第四章 种子发芽试验

-PAGE29-第四章种子发芽试验本章讲7节：§1、种子发芽试验的目的与意义§2、种子发芽的条件§3、幼苗鉴定标准（重点）§4、发芽试验的设备§5、标准发芽试验的方法§6、休眠种子发芽试验方法§7、快速发芽试验方法种子发芽率的高低是决定种子质量优劣的重要指标之一，芽率在生产上有时比纯度还重要。第一节种子发芽试验的目的与意义一、发芽试验的目的发芽试验的目的：是测定种子批的最大发芽潜力，比较不同种子批的质量，也可估测田间播种价值（种用价值）。种用价值＝种子净度×种子发芽率净度高、发芽率低，种子批不适于作为种用。但是发芽率高、净度低，可采取种子清选处理。二、发芽试验的意义（了解）

发芽试验是在实验室内进行的标准条件下发芽，具有重演性，结果准确可靠；在田间条件下，发芽条件的不一致性导致发芽结果不稳定，重演性差。

发芽试验对农业生产和种子经营具有重要意义：1、种子收购时做好发芽试验，可掌握种子的质量状况。

（有些新种子发芽率不一定高：如东北种子，本地夏播种子；春播种子晾晒不及时发芽率也有差别）2、种子贮藏期间做好发芽试验，利于检查贮藏条件，确保种子安全贮藏；

入库前有个基础数字：若发芽率上升，说明已通过休眠。如小麦；87－114若发芽率下降，说明贮藏条件下降。3、种子经营时做好发芽试验，避免销售发芽率低的种子，造成经济损失。（调种前尤其注意：新玉米看胚色；小麦看破碎粒是否发霉）4、播种前做好发芽试验，可以选用发芽率高的种子播种，可正确计算播种量。(如小麦基本苗要求12万/亩×45g/千粒重÷85％＝6.4kg/亩)5、（种子管理部门）在种子质量监督抽查时，做好发芽试验，对保证农业生产的安全用种有重要意义。（省、部、地种子站每年抽检）因此，做好发芽试验在种子经营、管理与农业生产上都具有重要意义。二、有关术语种子发芽(germination)：在实验室内幼苗出现和生长达到一定阶段，简单说：发芽必须长成正常幼苗。因此，准确判断幼苗结构是种子发芽试验的关键。（室内检验员不能正确鉴别正常幼苗者考评不合格）幼苗的构造主要包括：根系、胚轴（上、中、下胚轴）、子叶、初生叶、顶芽和芽鞘等构造组成。发芽力通常用发芽势和发芽率表示：发芽势(初次计数)：种子在发芽试验初期，规定条件和日期内长成的正常幼苗数占供试种子数的百分率。发芽势高，表示种子活力强、出苗迅速、整齐、增产潜力大。

发芽率(末次计数)：在规定条件和时间内长成的正常幼苗数占供检种子数的百分率。发芽率高，表示有生活力种子多，播种后出苗数多。第二节种子发芽的条件（读本p160）内在条件：种子必须有生活力，且已通过休眠。环境条件：水分、温度、氧气是种子萌发的必要条件，某些作物种子萌发还需要光照或黑暗。不同作物种子由于起源和进化的生态环境不同，其发芽所要求的条件也有差异。一、水分

1、水分是种子发芽的关键性因素。因种子必须吸足水分才能加速种子内部的生命活动（有水才能吸帐），酶的活性增强，贮藏物质的水解和转化，促进细胞的生长，从而促进种子的萌发。但并不是说种子只要得到水就能萌发，因为种子萌发需要一个适宜的水分条件。若水分过多（种子浸入水中），会出现烂种。主要原因：得不到呼吸所必须的氧气（缺氧伤害）；可溶性物质外渗降低种子活力。什么是适宜的水分呢？2、不同作物种子对水分的需求有差异。最低需水量：指种子开始萌发时吸收的水分重量占种子重量的百分率最低需水量依种子的化学成份不同分三类：①以淀粉为主的种子：需水量比较低，最低需水量为22.5～60％。小麦为60％，水稻接近25％。②以蛋白质为主的种子：需水量比较高，最低需水量为126～186％。大豆126％，豌豆186％。③以脂肪为主的种子：居中。如向日葵、油菜、棉籽50％±。所以，有些蛋白质、脂肪类种子发芽试验难做：如西瓜、大豆、棉花、菠菜等种子对水分较敏感，水分少，吸不足水；水分一多，则发芽差，甚至不发芽。而水稻、玉米等种子对水分不太敏感。3、不同发芽床加水量不同（根据发芽床和种子特性决定发芽床的加水量）①砂床：按饱和含水量的60～80％加水(禾谷类等种子为60％，豆类等大粒种子为80％)。②纸床：充分吸湿后，沥去多余水分即可。（吸水纸放进水去后停一会才能饱和，不能放进去就拿出来）。③土壤做：加水至手握土粘成团，手指轻轻一压就碎为宜。

