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文档简介
判断以下说法是否正确:1.(2011·江苏卷,19·C)将丝状物溶解在2mol/LNaCl溶液中,参加二苯胺试剂即呈蓝色()2.(2011·广东理综卷,5·A)洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂()3.DNA溶解度随NaCl溶液浓度的下降而下降()4.玫瑰精油可用蒸馏法和压榨法来提取()×√××一、DNA的粗提取与鉴定1.提取原理DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中 不同,在浓度为 时DNA的溶解度最小;此外DNA不溶于 ,但是细胞中的某些蛋白质那么可溶于酒精。2.DNA的鉴定:在沸水浴的条件下,DNA遇 会被染成蓝色。溶解度0.14mol/L酒精二苯胺二、RCR技术1.PCR原理:在一定的缓冲溶液中提供 ,分别与两条模板链相结合的两种引物,四种脱氧核苷酸,耐热的 ,同时控制温度使DNA复制在体外反复进行。2.PCR的反响过程(1)变性:90℃以上时,双链DNA解旋为 。(2)复性:温度下降到 左右,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。(3)延伸:温度上升到 左右,溶液中四种脱氧核苷酸在 的作用下,根据碱基互补配对原那么合成新的DNA链。DNA模块DNA聚合酶55℃72℃DNA聚合酶单链1.PCR扩增需要解旋酶吗?需要哪种酶?提示:不需要解旋酶,是通过水浴加热90℃,使双链DNA解旋;需要热稳定DNA聚合酶。三、血红蛋白的提取和别离1.凝胶色谱法:也称 ,是根据相对分子质量的大小别离蛋白质的有效方法。2.电泳(1)概念:电泳是指 在电场的作用下发生迁移的过程。(2)特点:电泳利用待别离样品中各种分子的差异以及分子本身的大小、的不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的别离。分配色谱法带电粒子带电性质形状2.用猪与鸡的血液提取血红蛋白哪个效果好?提示:用猪的血液;因为猪的红细胞无细胞核,结构简单,血红蛋白含量丰富,便于提取血红蛋白。四、植物芳香油的提取1.玫瑰精油的提取(1)原理:利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出,形成油水混合物,冷却后,混合物又会重新分出油层和水层。(2)方法:
。(3)实验流程:鲜玫瑰花+清水→水蒸气蒸馏→油水混合物蒸馏法2.橘皮精油的提取(1)原理:利用
榨出芳香油等。(2)实验流程:
→漂洗→压榨→过滤→静置→
→橘皮油。压榨法石灰水浸泡再次过滤五、胡萝卜素的提取1.胡萝卜素性质:不溶于
,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机溶剂。2.实验设计(1)原理:
法。(2)实验流程:胡萝卜→粉碎→
→
→
→浓缩→胡萝卜素。3.鉴定方法:
法。水枯燥萃取过滤纸层析萃取3.胡萝卜素的最主要成分是什么?它有什么用途?提示:胡萝卜素中β-胡萝卜素是最主要的成分,可以用来:①治疗因缺乏维生素A而引起的疾病;②优质食用色素、饲料、饮料、食品的添加剂;③抗癌、治癌。1.PCR反响过程(1)变性:当温度上升到90℃以上时,双链DNA解聚为单链,如以下图:(2)复性:系统温度下降至50℃左右时,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合,如以下图:(3)延伸:当温度上升至72℃左右,溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原那么合成新的DNA链,如以下图:2.结果(1)PCR一般要经历三十屡次循环,每次循环都包括变性、复性、延伸三步。(2)两个引物之间的固定长度的DNA序列呈指数扩增。1.PCR利用了DNA热变性的原理,PCR仪实际上也是一种能自动调控温度的仪器。对PCR过程中“温度的控制〞的以下说法错误的选项是()A.酶促反响需要高的温度,是为了确保模板的单链B.延伸的温度必须大于复性温度,而小于变性温度C.DNA聚合酶不能热变性,要用耐高温的聚合酶D.DNA解旋酶不能热变性,为了确保模板是单链解析:PCR是一种体外DNA扩增技术。DNA双链的解开不需要解旋酶,靠高温使其变性,双螺旋结构解体,双链分开;复性前,在耐高温的DNA聚合酶的作用下根据碱基互补配对原那么合成新的DNA,因此延伸的温度要大于复性温度,小于变性温度。答案:D1.DNA的粗提取与血红蛋白的提取的比较提取物质DNA血红蛋白提取方法盐析法凝胶色谱法、电泳法提取原理①DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同②DNA不溶于酒精,但某些蛋白质则溶于酒精①根据相对分子质量的大小②各种分子带电性质的差异步骤①溶解在2mol/L的NaCl溶液中②加水稀释至0.14moI/LNaCl溶液使DNA析出过滤③加入冷却酒精析出①样品处理②粗提取③纯化④纯度鉴定2.DNA的鉴定加入物质结果图示实验组均加入:①4mL二苯胺试剂②2mol/LNaCl溶液5mL丝状物(DNA)溶液逐渐变蓝对照组不变蓝2.以下关于DNA的粗提取实验和血红蛋白的提取实验,表达正确的选项是()A.