U-3000使用说明书之五

PAGE——第3页共47页——U-3000液相色谱使用手册之五Chromeleon6.80中文版数据处理和报告打印输出2008..戴安中国有限公司.服务热线术中心电话传真)市场培训电话传真)网址:

目录TOC\o"1-4"\f\h\z五数据处理和结果报告打印输出 35.1处理数据 35.1.1进入需要处理数据的序列 35.1.2定量方法的设定和优化 4综合设置“Genernal” 5“检测Detection”积分参数设定 7峰表（PeakTable） 9定量表（AmountTable） 13校正（Calibration） 16其它各项 17保存 175.1.3外标法（多点线性校准）举例 175.1.4内标法举例 225.2打印报告 255.2.1入打印报告界面 255.2.2基本谱图和数据积分报告（Integration） 265.2.3单标的校正曲线Calibrationcurrentpeak 315.2.4混标的校正曲线CalibrationBatch 325.2.5峰分析 325.2.6统计表Summary 335.2.7跟踪报告AuditTrail 345.2.8谱图的重叠Overlayprint 35进入界面 35加入要叠加的谱图 35叠加选项 37重叠效果图 385.2.9个性化的报告模板（属于高级培训内容） 385.3三数据的备份（导出）和还原（导入） 425.3.1将软件中的文件夹或样品序列备份 42选中需备份的样品序列或文件夹 42进入备份界面 42保存路径 43备份选项 44保存 445.3.2文件夹或样品序列备份的还原 445.3.3将报告备份成：ExcelHTMLTEXT等格式。 45进入“另存为”菜单 45选择路径和命名 46数据处理和报告打印输出五数据处理和报告打印输出5.1处理数据5.1.1进入需要处理数据的序列点击控制面板上的“Browser”浏览器。进入需要处理数据的样品序列如“测试样品”。5.1.2定量方法的设定和优化上图中点击右上方方框中的方法文件“测试方法.qnt”进入测试样品的定量方法，一般采用标准品的色谱图，如测试样品1，其底部（类同菜单栏）从左边起对“综合（Genernal）”，检测，峰表，数量表，校准等一一进行设定和优化，最终建立完成一个定量方法并自动用于未知样品结果的计算。综合设置“Genernal”a.最终结果含量的单位在最终结果含量的单位即“数量的量纲”后面输入最后计算出来结果的单位，液体样品一般为浓度单位mg/l或mg/kg，固体样品一般为百分含量%。b.扣空白设置如果需要扣空白，则选中上图中“空白运行和基体空白扣除”选项，例如要扣除一固定样品，点击浏览“Browser…”,在跳出的窗口中选中空白样后，按“打开”，软件将会自动扣除空白。同样的方法可以扣除溶剂空白。c.综合校正设定举例：如上图“测试样品”系列中有三个测试标样，选全部即用这三个标样的平均峰面积与其进样量算出校准因子，用于未知样品的结果计算。当样品系列中标准品和样品交叉进样如下图所示，那么选分组即STD1,STD2与测试样品1和测试样品2为一组，用STD1,STD2的平均峰面积计算出校准因子用于测试样品1和测试样品2的结果计算，以此类推；若选附加则就样品3和样品4而言，就可以用STD1,STD2，STD3和STD4的平均峰面积来作校准；选夹层意味着用STD1,STD2，STD3，STD4的平均峰面积对样品1和样品2作校准，以STD3,STD4，STD5，STD6的平均峰面积对样品3和样品4作校准。根据需要任意选用。“检测Detection”积分参数设定积分参数的设定是一个时间-事件表，如在0.000分钟时最小面积删除设定0.05，意味着只有比设定参数0.05大的峰才积分。请仔细观察下图中发生的时间-事件，并参阅a-g的解说：.1设定最小峰面积最小峰面积（MinimumArea）：设定最小峰面积，一般设置0.01~1.0之间。低于设定值的将不会积分。.2谷到谷（ValleyToValleyOn）：设置从峰谷到峰谷的积分。.3设定不积分时间段禁止积分开始（InhibitIntegrationOn）：设定不积分时间段从什么时候开始。