发芽期间发芽床必须呈湿润状态，但任何时候不应潮湿到种子周围出现水膜。

4、发芽试验用水清洁、干净、无毒无害、不含酸碱，pH6～7.5。一般自来水即可。5、发芽试验期间要定时定量补充水分，以保持各重复间的水分和湿度的一致性。（一般出苗前加盖，不需加水；出苗后加水）发芽箱内相对湿度要求90％以上，若达不到可在发芽箱内放几个水盆。总之，发芽试验关键是水分，因水分调节氧气。二、温度

1、温度是种子萌发的又一重要条件。因种子萌发是一个相当复杂的生理生化过程。各种作物种子发芽通常有最低、最适、最高三种温度。温度过低，酶活性降低，呼吸作用减弱，物质转化受阻，发芽缓慢。温度过高，抑制酶活性，产生畸形苗。温度适宜，种子才能正常、良好的发芽。适宜的发芽温度：水稻、玉米、菜豆等高温型作物为30℃（晚春播→秋天收）麦类、油菜、萝卜等低温型作物为20℃（秋播或早春播）2、不同作物种子发芽温度不同：发芽温度有两类：恒温、变温两种。①恒温：整个发芽试验期间保持同一温度。有的作物二种温度均可（20；15℃/25；30℃）但报告单上应注明发芽温度。耐寒作物如麦类、油菜、大白菜、蚕豆、葱类一般采用20℃恒温。喜温作物发芽温度较高，为25或30℃。如玉米25℃；棉花25;30℃②变温：在发芽试验期间一天24h内：高温保持8h；低温保持16h.变温是模拟种子发芽的自然环境。一般来说，变温有利于种子渗入氧气，促进酶活化，加速发芽。变温范围为30℃/20℃；25℃/不同作物种子发芽时变温幅度见附表2（p203）新收获的休眠种子对发芽温度要求特别严格，必须用恒温中的较低温度或变温（如洋葱种子发芽温度有20/15℃，则应选用15℃发芽；西瓜种子规定温度有20～30℃、30℃、25℃，则应选用20～30℃或25℃恒温）。陈种子，选用变温或较低恒温发芽为好（适当偏低温度，有利于提高发芽率）。当规定用变温时：已通过休眠的种子，在3h内完成变温。如果是休眠的种子，应在1h或移至另一个低温的发芽箱内。（即调换发芽箱）。

在发芽试验技术规程中，大部分农作物种子规定了既有恒温又有变温：一般先用恒温方便，恒温发芽效果不好时再用变温，变温有利于种子发芽。若不知某种作物发芽最适温度时，可根据播种期估计最适温度：早春播种作物为10～15℃；晚春播种作物为20～25℃；夏播作物为30℃；秋播作物为20～25℃。三、氧气：氧气是种子发芽不可缺少的条件。大气中20％O2，0.03％CO2，80％N2这个浓度发芽正常。若O2下降↓，CO2上升↑，则影响发芽结果。燕麦试验：O2％20.9％14.7％12.8％CO2％030％38.7％发芽率100％50％1％原因：种子吸水后，各种酶开始活化，呼吸作用、贮藏物质的水解、转化，新物质的合成，都需大量氧气。花生、棉花种子发芽试验难做，原因是需水多，蛋白质、脂肪转化需氧气也多。种子发芽时，胚根伸长对氧气需求比胚芽伸长更为敏感：如果发芽床上：水分多、氧气少，则先长芽不长根（水多先长芽）。水分少、氧气多，则先长根后长芽（水少先长根）。田间旱天先长根。一般发芽箱有通气设备，不会造成缺氧现象。但是，水与氧是相互制约的（水多氧即少）。所以，发芽试验水量要适当，以水调气。一般发芽试验的水量，以种子周围不出现水膜为宜。四、光照：按种子发芽对光反应的不同分为三类：

