲料工业的发展,在注重饲料营养的同时,也越来越重视提高展仅有10余年的历史,但发展速度很快,最盛时生产厂家多达100余家,年产量超过20000t,曾经把约90%的进口产品挤出了国内市场。经过几年颠峰期的发展、调整,现在大约80%以上的调味剂产量集中在十几家颇具规模、有一定知名度的厂家。绝大部分是猪用调味剂,约占总味剂”,而不是改善饲料适口性的调味剂;③不能正确使用调味剂。从生理学上看大多数动物(家禽除外)嗅觉比人灵敏,如果一种饲料人嗅起来感到“好香”,那(七)新型饲料添加剂(1)抗生素的使用在抑制病原微生物的同时也抑杀了动物机体内生理性微生(2)抗生素的大量使用,使病原微生物产生抗药性;(3)抗生素可引发动物发病甚至死亡;(4)抗生

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