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文档简介

DNA和RNA的细胞化学Brachet反应实验原理甲基绿—派洛宁（Methylgreen-Pyronin）为碱性染料，它能分别与细胞内的DNA、RNA结合而呈现不同颜色。当甲基绿与派洛宁作为混合染料时，甲基绿和染色质中DNA选择性结合显示绿色或蓝色；派洛宁与核仁、细胞质中的RNA选择结合显示红色。其原因可能是两种染料的混合染液中有竞争作用，同时两种核酸分子都是多聚体，而其聚合程度有所不同。甲基绿易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色。而派洛宁则与聚合程度较低的RNA结合呈现红色，但解聚的DNA也能和派洛宁结合呈现红色。即RNA对派洛宁亲和力大，被染成红色，而DNA对甲基绿亲和力大，被染成蓝绿色。实验准备（一）器材

显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸

（二）材料

洋葱鳞茎表皮

（三）试剂

1．Unna试剂：甲基绿—派洛宁（Methylgreen-Pyronin）染色液

配制注意事项：

（1）Pyronin可加热助溶。

（2）Methylgreen批号不同，染色效果差别很大。商品Methylgreen常混有甲基紫，影响染色效果，应先把药品放在分液漏斗中，加入足量的氯仿，用力振荡，然后静置，直到洗脱甲基紫为止，最后干燥备用。【方法与步骤】

1．用镊子撕取洋葱鳞茎内表皮一小块，置于载玻片上。

2．滴一滴Unna试剂，染色30min。

3．蒸馏水洗两次，吸水纸吸去多余的水分。

4．盖上盖玻片，镜检。

对照片：

撕取洋葱鳞茎内表皮，经5%三氯醋酸中90℃水浴处理15min。再经70%乙醇洗片刻，然后按步骤1-4制片观察。

实验预期结果

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