1、光不敏感型种子：大部分农作物和蔬菜种子萌发对光不敏感。即有光和无光均能发芽。2、需光型种子：有少部分作物种子只有在有光条件下萌发良好，叫喜光种子。如茼蒿（规程中只有这一种）。3、需暗型种子：个别种子萌发需要黑暗。如黑种草种子；铃兰。为了正确鉴定幼苗，减少污染，发芽时需提供光照。因光照条件下培养发芽，有利于抑制霉菌的繁殖，并有利于正常幼苗的鉴定，区分黄化、白化不正常幼苗。需光照的种子的光照强度为750～1250lx。第三节幼苗鉴定标推一、幼苗鉴定基础知识（一）幼苗的出土类型种子发芽后根据子叶的位置，可分为子叶出土型和子叶留土型。1、子叶出土型：由于下胚轴伸长而使子叶和幼梢伸出地面的一种发芽习性。例如双子叶植物的菜豆、大豆、油菜、瓜类、棉花等，大部分双子叶植物为此种类型。单子叶植物的洋葱等。2、子叶留土型：子叶或变态子叶（盾片）留在土壤中的种皮内一种发芽习性，例如单子叶植物的稻麦类、玉米（禾本科）等；豆科的蚕豆和豌豆属于此种类型。（二）、幼苗的主要构造1、双子叶幼苗的主要构造子叶出土型的包括：初生根、次生根、下胚轴或上胚轴、子叶、初生叶和顶芽等部分（如大豆、菜豆、芸苔属）。90％以上。（p39图4－1大豆）子叶留土型的包括：初生根、次生根、上胚轴、子叶、初生叶、鳞片（退化的叶片）和顶芽等（如碗豆、蚕豆）。（p40图4－5）2、单子叶幼苗的主要构造子叶出土型的包括：初生根、不定根和管状子叶等（如葱属）。子叶留土型的包括：初生根（种子根）、次生根、不定根、中胚轴、胚芽鞘和初生叶等（如玉米、小麦）。（p39图4－2玉米）3、多子叶幼苗的主要构造林木种子的针叶树种类（如松科）具有针状子叶，称为多子叶。主要构造：初生根、下胚轴、子叶、顶芽。(p40图4－3)二、幼苗鉴定标准（重点与难点）种子萌发后长成的幼苗可分为正常幼苗和不正常幼苗。根据发芽定义，只有长成正常幼苗的种子才能计入发芽种子数。正确鉴定幼苗是发芽试验中一个重要环者。（室内检验员不能正确鉴别正常幼苗与不正常幼苗者，考评不合格。）(一)、正常幼苗的鉴定标准（同p41）正常幼苗：在良好土壤及适宜的水分、温度和光照条件下，具有继续生长发育成为正常植株的幼苗。正常幼苗分为三种类型：完整幼苗带有轻微缺陷的幼苗次生感染的幼苗凡符合下列类型之一者为正常幼苗：1完整幼苗：幼苗主要构造生长良好、完全、匀称和健康。因种不同，应具有下列一些构造。①根：发育良好的根系：a.细长的初生根，通常长满根毛，末端细尖。b.在规定试验时期内产生的次生根。c在麦类中（燕麦、大麦、黑麦、小麦和小黑麦），由数条种子根代替一条初生根。②中轴：发育良好的幼苗中轴：a.子叶出土型：有一个直立、细长有伸长能力的下胚轴(如大豆、棉花、白菜)。b.子叶留土型：有一个发育良好的上胚轴(碗豆、蚕豆)。c.在出土型发芽的一些属(如菜豆、花生)：有伸长的上胚轴和下胚轴。d.在禾本科的一些属(如玉米、高粱)：应具有伸长的中胚轴。(盾片着生点至胚芽之间的苗轴)③子叶：具有特定数目的子叶：a.单子叶植物：具有一片子叶，为绿色和呈圆管状(葱属)；或变形而遗留在种子内(如石刁柏、禾本科)。b.双子叶植物：具有二片子叶，出土型子叶为绿色，展开呈叶状；留土型子叶为半球形和肉质状，并保留在种皮内。④初生叶：具有展开、绿色的初生叶：a.互生叶幼苗中有一片初生叶。b.对生叶幼苗中有两片初生叶（如菜豆属）。⑤具有一个顶芽或苗端。⑥芽鞘：在禾本科中有一个发育良好、直立的芽鞘，包着一片绿叶延伸到顶端，最后从芽鞘中伸出。2带有轻微缺陷的幼苗幼苗主要构造受到轻微缺陷，但在其他方面能均衡生长，仍有可能长成正常良好的植株。有下列缺陷则为带有轻微缺陷的幼苗。①初生根：a.初生根局部损伤，或生长稍迟缓。b.初生根有缺陷，次生根发育良好：豆科大粒种子(如菜豆属、豌豆属、花生属、豇豆属和扁豆属)；禾本科中的一些属(如玉米属、高粱属和稻属)；葫芦科所有属(如甜瓜属、南瓜属和西瓜属)和锦葵科所有属(如棉属)。c.麦类中只有一条强壮的种子根（燕麦属、大麦属、黑麦属、小麦属和小黑麦属）。②胚轴局部损伤（下胚轴、上胚轴或中胚轴）。③子叶(采用“50%规则”)：a.子叶局部损伤，但≥50％仍保持着正常的功能。b.双子叶植物仅有一片正常子叶也可。（浸种易掉一半子叶）初生叶：a.初生叶局部损伤，但≥50％仍保持着正常的功能。b.顶芽没有明显的损伤或腐烂，有一片正常的初生叶（如菜豆属）。c.菜豆属的初生叶形状正常，大于正常大小的四分之一。⑤芽鞘：a.芽鞘局部损伤。b.芽鞘从顶端开裂，裂缝长度≯芽鞘的三分之一。c.受内外稃或果皮的阻挡，芽鞘轻度扭曲或形成环状。d芽鞘内的绿叶，没有延伸到芽鞘顶端，但至少要达到芽鞘的一半(露出一半)。3、次生感染的幼苗由真菌或细菌感染引起，使幼苗主要构造发病和腐烂，但有证据表明病源不来自种子本身。（二）不正常幼苗的鉴定不正常幼苗有三种类型：a.受损伤的幼苗：b.畸形或不匀称的幼苗：c.腐烂幼苗：在实际过程中，凡幼苗带有下列任一缺陷则列为不正常幼苗。（p42GBp50-52）实验室内讲（三）、不发芽种子：在发芽试验末期仍不发芽的种子．分三种情况：1、硬实：标准发芽条件下，种子不能吸水，表面坚硬的种子。这是休眠的形式，常见于豆科作物里（如绿豆，浸泡后明亮粒多）测定硬实种子百分率：20℃浸泡22h，仍发硬的为硬实种子。2、新鲜不发芽种子：由生理休眠引起。在标准发芽条件下能吸水，不能进一步发育，保持一定硬度，有生长成为正常幼苗潜力的种子。3、死种子：在试验末期，既不坚硬，又不新鲜。表现为柔软、褪色、发霉、无幼苗生长的迹象。三、常见作物种子正常幼苗和不正常幼苗形态特征p43图4－6水稻；p44图4－7玉米；p45图4－8小麦p46图4－9大豆；p47图4－10棉花；p47图4－11番茄；p48图4－12芸苔属。第四节、种子发芽试验的设备（发芽床、发芽盒、发芽箱）一、发芽床发芽床是用来安放种子并提供给种子水分的的衬垫物。通常采用纸床、砂床。土壤床不且作为初次试验的发芽床。当在纸床上幼苗出现中毒症状或对幼苗鉴定怀疑时才用土壤床。发芽床应具备的条件：要求保水性好，通气性好，无毒质，无病菌，有一定强度，pH6.0一7.5。（一）纸床：是使用最多的一类发芽床。主要有专用发芽纸、滤纸等。发芽纸应满足以下要求：发芽纸除具备：持水性强，无毒质，无病菌外，还应具备：纸质坚韧、多孔和通气，具有一定强度的特点。以免吸水时破碎，操作时不致撕破，发芽时幼根不致穿人纸内，便于幼根的正确鉴定。检查发芽床有无毒质的方法（生物毒性测定）：读本选用对毒质敏感的牧草种子作发芽试验（如梯牧草、红顶草、弯叶画眉草、紫羊茅和独行菜等）。观察幼苗在纸床上是否出现畸形：凡是根缩短、翘起，芽畸形，则表示该纸含有有毒物质。(二)、砂床：也是一种常用发芽床。使用前还须做如下处理：