禁止积分结束（InhibitIntegrationOff）：设定不积分时间段从什么时候结束分。（ON和OFF是成对使用的。）.4骑峰阈值RiderThreshold：骑肩峰阈值。设定100%，两分不开的峰垂直分开单独积分。.5最大骑峰比如图中2#和3#峰的峰高有一定比值，设定最大骑峰比小于该值，如10%，两分不开的峰垂直分开单独积分；如果设定最大骑峰比大于该值，如20%，两分不开的峰就以幂方式斜线积分。.6峰开头灵敏度因子FrontingsensitivityFactory：峰开头灵敏度因子，一般设为2~4为宜，该值设越小越靠近峰。.7峰结尾灵敏度因子TailingsensitivityFactory：峰结尾灵敏度因子，一般设为2~4为宜，该值设越小越靠近峰。请看下图最后一个峰，因为f和g项峰开头灵敏度因子设1太小，峰结尾灵敏度因子设7太大，积分就有问题了。峰表（PeakTable）点击峰表，在下图的图下方处点击右键，弹出下拉菜单，从中选择“自动生成峰表”。在弹出的自动生成峰表框中，紫外/可见检测器只能选“列举当前色谱峰”，必须人工输入组分名称；二极管阵列检测器可以选择“使用光谱库筛选结果”，软件会自动从你所建的光谱库中找到匹配的组分名称。点击“确定”弹出警告框，再点击警告框中“确定”，软件会根据标准样色谱图中各组分的信息自动生成新的组分表覆盖原来的峰表上图表中各列解释a.标样峰名称在峰名称列中输入标样组分的名字，如a,b,c,d,e。b.保留时间保留时间列中各组分的保留时间是根据标准样色谱图中组分自动生成的。c.保留时间的正负范围窗口窗口列中是自动生成的保留时间允许的正负范围。在序列样品分析过程中如果保留时间偏移过多，软件会不识别样品中该组分，此时可以适当增大该值的设定。d.定量用标准方法第四列为定量用标准方法的选择，双击标准下小格，弹出“标准方法”小框，一般选外标法（External），如果选内标法，必须要指定内标物峰并选定它作为内标峰。e.积分类型第五列为积分类型，双击积分类型下小格，在弹出框中可选择，一般以面积来定量（Area）。.f.校正类型第六列为校正类型，双击校正类型下小格，在弹出的校正类型框中有多种选择。多点线性校正法：校正类型为Loff,只要选线性方程，如下图所示：单点校正法：校正类型为Lin，选“线性方程”，还要选“强制函数通过零点”其它项设置都不用改动。定量表（AmountTable）a.编辑标准品浓度列（EditAmountColumn）在表格的下方任何一位置点右键，选中“列Column”在下拉菜单中选“编辑数量列EditAmountColumn”,如下图：将会跳出如下窗口：b.显示标准样品名称在上面编辑数量列图中的“分配标准按”后面的下拉菜单中选择“名称Name”如下图的右边框中将会显示有几个标样，就是样品序列表中测定完成的标准样c.自动编辑标样浓度列上图中点击左边方框下的自动生成“AutoGenerate..”：a)做多点线性校正做多点线性校正的话就选择“为每个标准生成一个单独的数量列”表明要生成多个不同的列以便输入标样的不同浓度值。b)做单标定量做单标定量的话选择“为全部标准生成一个单一数量列”，表明只需生成一个列以便输入单一标样的浓度值。点击“应用Apply”，弹出下图：d.输入标样的浓度在“数量”“Amount”列中可对混合标准样中各组分输入各自相对应的标样的浓度。比如配制的b标样分别为1.0000；2.0000;3.0000mg/ml浓度（或液体mg/l）,则一一输入即可。）e.响应因子如果某标准品的纯度为98%,在响应因子下可为其输入0.98，也可输入生物效价等；另外结果计算公式中的系数如百分含量乘100%；mg/L乘1000；甚至药物分析用到的标示量等都可以输入其中。校正（Calibration）如果有一个浓度点误差较大（偏离直线较远），不想让它参与校正。比如说第一个点不想要，单击第一行左侧小格，在弹出框中点击“确定”则对应的“√”去掉了，校正注译下显示“被禁用”，表示该点不参与校正，在右边校正曲线上会显示一个红色的梅花点。其它各项其它各项略。保存保存刚才经优化建立的定量方法。5.1.3外标法（多点线性校准）举例以6种混合色素分析为例，打开030814色素序列，双击序列表中的sd1,打开色谱图。