化学发光之临床应用课件

PartII.化学发光法的临床应用甲状腺功能的免疫分析糖代谢紊乱的免疫分析常见肿瘤标志物及其免疫分析常见传染性疾病的免疫检测病毒性肝炎HIV感染严重急性呼吸综合征（SARS)其他免疫检测项目甲状腺功能的免疫分析甲状腺机能的常见评价指标及其临床意义1.甲状腺机能亢进

2.甲状腺功能减退

一、甲状腺机能亢进

1972年提出T3型甲亢的诊断标准：

1.甲亢的症状和体征，常无突眼征，但心血管症状较明显；

2.血清TT4、FT4值正常；

3.TT3、FT3值升高；

T3型甲亢在临床上并非罕见，特别是缺碘地区患功能自主性腺瘤的部分患者，或用T3治疗后出现的碘甲亢，目前认为T3型甲亢不能算作一种独立疾病，因为发现T3型甲亢病人中有一部分虽然TT3升高但FT3正常或低于正常，因此改称高T3综合征为妥。

T4型甲亢，即T4毒症患者血清T3、FT3浓度正常；而T4、FT4浓度升高。TSH值为正常低值或低于正常，并伴甲亢临床症状。二、甲状腺功能减退甲减为甲状腺激素分泌不足引起的代谢性疾病。临床上分为原发性甲减，以及继发性甲减，又称垂体-下丘脑甲减两类。血循环中甲状腺激素浓度的测定在诊断甲减方面，TSH和FT3、FT4是灵敏的诊断指标，明显优于总甲状腺激素，如TT3、TT4等。其价值依次为TSH=FT4>TT4>FT3>TT3.

三、低T3综合征

低T3综合征是一种由于非甲状腺疾病造成的甲状腺激素异常，其发生与机体的代谢状态，基础疾病的性质和严重程度以及外来因素，如用药等有关。代谢状态差、基础病情加重时其发生率随之增高；当病情好转、机体健康状况趋于正常时，低T3状态可自行消失。四、其他甲状腺疾病有关的免疫学指标抗甲状腺球蛋白抗体（TGAb）多见于桥本氏甲状腺炎、自身免疫性甲状腺疾病、原发性甲状腺功能减退、甲状腺功能亢进患者等。抗甲状腺微粒体抗体（TMAb）多见于桥本氏甲状腺炎、自身免疫性甲状腺疾病、原发性甲状腺功能亢进、原发性甲状腺功能减退。小结综上所述，若对甲状腺功能指标进行全面评价，则上述

各项指标对甲亢的诊断价值依次为FT3>FT4>TT3>TT4；

各项指标对甲减的诊断价值依次为FT4=TSH>TT4>FT3>TT3ACS180SE特点：分析速度快二、糖尿病的免疫学检测以下是临床上常见的有关糖代谢紊乱的免疫分析指标：

1.C肽

2.胰岛素

3.胰岛素抗体

4.谷氨酸脱羧酶抗体（GAD-Ab）

5.胰高血糖素常见肿瘤标志物及其检测胚胎性肿瘤标志物含糖物质类标志物酶类标志物激素类标志物胚胎性肿瘤标志物这类肿瘤标志物是指那些原本只能在胎盘期出现，但在机体发生肿瘤时，其基因表达被再度激活，从而重新再成年个体出现的蛋白，其常见的检测标志如右图所示：标志名称生化本质相关肿瘤的组织细胞来源甲胎蛋白糖蛋白肝细胞、胚细胞癌胚铁蛋白糖蛋白肝癌胚抗原糖蛋白结肠、直肠、胰腺、肺、乳腺胰癌胚抗原糖蛋白胰腺鳞状细胞抗原糖蛋白肺、皮肤、头和颈部组织多肽抗原细胞角蛋白乳腺、结肠AFP原发性肝癌：AFP作为原发性肝癌重要指标之一，特异性强，灵敏度高。因此AFP为十分有价值的临床检查及普查项目，阳性率达90%。血清含量大于400μg/L作为原发性肝癌的诊断阈值。孕妇血清AFP与胎儿状态当胎儿患低氧症、宫内死亡、遗传缺陷、先天性神经管畸形、无脑儿、脊柱裂等，母体血清AFP异常增高。其他肿瘤有报道指出，68%-92%卵黄囊肿瘤患者血清AFP上升CEA原发性结肠癌患者CEA升高者占45-90%.胰腺癌、胆管癌、胃癌、食道癌、肺癌、乳腺癌和泌尿系肿瘤，阳性率50-70%。结肠癌患者手术切除后1-3周内血中CEA水平可降至正常水平。如术后CEA持续阳性，说明手术切除不完全或癌肿发生转移，提示病人预后较差或者有复发的可能。良性肿瘤、炎症和退行性疾病，如结肠息肉、溃疡性结肠炎、胰腺炎和酒精性肝硬变病人CEA也有部分升高，但远远低于恶性肿瘤，一般小于20μg/L.所以测定CEA可作为良性与恶性肿瘤的鉴别诊断依据。吸烟也可能导致CEA升高。含糖物质类标志物CA125是上皮性卵巢癌和子宫内膜癌的标志物CA153存在于多种腺癌内，如乳腺癌、肺癌、肺胰癌及卵巢癌等，是检测乳腺癌比较重要的抗原CA199通常作为胰腺癌和结、直肠癌的标志物CA50通常是胰腺和结、直肠癌的标志物CA72-4其检测结果与CEA有互补作用，可用于检测原发性乳癌、胃癌、直结肠癌以及卵巢癌患者残余肿瘤细胞，可与CA-125联合用于卵巢肿瘤的诊断及复发检测，可与CA-199联合应用于胃癌的诊断以提高阳性率，也可用于胃癌术后监测早期复发。CA242可用于胃肠道恶性肿瘤病人的治疗监控和复发检测。酶类标志物前列腺特异性抗原（PSA）是前列腺癌的特异性标志物，也是目前少数几个器官特异性肿瘤标志物之一。前列腺癌是男性泌尿系统的主要囊性肿瘤，血清PSA定量测定的阳性临界值大于10μg/L,此时前列腺癌的诊断特异性达90-97%。神经元特异性烯醇化酶（NSE）对小细胞肺癌的诊断，鉴别诊断、病情判断及疗效的估计都有实际的意义。激素类标志物降钙素：（1）甲状腺髓样癌此种癌起源于甲状腺滤泡旁细胞，可产生多种生物活性物质，其中以降钙素为主，患者血清降钙素水平高于正常数十到数百倍。（2）肺小细胞癌人绒毛膜促性腺激素（HCG）