1、过筛和洗涤：取建筑用砂，晒干。用0.8mm和0.05mm二层筛子过筛，取两层筛中间的砂子（即直径为0.05～0.8mm）。粒太大不保水，粒太小不透气。（这么细的筛子很难筛，一般用1.5～2.5mm筛子即可）筛后用清水洗涤：除去污物和有毒物质。2、高温消毒：洗涤过的砂子放铁盘内，130～140℃烘1～2h，杀死病菌及杂草种子。（湿砂烘干成本太高，可用太阳晒即可）砂子可以重复使用，但必须洗涤和高温消毒。如玉米种子发芽试验：砂床不冲洗接着作，个别品种抑制发芽。化学药品处理过的种子发芽后的砂子，不要重复使用。（三）、土壤床要求土质疏松，无大颗粒，无毒无菌。使用前高温消毒，不重复施用。（因种子分泌物对发芽有抑制作用）具体怎样选择发芽床？根据种子籽粒大小选择：大粒种子常用砂床；小粒种子常用纸床；中粒种子砂，纸床均可。二、发芽皿：用来安放发芽床的容器称为发芽皿。可用发芽皿、发芽盘、发芽盒等。为了鉴定正常幼苗，要求发芽皿：透明、保湿、无毒，具有一定的种子发芽和发育的空间，确保一定的氧气供应。根据上述的要求，我国研制系列透明塑料发芽盒：方形透明塑料盒(12cm×l2cm×6cm)适用于纸床进行100粒的小、中粒种子。