在峰表界面（下图）双击标准下小格，在弹出框中选“外标”双击“校正类型”下小格，因为举例做多点校正，在弹出框中选“线性方程”的“LOff”，如下图所示：在表格的下方任何一位置点右键，选中“列Column”在下拉菜单中选“编辑数量列EditAmountColumn”,在弹出框中“分配标准按”的右边下拉菜单中选“名称”注意：在样品序列表中的标准品必须有编号，如sd1,sd2,sd3点击左边方框下的“自动生成AutoGenerate..”如下图：做多点线性校正就选择“为每个标准生成一个单独的数量列”，现在有3个浓度点，生成三个列以便输入标样的不同浓度值。在三个“数量Amount”列中可对混合标准样中各组分输入各自相对应的不同浓度值。比如配制的柠檬黄，苋菜红-标样分别都为；0.0002;0.0004;0.0006mg/l(固体用mg/ml浓度),则一一输入即可。输入完毕，软件会自动校正，在上图中我们可以查看各组分的校正曲线，如鼠标点击在色谱图的第一个柠檬黄色谱峰上，相对应的下部峰表中显示第一行柠檬黄的信息，而右边即是柠檬黄的标准曲线。最后点击工具栏中的“Save”保存完整的外标校正方法，当你分析完待测样品，软件立即以此校正曲线自动计算出未知样品中各组分的分析结果。（待测样品的样品称重量，稀释因子（定容体积）可以在样品序列的各待测样品行中输入。因为饮料是液体样品，不必输入样品称重及稀释因子。）5.1.4内标法举例内标法：必须要指定内标物峰并选定它作为内标峰。如下图中双击a组分标准列下小格，在弹出框中选“使用此峰作为内标物（ISTD）”点击“确定”。在弹出的“标准方法”小框下方，内标选择下“√”意味着在待测样品和标准样品中所加的内标量相同。接着双击待测组分如a,b,c组分的标准列下小格，在弹出框中选内标，并在右边“相关联ISTD峰”下选上a作为内标。为方便内标方法操作，可以先配好一定浓度的内标物，吸同样体积量的内标一一加入样品序列中所有的对照品和样品瓶中，例如最终内标物浓度都为2.0000mg/ml。对照品的内标浓度必须在数量表（AmountTable）中输入，如下图中的a是内标物，无论是做单点校正还是多点校正，所有a都输入2.0000mg/ml浓度。看下图右边相对应的内标物a的标准曲线，只是一个点。在b,c,d标准品的数量列下一一输入其相应的浓度，右边会显示以a内标自动算出的b,c,d的校正曲线。见下图：*如果待测样品中内标量与标准品中不相同，可以在样品序列表中样品行的内标量列下输入。在重量列下输入该样品的称重量如5mg，10mg，在稀释因子列下输入定容体积如10ml.（见下图）如上所述，既在数量表（AmountTable）中输入了对照品及内标物的浓度，又在样品序列表中输入了待测样品的样品重量，稀释因子（倍数），同时又输入了待测样品中的内标浓度，那么变色龙色谱软件会自动以内标法计算出b,c,d的校正曲线，当待测样品分析完成，自动计算出各组分的最终结果，可以是百分含量或mg/l表示.5.2打印报告点击工具栏中的“打印PrinterLayout”.5.2.1入打印报告界面进入需要打印的界面：类似于Excel电子表格，分好几页显示，可以打印基本谱图和数据的报告；校准曲线报告；峰分析报告—包括分离度，不对称性和塔板数等；统计表—结果的平均值和RSD;审计记录报告和叠加谱图打印等。5.2.2基本谱图和数据积分报告（Integration）第一页为基本谱图和数据报告（Integration），一般需要打印。若报告模板需要修改和优化，需先将其转变成改写模式（LayoutMode）.改写模式如下图所示，会有许多小红三角出现：1）报告头上可以输入单位名称如上海CDC2）谱图区域的优化：双击谱图区域或点击右键在下拉菜单中选择“色谱属性（修饰）”弹出下面色谱修饰框峰标识（PeakLabel）菜单：峰名称标示的状态设置，如不要峰号时，可以把peaknumber删除；标识峰名的角度等。时间量程（TimeScale）：横坐标（保留时间）的设置。信号量程（SignalScale）：纵坐标（紫外吸收值）的设置。标题（Caption）：谱图上方左中右三个位置的显示内容的设置。叠加（Overlay）：需要重叠的谱图的选择。比较（Comparison）：重叠后谱图显示的选项设置。