绿叶中色素的提取与分离

绿叶中的色素提取和分离

托克逊县第二中学木尼热古丽·依比热依木预习导学

（1）原理：

①提取:叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂________

（或丙酮）中，所以用________,________叶绿体中的色素。

②分离:不同的色素在

中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得

,溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得

，因而可用层析液将不同色素

。

无水乙醇的用途是___________________________层析液的的用途是__________________；二氧化硅的作用是______________；碳酸钙的作用是_____________________________；教学目标1．知识目标（1）初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法、了解纸层析法的原理。（2）通过实验结果分析，理解各药剂在实验中的作用和对实验结果的影响，探索叶绿体中有几种色素，观察和区别叶绿体中色素的种类及颜色。实验重点与难点

重点：初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法、探索叶绿体中色素在滤纸上层析的情况。难点：分离叶绿体色素中滤液细线的画法。课前准备

实验材料、用具：

新鲜的菠菜，干燥的定性滤纸、烧杯、研钵、漏斗、毛细吸管、试管、棉塞、试管架、剪刀、纱布、天平，培养皿、蘸笔，直尺、棉，铅笔、无水乙醇、层析液(95%酒精)、二氧化硅、奶茶杯盖，碳酸钙，牙签。方法步骤：

1．提取色素：称取、剪碎、研磨、过滤（1）称取5g的绿叶，剪碎，放入研钵中。（2）向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙，再加入10ml无水乙醇或丙酮，进行迅速、充分的研磨。（3）将研磨液迅速倒入小玻璃漏斗（漏斗基部放少许脱脂棉）。将滤液收集到一个小试管中，及时用棉塞将试管口塞紧。2．制备滤纸条：将干燥的定性滤纸剪成长条形，滤纸条的一端剪去两角做标记，并在距这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。3．画滤液细线：用毛细管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画一条细而直的滤液细线。待滤液干后，再画一两次。4．分离色素：将3ml层析液倒入烧杯，将滤纸条（有滤液细线的一端朝下）轻轻插入层析液中，随后用培养皿盖上小烧杯。5．观察实验结果：观察烧杯内滤纸条上出现了几条色素带，以及每条色素带的颜色。将观察结果记录下来。七、实验改进1.实验试剂的改进人教版课本层析液（由20份在60～90摄氏度下分馏出来的石油醚、2份丙酮和1份苯混合而成），本实验中把层析液换成95%乙醇，95%乙醇对人的危害性弱一点。2·实验步骤的创新第一步：取一圆形定性滤纸，靠近中间部位打一小孔（用牙签较好如图一）放在小培养皿上第二步：用毛细吸管吸取提取出的色素滤液，点样在小孔边缘，待滤液干后重复2次。第三步：自制棉花线，待滤纸上滤液干后从背面穿入（如图2）第四步：将少许层析液倒入小培养皿中，棉花线浸入，开始层析，层析中的滤纸既是跑道,又相当于培养皿的盖子，可减少层析液的挥发。一分钟之后就会出现4个非常漂亮的同心圆，由外到内依次是橙黄色、黄色、蓝绿色、黄绿色。结果清晰且省时省力。实验的改进和创新

图一图二改进二：画滤液细线课本要求用细毛细管画滤液线，但由于学生的操作水平，而造成划线不是很细很均匀，造成滤液细线上的浓度不一，从而影响色带形状：高处形成一个峰，低处形成带谷。其主要原因是滤液细线上的浓度不一，浓度大处，色素溶解慢，随层析液上升一段距离后再分离，色素分离晚，形成带峰；浓度低处分离早，形成带谷。有的同学提出用蘸笔来画。操作步骤：用蘸笔蘸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画出一条细而直的滤液细线。待干燥后，再画两三次。优点：工具易得，操作简单，效果好。改进三：色素分离装置有的同学按照课本上的装置用烧杯和培养皿分离色素，得到的色素带不整齐，同学们认为这是因为滤纸条有些地方紧贴烧杯壁，有些地方远离烧杯壁，从而影响了色素的扩散速度造成的；有的同学按照课本上的装置用试管分离色素，得到的色素带不清晰，不明显，甚至不出现色素带，同学们觉得这和试管中层析液的量有关系，如果层析液少了，分离效果不好，得到的色素带不清晰，不明显，若层析液多了，会触及滤液线，溶解色素，不会分离出色素带。用试管不好控制层析液的量，所以同学们用废弃的豆浆杯盖自制烧杯盖，可将滤纸条插入盖上的切口，滤纸条就不会和烧杯壁接触，用烧杯也好控制层析液的量，这样很好的避免了色素带不清晰，不明显，甚至不出现的现象。实验装置如右图所示操作步骤：1、将画好滤液线的滤纸条插入烧杯盖切口处。2、将适量层析液倒入烧杯中，用插有有滤纸条的烧杯盖盖严烧杯口。3、色素分离后，及时将滤纸条取出，待滤纸条干燥后进行观察。

实验结果分析1.第二组和第三组对照第一组总结一下自己组对实验步骤的改进有什么优点2.

(1)第四组处理，纸层析的结果是

,原因是

。

(2)第五组处理，纸层析的结果是

,原因是

。

(3)第六组处理，纸层析的结果是

,原因是

。

处理四组五组六组SiO2(少量)+-+CaCO3(少量)++-无水乙醇(10mL)-++蒸馏水(10mL)+--

1．在圆滤纸的中央，点上叶绿体色素的提取液进行层析，随着层析液从滤纸中央向四周扩散，形成四个色素带，排在最里面的色素是（

）A．叶黄素B．胡萝卜素C．叶绿素aD．叶绿素b2．某位同学在做叶绿体色素的提取分离实验时，操作情况如下所述，结果实验失败，请指出其错误所在：（1）将5克菠菜叶完整放入研钵中，加入无水乙醇、二氧化硅、CaCO