长方形透明塑料盒(13cm×l9crn×10cm)适用于砂床50粒的大粒种子。一般单位用冰盒代替也可，因冰盒不易碎、价格便宜。三、发芽箱与发芽室发芽箱是为种子发芽提供所需的温度、湿度、光照等条件的设备。发芽箱可分为两类：一类是“干”型，只控制温度，不控制湿度。另一类是“湿”型，既控制温度，又控制湿度。我国目前常用的发芽箱多数属于“干”型，如光照变温发芽箱。1、光照发芽箱：如LRH－250—GⅡ型微电脑控制光照发芽箱。有广东、上海、哈尔滨生产。该发芽箱具有：加热系统、制冷系统（控温范围10～40℃）、光照系统、气流循环系统等部分组成。冬天室内温度低，必须加热。可满足不同季节、不同温度的种子发芽要求。注意：箱内发芽盒不宜太多，否则通风不良影响温度的均匀性。2、人工气候箱装备有加热、制冷、加湿、光照和风扇等系统，采用微机控制，具有自动快速变温、变光和调湿功能，能完全满足各种作物种子发芽所需的条件。由于价格较高，用于发芽试验的较少。3、电热恒温培养箱：GB无要求，但有此设备可以用。具有加热和控温系统。实验室比较多。缺点：无光照及制冷系统。无光照系统，不利于形成正常幼苗。改进：使用时可在箱内加一支节能灯，增加光照。4、发芽室：是一种类似发芽箱的房间。其构造原理与发芽箱相似，墙壁有保温隔热材料，室内需要加热、制冷、加湿、光照、通风设备。室内设多层架子，供放发芽盒用→可进行同一温度的发芽试验。室内再放1－2个培养箱－→可进行多种温度的发芽试验。注意：加湿器不可缺少，因北方冬春季湿度低，蒸发量大，若一天加多次水，会增加试验误差。规程要求相对湿度90％，实际上80％效果就良好。四、数种设备为了提高工作效率，可使用数种设备：主要有：活动数种板、真空数种器（GB要求有，大部分单位没有）。1、活动数粒板数粒板大小与发芽床相近，上有50个孔，下层垫有一块底板。用时将种子撒在数粒板上，使种子落入孔内，除去多余种子，将数粒板放在发芽床上，抽去底板，种子便落在发芽床的相应位置。主要适用于大粒种子和脱绒棉籽等。（注意：防止孔中无粒或一孔二粒）2、真空数种器：实验室有此设备数种头有圆形、方形和长方形3类，其面积大小与发芽床的形状和大小相同，设有100、或50个数种孔．适用于小、中粒种子：如禾谷类的稻麦类、芸苔属等。注意避免吸轻型种子。3、电子数粒仪：主要用于千粒重测定、光敏电阻易坏，用的少。第五节标谁发芽试验方法一、种子发芽前的处理作发芽试验的种子为净种子，在种子发芽试验之前应先做净度分析，去除杂质和其他植物种子。将不健康种子应进行表面消毒，即浸入1％次氯酸钠(NaClO)溶液中处理5～l0min，置于消毒过的培养皿内，杀菌效果明显。（如做小麦发芽试验种子易发生霉菌）二、数取试样：从净度分析后的净种子中，随机数取400粒。通常为：100粒×4：小、中粒种子（油菜、白菜；麦类、水稻等）50粒×8：大粒种子或带有病原菌的种子（玉米、大豆）25粒×16：特大粒种子（如花生、蚕豆等）。为什么粒距要加大？目的：保证每粒种子都有一个空间，因要求长成正常幼苗。复胚种子：能够产生一株以上幼苗的种子单位。（如甜菜的种球，一个种球有几粒种子）。复胚种子可视为单粒种子进行试验，不需分开。但芫荽（香菜）例外（分开，一粒粒做）数种时注意：手工数种应避免：专数大粒，要随机数取（先数好后放）；用数粒板数应注意：一孔两粒或孔中无粒（有50、100两种）；用真空数种器数种：避免吸轻型种子（轻者易吸上来）。p203附表2部分农作物种子的发芽技术规定种名学名发芽床温度℃初次计数天数末次计数天数附加说明，包括破除休眠的建议1．洋葱AlliumcepaL.TP;BP;S20;15612预先冷冻2．葱AlliumfistulosumL.TP;BP;S20;15612预先冷冻5．韭菜AlliumtuberosumRottl.TP20-30;20614预先冷冻9．花生ArachishypogaeaL.BP;S20-30;25510去壳；预先加温（40℃白菜型油菜BrassicacampestrisL.TP15-25;2057预先冷冻芥菜型油菜BrassicajunceaCzern.TP15-25;2057预先冷冻；KNO3根用芥菜BrassicajunceaCoss.varTP15-25;2057预先冷冻；GA3

甘蓝型油菜BrassicanapusL.TP15-25;2057预先冷冻

结球甘蓝BrassicaoleraceaL.TP15-25;20510预先冷冻；KNO3

31．花椰菜BrassicaoleraceaLTP15-25;20510预先冷冻；KNO3

结球白菜BrassicacampestrisL.TP15-25;2057预先冷冻；GA3

40．辣椒CapsicumfrutescensL.TP;BP;S20-30;30714KNO3

44．西瓜CitrulluslanatusBP;S20-30;30;25514

53．黄瓜CucumissativusL.TP;BP;S20-30;2548

58．胡萝卜DaucuscarotaL.TP;BP20-30;20714

64．大豆Glycinemax(L.)Merr.BP;S20-30;2058

65．棉花Gossypiumspp.BP;S20-30;30;25412

69．大麦HordeumvulgareL.BP;S2047预先加温(30-35)预先冷冻；GA3

71．莴苣LactucasativaL.TP;BP2047预先冷冻

77．番茄LycopersiconTP;BP;S20-30;25514KNO3

84．烟草NicotianatabacumL.TP20-30716KNO3

86．稻OryzasativaL.TP;BP;S20-30;30514预先加温50℃KNO3中浸24h93．菜豆PhaseolusvulgarisL.BP;S20-30;25;2059