HCG测定对葡萄胎、绒癌的诊断和化疗后的疗效观察，以及葡萄胎终止后的随访有重大意义，一般而言，良性葡萄胎、恶性葡萄胎、绒癌治疗前HCG均增高，其升高顺序为：绒癌>恶性葡萄胎>良性葡萄胎。贝克曼Acess2主要用于激素类物质的检测。常见传染性疾病的免疫检测病毒性肝炎HIV感染及艾滋病（AIDS）严重急性呼吸综合征乙肝标志物定量检测

.检测方法：乙肝五项定量检测目前最先进的是化学发光法，避免了假阴性和漏检的问题，而且准确，尤其对乙肝病人的疗效观察提供了依据，这是检验发展的趋势。

乙肝五项独特优点：一、对于乙肝患者而言：1、通过定量检测乙肝标志物，直观地显示体内五项指标的具体情况，不再是简单的“阴性”和“阳性”，有利于动态观察病情，为选择治疗方案提供重要依据；2、定量检测方法更灵敏，能测出低水平复制的样本，特别是“窗口期”的感染者，3、定量检测的测定范围更宽，定性检测时候，高浓度的乙肝表面抗原样本需要稀释，否则会有假阴性出现，但是，定量检测能有效检出高浓度的乙肝表面抗原样本。

二、对正常体检者而言：可反映HBV-抗体的浓度变化，有利于对机体免疫状况进行评估，对注射乙肝疫苗有指导意义。雅培i2000优势是检测病毒系列，包括乙肝病毒检测，堪称业界标准几种常见的乙肝模式HBsAgHBsAbHBeAgHBeAbHBcAb临床意义1+-+-+急性期、慢性期、有较强传染性，俗称“大三阳”2+---+急性或慢性期，传染性较强3+--++恢复期，传染性弱，长期持续易癌变，俗称“小三阳”4-+--+既往感染。仍有免疫力，非典型恢复期5---++既往感染，急性乙型肝炎恢复期，基本无产燃性（少数仍有传染性）6----+急性窗口期，既往过后康复期7-+---注射乙肝疫苗后，乙肝感染后已康复，有免疫力8-+-++急性感染期后康复期，既往感染，具有免疫力9-----未感染过乙肝其他检测项目临床常见药物的浓度检测1.强心类药：西地兰、地高辛、洋地黄毒等；2.抗癫痫药：苯妥英、苯巴比妥、酰胺咪嗪、乙琥胺等；3.三环类抗抑郁药：丙咪嗪、去甲丙咪嗪、去甲替林、阿米替林、多虑平等；4.茶碱类：氨茶碱；

5.氨基糖苷类抗生素：链霉素、庆大霉素、卡那霉素、丁胺卡那霉素；肾上腺激素：儿茶酚胺类激素等性激素测定：促黄体生成素、卵泡刺激素、垂体泌乳素、睾酮、孕酮、雌二醇。内分泌免疫分析：腺垂体激素、生长激素、促肾上腺皮质激素等。

PartⅢ.化学发光免疫检测的特点

免疫学技术的迅速发展对精密度的要求越来越高，一般的酶免技术已逐渐无法适应形势需求。发光免疫技术30年以来得到快速发展，国际上已实现商品化，可以分为化学发光、电化学发光等。敏感度高，甚至超过RIA精密度和准确性均可与RIA相比试剂稳定，无毒害测定耗时短发展成自动化系统化学发光免疫分析的发展(1)常见发光体系的不断完善,以及发光增强剂的研究;(2)基因工程抗原、抗体的制备及广泛应用促进了化学发光免疫分析方法的发展;(3)化学发光与其它方法联用,提高化学发光免疫分析的速度以及灵敏度,拓宽化学发光体系的应用范围。多组份同时检测的化学发光分析检测目前在利用化学发光免疫反应进行在多组份同时检测方面已有很多报道。多样品同时检测不但节约试剂、样品,同时还节省时间,将是未来发展的趋势。Fu等建立了基于磁颗粒的多组分免疫分析方法(Multianalyteimmunoassay,M