前者选择鸡血细胞作为材料较好,后者选择哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料较好B.样品预处理时,前者静置1天处理除去上清液;后者需要参加清水,反复低速短时间离心洗涤,至上清液无黄色C.在DNA粗提取实验中,往2mol/L氯化钠溶液中参加蒸馏水析出DNA时,应该缓慢参加,直到出现黏稠物为止D.洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐等答案:A1.几种物质的提取方法、原理及步骤提取物质提取方法提取原理步骤玫瑰精油水蒸气蒸馏法利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来①水蒸气蒸馏②分离油层③除水、过滤橘皮精油压榨法通过机械加压,压榨出果皮中的芳香油①石灰水浸泡、漂洗②压榨、过滤、静置③再次过滤胡萝卜素萃取法使提取物溶解在有机溶剂中,蒸发后得到提取物①粉碎、干燥②萃取、过滤③浓缩2.不同物质的提取别离方法提取方法方法步骤适用范围水蒸气蒸馏水蒸气蒸馏、分离油层、除水过滤适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油压榨法石灰水浸泡、漂洗、压榨、过滤、静置、再次过滤适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取有机溶剂萃取粉碎、干燥、萃取、过滤、浓缩适用范围广,要求原料的颗粒要尽可能细小,能充分浸泡在有机溶剂中3.在植物有效成分的提取过程中,常用萃取法、蒸馏法和压榨法,以下关于这三种方法表达错误的选项是()A.蒸馏法的实验原理是利用水将芳香油溶解下来,再把水蒸发掉,剩余的就是芳香油B.压榨法的实验原理是通过机械加压,压榨出果皮中的芳香油C.萃取法的实验原理是使芳香油溶解在有机溶剂中,蒸发掉溶剂后就可获得芳香油D.蒸馏法适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油解析:蒸馏法是利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来,适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油。压榨法通过机械加压,压榨出果皮中的芳香油,适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取。萃取法使芳香油溶解在有机溶剂中,蒸发掉溶剂后就可获得芳香油,它的适用范围广,要求原料的颗粒要尽可能细小,能充分浸泡在有机溶液中。答案:ADNA的粗提取、血红蛋白的提取与别离(2011·江苏卷)在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定〞的实验中,相关表达正确的选项是()A.用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L,滤去析出物B.调节NaCl溶液浓度或参加木瓜蛋白酶,都可以去除局部杂质C.将丝状物溶解在2mol/LNaCl溶液中,参加二苯胺试剂即呈蓝色D.用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同解析:用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L时,滤取析出物;将丝状物溶解在0.015mol/L的NaCl中,参加二苯胺试剂,需沸水浴加热几分钟,才呈蓝色;用菜花替代鸡血为实验材料,需要对材料的细胞壁进行处理。调节NaCl溶液浓度改变不同物质在其中的溶解度,或参加木瓜蛋白酶分解蛋白质都可以去除局部杂质,故B正确。答案:B1.(2012·河南长葛模拟)以下关于血红蛋白提取和别离的过程及原理表达正确的选项是()A.红细胞洗涤过程中要参加5倍体积的蒸馏水,重复洗涤3次B.将血红蛋白溶液放在质量分数为0.9%的NaCl溶液中透析12小时C.凝胶装填在色谱柱内要均匀,不能有气泡存在D.蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较大的移动速度慢解析:红细胞洗涤过程中要参加5倍体积的生理盐水,重复洗涤3次目的是除去杂蛋白。透析时使用物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液,而不是用0.9%的NaCl溶液。蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较大的在凝胶外部移动,移动速度快。在装填凝胶柱时,不得有气泡存在,气泡会搅乱洗脱中蛋白质的洗脱次序,降低别离效果。答案:C植物有效成分的三大提取方法蒸馏:适用于提取挥发性强的成分。压榨:适用于从易焦糊的原料中提取有效成分。萃取:要求原料颗粒尽可能小,易溶于提取液。在植物有效成分的提取过程中,常用萃取法、蒸馏法和压榨法,以下关于这三种方法表达错误的选项是()A.蒸馏法的实验原理是利用水将芳香油溶解下来,再把水蒸发掉,剩余的就是芳香油B.压榨法的实验原理是通过机械加压,压榨出果皮中的芳香油C.萃取法的实验原理是使芳香油溶解在有机溶剂中,蒸发掉溶剂后就可获得芳香油D.