96．豌豆PisumsativumL.BP;S2058

99.萝卜RaphanussativusL.TP;BP;S20-30;20410预先冷冻

105．芝麻SesamumindicumL.TP20-3036

107．粟Setariaitalica(L.)TP;BP320-30410

108．茄子SolanummelongenaL.TP;BP;S20-30;30714

109．高粱Sorghumbicolor(L.)TP;BP20-30;25410预先冷冻

110．菠菜SpinaciaoleraceaL.TP;BP15;10721预先冷冻

115．小麦TriticumaestivumL.TP;BP;S2048预先加温(30-35)预先冷冻;GA3

116．蚕豆ViciafabaL.BP;S20414预先冷冻

120．绿豆Vignaradiata(L.)BP;S20-30;2557

长豇豆VignaunguiculataBP;S20-30;2558

124．玉米ZeamaysL.BP;S20-30;25;2047

注：表中符号代表：TP——纸上，BP——纸间，S——砂，TS——砂上。三、选择发芽床按p203附表2《农作物种子的发芽技术规定》，选用合适的发芽床。每一种作物通常列出2～3种发芽床，如小麦TP(纸上)、BP(纸间)、S（砂中）三种。玉米BP（纸间）、S（砂中）二种。1、选择发芽床，一般来说：小、中粒种子可用纸上(TP)发芽床，中粒种子也可用纸间(BP)发芽床；大粒种子(或对水分敏感的中、小粒)种子宜用砂床（S）发芽。活力较差的种子，用砂床的效果为好。2、调节水分：砂床：在装入发芽盒前应一次调好水分，避免重复间差异。水分控制在相对含水量的60～80％。作法：先拌好砂子，抓起指缝不滴水，放下不裂开，不要出现水膜。注意：不能将干砂先倒入发芽盒，然后加水拌匀。此法往往会造成干湿不均，砂中水分多孔隙少，氧气不够，影响正常发芽。纸床：①纸要＜发芽皿（容易放平，纸大了易鼓起来，吸水多小不同）。②浸好了以后水分要稍留点（小粒）；特小粒不用留。四、种子置床1、砂床：使用方法有二种（p49）：砂上（TS）和砂中（S）：（1）砂上(TS）：种子压入湿砂的表面（96年以前用的多，现在用的少，因种子易顶出来干枯）。现在多数作物用砂中（S）；砂上为极个别作物，95规程只有“茴香”一个为砂上。(2)砂中(S）：将拌好的湿砂装入发芽盒中，湿砂厚度2～4cm，播上种子，再按种子大小盖1～2cm厚的湿砂（厚度取决于种子大小）。原因：现在要求评价正常幼苗，盖的砂薄了种子易顶出来，易干枯。所以用砂中（S）较多。注意：禾谷类作物要求：“胚朝上”－→防止种子顶出来。根朝同一方向－→整齐、芽率好数。2、纸床：p49主要有2种方法：纸上(TP)、纸间(BP)。(1)纸上(TP)：将种子排在1层至多层湿润的滤纸纸上。特小粒种子可用一层（如烟草）；比较小种子可用二层（如芸苔属）；中粒种子可用3～4层（如稻麦类）注意：播种后一定要盖好盖子；如果没有盖（如搪瓷盘），箱内的湿度要达到90％以上。（P49第三种方法③放在雅可勃逊发芽器上，国内无此产品，80－90年代有仿造产品，但加热管易坏，现在不用了。）(2)纸间(BP)：将种子放在两层纸中间发芽。主要2种方式：①盖纸法：用一层发芽纸轻轻地盖在种子上（吸水快）。②纸卷法：将种子放在湿润的发芽纸上，再用一张同样大小的发芽纸盖在种子上，然后卷成纸卷，两端用皮筋扣住，立放。注意：胚朝上，胚根朝下生长，有利于幼苗的鉴定。该法也用于幼苗生长测定来评价种子活力。（P49③褶折纸：国标无这种方法→适用于甜菜种子发芽试验。）注意检查：各重复之间发芽床上的水分要一致，不一致要调整。种子间保持一定粒距：保持足够生长空间；防止发霉种子相互感染。五、贴标签种子置床后，应在发芽皿侧面贴上标签：注明品种名称、样品编号、重复次数及置床时间等。然后盖好盖子或套上一塑料袋。六、入箱发芽按照p203附表2规定的发芽条件，选择适宜的温度：1、新收获的有休眠种子和陈种子选用变温或较低恒温发芽为好。如烟草、黄秋葵、芝麻、粟等种子只规定使用变温。20～30℃2、麦类、蚕豆、豌豆、甜菜和葱类等耐寒作物一般采用20℃3、油菜、甘蓝、大白菜、花菜等芸苔属作物则采用15～25℃变温或204、禾谷类、豆类、瓜类等喜温作物则通常采用25℃例如玉米种子，附表2规定发芽床采用纸间(BP)和砂中(S)，因玉米是大粒种子，最好选用砂中作为发芽床，砂中能反映其田间的发芽条件。发芽温度有3种：恒温20℃和25℃；变温20～30℃。3种温度都可采用，一般采用25℃恒温发芽。箱内湿度要求90％以上，达不到可放一水盘。七、检查管理1、水分管理发芽床应始终保持湿润，水分不能过多或过少，落干时要用喷壶适量喷水，各重复间补水量要一致。2、温度管理发芽箱内应保持规定温度的土l℃范围内。变温发芽的种子，应按时变温。注意发芽箱内通风换气：箱内样品不要放的太多。3、霉烂：发芽试验过程中，经常发现发芽床或种子上滋生霉菌。表面生霉的拿出用水冲洗，再放回原处。发霉种子超过5％时，应更换发芽床，以免霉菌继续感染。对腐烂死亡种子，应立即去除并记载→防止相互污染（20℃污染轻）八、幼苗鉴定1、发芽持续时间