详细内容在此不一一讲述。通过上述设置和优化，可以得到一张漂亮谱图的报告格式。3）峰结果表的设置和优化如下图峰表中有峰名称，高度，面积，相对面积，数量%列等。a).选择要打印的组分：拉黑峰名称列，点击右键，在下拉菜单中选报告列属性。在弹出的“积分报告属性”中可以选包括还是不包括未识别的峰。b)改变报告列内容：如双击报告表中的“类型”列，弹出“属性报告列”框，在弹出框中“峰结果”右边选连接的变量，可以选你所要的“理论塔板数”“分离度”“不对称性”等，也可以选信/噪比。通过修改可以得到你所要求的满意的结果报告内容。同样的方法也可以在报告中显示信/噪比。c)如要使结果乘100%，只要在下面框图中数量（结果）下公式右边的peakamount后面输上*100即可;。峰面积单位是mau*分钟，也可以乘1000以uau*分钟表示。d)保存修改后报告模板：报告模板修改完成后，在“编辑”菜单下再次选择“LayoutMode”，即取消改写模式，以防止模板被无意的修改。要保存修改后报告模板，可点击鼠标右键，在下拉菜单中选择“保存报告模板SaveReportDefinition….”即把该报告模板另存为到报告格式文件夹中。5.2.3单标的校正曲线Calibrationcurrentpeak第二页为：单标的校正曲线（Calibrationcurrentpeak）,显示的有标准曲线图、相关系数（Corr….）、截距(offset)、斜率(slope)、相对标准偏差(RSD)。5.2.4混标的校正曲线CalibrationBatch第三页为：混标的校正曲线（CalibrationBatch）如有a,b,c,d四个标准物，可以按右键选下拉菜单中校准图属性，在弹出框中一一选上峰名，可以把4个标准曲线打印在一张图中。5.2.5峰分析第四页为峰的分析。包括：基线噪音（Noise）、分离度（Resol.）、对称性（Asym.）、理论塔板数（Plates）等。5.2.6统计表Summary第五页为：统计表（Summary）.一般都需要打印。可以先在样品序列表中选中如三个标准样品，点击右键，在下拉菜单中选“比较”。此时统计表中显示有三个标准样品的平均值和RSD.5.2.7跟踪报告AuditTrail第六页为：跟踪报告（AuditTrail）。显示分析整个样品序列过程中系统参数的变化。5.2.8谱图的重叠Overlayprint第七页为谱图的重叠（Overlayprint）进入界面双击中间的谱图区域，弹出“色谱修饰”框：加入要叠加的谱图点击菜单上的“叠加Overlay”.点下方的“添加Add…”将要叠加的谱图一一加进来。比如要加入第二，三个标样的紫外图进行叠加，点击“确定”。如下图，已将第二,三个标样加进来了。同样的道理可将其它要叠加的紫外谱图加进来。叠加选项点击菜单栏中的比较选项“Comparison”.如下图：将“偏移量Offset”下面的两个勾都去掉。然后点击“确定”，如下图已显示完全重叠的谱图。重叠效果图如果把排列方式选为“堆栈”模式，显示如下谱图5.2.9个性化的报告模板（属于高级培训内容）您可以根据自己的需要编制报告头；在一张色谱报告中可编辑打印如下内容：把标准图谱和样品图谱左右并列打印；所有对照品分析结果的统计表（Summary）；同一样品多次进样分析，可对其各个组分分别打印分析结果，包括其平均值和RSD；趋势图等等。1插入一个新的工作表（个性化结果报告）在报告格式页点击“编辑”选中“插入工作表”，如下图所示，在弹出“插入工作表”小框中输入您要编的新工作表名称，如“样品1”2．在样品1空白Excel表格中，您可以根据需要写入报告头内容3．编辑色谱图；光谱图；趋势图；报告表等编辑色谱图；光谱图；趋势图；报告表等，必须与变色龙软件联接，点击“编辑”选中“插入”，在右边显示一排下拉菜单，包括色谱；校准图；光谱图；趋势图；Chromeleon报告表等。4．举例插入色谱报告：在上图选中Chromeleon报告表，弹出下图“插入报告表格”如果选编色谱峰的积分报告，您可以在其右边随意选择报告表的列内容。依次类推，可以把校准图；光谱图；趋势图等一一加上去。5．加入统计表例如要加入三个标准品的统计表，可以在样品序列表中先选好这三个STD做比较，在报告页