蒸馏法适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油解析:蒸馏法是利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来,适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油。压榨法通过机械加压,压榨出果皮中的芳香油,适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取。萃取法使芳香油溶解在有机溶剂中,蒸发掉溶剂后就可获得芳香油,它的适用范围广,要求原料的颗粒要尽可能细小,能充分浸泡在有机溶剂中。答案:A2.提取胡萝卜素和玫瑰精油时都需要加热,但是用萃取法提取胡萝卜素时,采用水浴加热法;而用水蒸气蒸馏法提取玫瑰精油时,可以用直接加热法,其原因是()A.前者需要保持恒温,后者不需要恒温B.前者容易蒸发,后者不容易蒸发C.胡萝卜素不耐高温,玫瑰精油耐高温D.前者烧瓶里含有机溶剂,易燃易爆,后者是水答案:D1.关于DNA粗提取与鉴定实验的有关说法正确的选项是()A.充分溶解DNA的盐溶液是0.14mol/L的NaCl溶液B.实验中提取较纯洁的DNA利用了DNA不溶于酒精的特点C.对最后提取出的DNA用二苯胺试剂鉴定时不需要加热D.实验操作过程中先后两次参加蒸馏水的作用相同解析:充分溶解DNA的盐溶液是2mol/L的NaCl溶液;在加热的条件下,才能用二苯胺试剂鉴定DNA;实验中第一次使用蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破,第二次使用蒸馏水的目的是稀释NaCl溶液。答案:B2.(2011·广东理综卷)以下关于猪血红蛋白提纯的描述,不正确的选项是()A.洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法别离过程的监测D.在凝胶色谱法别离过程中,血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢解析:猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少,是提纯血红蛋白的理想材料。提纯血红蛋白分四步:红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、别离血红蛋白溶液、透析,其中洗涤红细胞时,要用生理盐水反复洗涤,既要将红细胞洗涤干净,又要不破坏红细胞,然后再用蒸馏水和甲苯使红细胞破裂,释放出血红蛋白。别离提纯血红蛋白时用凝胶色谱法,是根据相对分子质量的大小来别离蛋白质,相对分子质量大的蛋白质移动速度较快;血红蛋白的颜色可用于观察红色区带的移动情况,并据此判断别离效果。答案:D3.(2011·山东理综卷)研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用,两者的提取及应用如下图;(1)柚皮易焦糊,宜采用________法提取柚皮精油,该过程得到的糊状液体可通过________除去其中的固体杂质。(2)筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或________________接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是_____________________________________________________。实验前需对超净工作台进行________处理。(3)培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供________。电泳法纯化乳酸菌素时,假设别离带电荷相同的蛋白质,那么其分子量越大,电泳速度________。(4)抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。解析:(1)植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等。具体采用哪种方法要根据植物原料的特点来决定。柚皮易焦糊,宜采用压榨法提取柚皮精油。压榨过程中得到的糊状液体需用过滤法除去其中固定杂质。(2)筛选、纯化培养某一特定微生物时,常用平板划线法或稀释涂布平板法。为防止杂菌的污染,需对器具培养基等进行消毒灭菌处理,培养基宜采用高压蒸汽灭菌锅进行高温灭菌处理,而超净工作台常使用紫外线或化学药物进行消毒处理。(3)微生物培养过程中为微生物的生长提供氮源的有尿素、蛋白胨等含氮丰富的物质。电泳法纯化特定生物成分,是利用了待别离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同,这些不同使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中不同分子的别离。当待别离分子所带电荷相同时,分子量越大,电泳速度越慢。(4)抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈,透明圈越大,抑菌效果越好。答案:(1)压榨过滤(2)稀释涂布平板法(或:稀释混合平板法)高压蒸汽
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