①规定日期内鉴定：每个种的发芽时间见p203附表2：技术规定初次计数；末次计数小麦4d8d玉米4d7d棉花4d12d水稻5d14d油菜、大白菜5d7d大豆5d7d花生5d10d②破除休眠处理所需时间不作为发芽试验的一部分。

③如果在规定时间内只有几粒种子发芽，试验时间可延长7d，或延长规定时间的一半。④反之，规定时间之前达到最高发芽率，可提前结束试验。

2、幼苗鉴定与计数⑴初次计数：达到正常幼苗标准的可先拣出来，并要记录（纸床）；腐烂的种子也应拿出来，并记录；未达到正常幼苗标准的继续试验。

⑵末次计数：计正常幼苗、不正常幼苗、新鲜不发芽种子、硬实种子、死种子。

3、复胚种子的计数复胚种子萌发时作为单粒种子计数，用至少产生一个正常幼苗的种子单位表示；可根据送验者要求测定100个种子所产生的正常幼苗数。九、结果计算与核对容许差距

（一）结果计算：试验结果用正常幼苗的百分率来表示。1、每重复不是100粒的应合并成100粒（50粒×2；25粒×4）。2、计算发芽势和发芽率。3、计算不正常幼苗、硬实、新鲜不发芽、死种子的百分率。4、四次重复正常幼苗百分率都在容许差距内，用平均数表示发芽率。正常幼苗、不正常幼苗、硬实、新鲜不发芽、死种子之和应为100％。不是100％应修正，最大修正0.5％（修正正常幼苗）。（二）核对容许差距:有4个表（GB/T3543.4）,举例如下：【例1】某一玉米发芽试验结果为97％、96％、98％、95％：则4次重复的平均值＝96.5％，根据修约至最近整数的原则，0.5则进位，＝97％。用97查p56表4－3（GB表3）容许差距7；重复间最大差距98－95＝3，在容许范围内，结果是可靠的。发芽率为97％。P56表4-3同一发芽试验四次重复间的最大容许差距重复间比较时用(2.5%显著水平的两尾测定)平均发芽率最大容许差距50%以上50%以下9925983697479658956993-947-81091-929-101189-9011-121287-8813-141384-8615-171481-8318-201578-8021-231673-7724-281767-7229-341856-6635-451951-5546-5020若重复间超过容许差距，须作第二次试验。第一次结果与第二次结果没超过P57表4-4（GB表4）规定的容许差距，则填报二次试验的平均值。P57表4-4同一或不同实验室来自相同或不同送验样品间发芽试验的容许差距(2.5%显著水平的两尾测定)两次试验间比较平均发芽率最大容许差距50%以上50%以下98-992-3295-974-6391-947-10485-9011-16577-8417-24660-7625-41751-5942-508【例2】现测得一发芽试验的发芽率分别为：65％,68％,76％,57％：①则4次重复的平均值66.5，修约平均值为67％。用67查p56表4－3（GB表3）(重复间都用此表)容许差距18；重复间最大差距76－57＝19＞18超过容许差距，必须重新试验。②第二次试验发芽率为70％、70％、68％、72％。平均值为70，用70查表4－3（GB表3）容许差距18；重复间最大差距72－68＝4＜18，未超过容许差距18。③再比较两次试验的一致性：（66.5＋70）/2＝68.25，用68查p57表4－4（GB表4）容许差距7；两次试验间差距70－66.5＝3.5＜7，未超过容许差距。因此，发芽率的最后填报结果为68％。【例3】有一批种子，种子销售者测定发芽率为87％，而种子消费者测定为80％，请问种子销售者的测定值可以接受么？（即第二个送验样品是否显著低于第一个？）先计算两者的平均值：（87＋80）/2＝83.5≈84，用84查GB/T3543.4表5容许差距7；实际差距87－80＝7。所以，销售者的测定值可以接受。即第二次测定不显著低于第一次（是随机误差）。（买卖双方出现争执时用）表5同一或不同实验室不同送验样品间发芽试验的容许差距(5%显著水平的一尾测定)第二次测定低于第一次时用平均发芽率最大容许差距50%以上50%以下992297-983-4394-955-7491-938-10587-9011-14682-8615-19776-8120-25870-7526-31960-6932-411051-5942-5011发芽试验与规定值比较的容许差距（5％一尾测定）；规定值：可看成分级标准的标准值；也可看成种子标签值。（检测机构用）表6发芽试验与规定值比较的容许误差（5%显著水平的一尾测定）规定发芽率容许差距50%以上50%以下992196-983-5292-956-9387-9110-14480-8615-21571-7922-30658-7031-43751-5744-508【例4】①小麦分级标准发芽率为85％，调一批种子测定平均值为83％。规定值85，容许差距为5。实差85－83＝2＜5。说明是随机误差。②小麦标签上为90％，实测87％。90％时容许差距为4。实差90－87＝3＜4。不显著。十、重新试验：当试验出现下列情况时，应重新试验：

