保健食品中绿原酸的测定 编制说明

《保健食品中绿原酸的测定》（征求意见稿）编制说明一、工作简况根据《国家标准化管理委员会关于下达2023年第二批推荐性国家标准计划及相关标准外文版计划的通知》（国标委发〔2023〕37香豆酸。5-O-咖啡酰奎宁酸（5-CQA）是在奎宁酸和咖啡酸之间形早期的命名编号）。需要强调的是，当前文献出现的术语CGA于指代相关奎宁酸偶联物家族。类似的其他膳食酚类化合物CGAs规则。然而，许多研究人员和化学品供应商继续使用“pre-IUPAC”命名法，并错误地将3-咖啡酰奎宁酸称为绿原酸，这是该化合物家奎宁酸（5-CQA）。首先，必须说明绿原酸这个名称不应仅用于一如上所述，最大的问题是5-CQA和3-CQA的换向。如今，这多数供应商保留了IUPAC之前的命名法，并以3-咖啡酰奎宁酸的2024年1月，开展新修订保健食品中绿原酸测定方法的实验室2024年2月，起草工作组在前期工作二、国家标准编制原则、主要内容及其确定依据(1)流动相调整：A为乙腈，B为0.1%磷酸溶液，梯度洗脱条件实现对绿原酸异构体的良好分离，无叠加干扰，峰型较好，而且通过）：）：三、试验验证的分析线性关系良好。方法准确度和精密度：该方法的回收率在90.8%~105%范围区间，不同剂型6次平行试验结果的RSD%在1.01%~3.50%范围区间，说明该方法精确度较好，能够满足保健食品中绿原四、与国际、国外同类标准技术内容的对比情况国际上有关绿原酸的标准方法有AOACOfficialMethod957.04本研究方法与AOACOfficialMethod957.04和AOACOfficialMethod957.05的样品检测方法不同，采用高效液相色谱法，可对单五、以国际标准为基础的起草情况六、与有关法律、行政法规及相关标准的关系七、重大分歧意见的处理经过和依据八、涉及专利的有关说明九、实施国家标准的要求，以及组织措施、技术措施、过渡期和实施日期的建议建议本标准发布6个月后实施，由归口单位组织行业相关单位十、其他应当说明的事项附件：方法学验证内容保健食品中绿原酸的测定方法学验证内容050绿原酸分离，色谱柱2无法分离绿原酸和隐绿原酸。使用流动相梯度洗脱程序2条件时，色谱柱1和色谱柱2均可以分离。经查询，色谱柱2填料硅胶颗粒表面经极性基团修饰，可以使用(2)流动相A为甲酸(FA)和磷酸(H₃PO₄)体系的比较表3不同A相和梯度条件下多组分绿原酸异构体保留时间(min)绿原酸异构体A相为0.1%H₃PO₄洗A相为0.1%H₃PO₄洗新绿原酸绿原酸隐绿原酸异绿原酸B异绿原酸C地的药典，为磷酸体系，部分多酚或绿原酸(异构体)的地方标准、团体标准或行业标准为甲酸/乙酸体系，原保健食品图1中，红色为0.1%FA色谱图，蓝色为0.1%H₃PO₄色谱图。(3)绿原酸和隐绿原酸分离度图2绿原酸和隐绿原酸的分离效果图2中，蓝色图线为绿原酸单一标准，红色图线为混合标准物质绿原酸与隐绿原酸的有效分别。(4)滤膜对绿原酸类化合物的影响使用尼龙材质0.45μm有机滤膜，发现滤膜对异绿原酸A、B、C均有不同程度的吸附，对绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸无明显吸附。表450μg/mL的标准溶液过膜后浓度(μg/mL)化合物绿原酸隐绿原酸异绿原酸A异绿原酸C过膜后浓度流动相梯度洗脱程序1绿原酸和隐绿原酸分离度更高，A相为0.1%H₃PO₄下绿原酸峰型更佳，灵敏度更高，故最终选取流动相梯度洗脱程序1,使用0.1%H₃PO₄和乙腈作为流动相。化合物线性范围线性方程相关系数绿原酸图5绿原酸校准曲线线性范围，线性方程和相关系数图6绿咖啡提取物色谱图图7金银花提取物色谱图图8金银花茶色谱图(7)绿原酸标准溶液的稳定性对绿原酸标准溶液的稳定性的研究多数在分析方法的开发和方法学验证的文献中有涉及。作者IrinaN.Urakova(IrinaN.Urakova,OlgaN.Pozharitskaya,AlexanderN.Shikov,VeraM.Kosman,ValeryMakarov,ComparisonofhighperformanceTseparationandquantificationofchlorogenicacidingrextracts,J.Sep.Sci.,Volume31,Issue2,237-241,2/10.1002/jssc.200700472)提到，在采用HPLC法定量分析绿咖啡豆提取物中绿原酸的含量时，绿原酸储备液和工作液在4℃条件下保存时，一周内稳定，无分解。本工作组将浓度为50μg/mL工作液在4℃存放20天后测定，浓度降低小于10%。2、特异性在空白溶剂和空白辅料干扰性试验中，选择空白溶剂，软胶囊、结果显示绿原酸保留时间为9.353,空白溶剂及各剂型的空白辅料均不干扰绿原酸峰的测定。见图9-15。图9绿原酸标准溶液图11空白辅料(软胶囊)图12空白辅料(口服液)图13空白辅料(硬糖)图14空白辅料(硬胶囊)剂型试样称量(g)加入绿原酸(200μg/mL)体积(uL)定量限(mg/kg)片剂硬胶囊软胶囊口服液硬质糖果剂型片剂软胶囊口服液硬质糖果检出限(mg/kg)33333>0.999）。12345样品名称本底值添加水平mg/kg标曲查得浓度μg/mL(%)率(%)相对标准偏差RSD%软胶囊未检出50500饮料/口服液未检出50500硬糖未检出50500酒剂未检出500醋未检出50500样品编号绿原酸含量（m