1、怀疑种子有休眠(即有较多的新鲜不发芽种子)，应破除休眠重新试验。2、由于病原菌感染，使试验结果不一定可靠时,可采用砂床或土壤床进行试验。如有必要，应增加种子之间的距离。

3、当幼苗鉴定或计数有错误时，应重新试验。

4、超过重复间（100粒）最大容许差距时，应重新试验。如果第二次测定与第一次结果相一致，则填报两次试验的平均数。如果第二次结果与第一次结果不相符，则进行第三次试验，填报符合要求的二次平均数。十一、结果报告p57结果须填报：正常幼苗、不正常幼苗、硬实种子、新鲜不发芽种子、死种子的平均百分率。若其中一项为0，则相应空格填"一O一"。（注意：净度保留一位小数为－0.0－，四个必测项目只有芽率为整数）由于检验规程中发芽床、发芽温度是可选择的。而发芽床、发芽温度对发芽结果有较大影响。还要报：发芽床、温度、发芽持续时间；促进发芽的方法。数字修约：（读本p129）在发芽试验中，正常幼苗百分率修约至最接近的整数，0.5则进位。计算其余成分百分率的整数，并求其总和。如果总和为100，修约程序到此结束。如果总和不是100，继执行下列程序：在不正常幼苗、硬实、新鲜不发芽种子和死种子中：首先，找出百分率小数部分最大者，修约此数至最大整数，并作为最终结果。其次，计算其余成分百分率的整数，如果总和为100，修约结束。如果不是100，重复此程序；如果小数部分相同：优先次序为：不正常幼苗、硬实、新鲜不发芽种子、死种子例如：正常幼苗90.7％→91％共99％不正常幼苗4.3％→4％硬实1.4％→1％→2％新鲜不发芽种子2.3％→2％死种子1.3％→1％如果硬实为1.3％，则小数都为0.3％，则不正常幼苗为5％。第六节休眠种子发芽试验方法当发芽试验结束还存在硬实或新鲜不发芽种子时，说明种子存在休眠，可采用下列一种或几种方法进行处理重新试验（p203附表2）。如怀疑种子有休眠，这些处理方法也可用于初次试验。一、破除生理休眠的方法（7种，同GB）

1、预先冷冻：（适用于因种皮不透气而处于休眠的种子）原因：因种皮不透气，胚得不到氧气而不能萌发。而低温条件下，水中氧的溶解度加大，水中氧可随水分进入种子内部，满足胚细胞生长分化所需要的氧气，促进种子萌发。方法：把种子放在湿润的发芽床上，在5～10℃条件下进行冷处理。如麦类种子在5～10℃处理3d、蔬菜种子在5～10℃处理7d。然后在规定温度下发芽。

2、硝酸处理（HNO3）硝酸是一种强氧化剂，也有腐蚀皮壳提供氧气的作用。水稻休眠种子可用0.1mol/L硝酸溶液浸种16～24小时，冲洗，然后进行发芽试验。3、硝酸钾处理（KNO3）：硝酸钾处理，多用于禾谷类、茄科种子。一般来说用低温处理有效的种子，用硝酸钾处理均有效。方法：用0.2%(m/V)的硝酸钾溶液湿润发芽床。发芽试验期间补给水分。4、赤霉素（GA3）处理：p54赤霉素破除作物种子休眠有效浓度赤霉酸是一种生长刺激物质，若休眠是由于种子内部存在发芽抑制物质（脱落酸