微生物室程序文件

文件编号：YLJY-WSW-PF榆林市第一医院检验科微生物室程序文件第1版王茂马近华马亚峰生效日期：2023-04-01榆林市第一医院检验科微生物室程序文件修改控制文件编号：YLJY-WSW-PF-000版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-01序号文件编号页码需修改内容修改后内容修改人修改日期审核批准榆林市第一医院检验科微生物室程序文件发布《程序文件》的声明文件编号：YLJY-WSW-PF-000版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-01关于发布《程序文件》的声明微生物室全体人员：《程序文件》作为《质量手册》的支持性文件，是实验室按ISO15189：2007《医学实验室-质量和能力的专用要求》编制的文件化管理体系。是医学实验室管理体系文件的重要组成局部，是《质量手册》中涉及的要素的具体描述。现予以批准发布实施。《程序文件》是检验科实验室质量活动的根本法规和准那么。各有关部门和个人必须认真贯彻执行，严格维护管理体系的有效运行，切实保证产品的检测质量。本《程序文件》持有单位和个人未经允许，不得私自更改、转让和复制。榆林市第一医院检验科主任：声明日期：年月日榆林市第一医院检验科微生物室程序文件目录文件编号：YLJY-WSW-PF-000版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-01序号文件主题内容文件编号页码一微生物实验室设置及管理程序YLJY-WSW-PF-1二微生物室人员配置、培训及考核管理程序YLJY-WSW-PF-2三微生物室工作人员职责设置程序YLJY-WSW-PF-3四微生物室环境监测和控制程序YLJY-WSW-PF-4五微生物室工作区域相关操作程序YLJY-WSW-PF-501标本处理区工作程序YLJY-WSW-PF-5-102常规标本检测区工作程序YLJY-WSW-PF-5-203杂项检测区工作程序YLJY-WSW-PF-5-304仪器自动分析区工作程序YLJY-WSW-PF-5-405培养基室工作程序YLJY-WSW-PF-5-5六微生物室临床标本检验前程序YLJY-WSW-PF-601微生物检验工程申请程序YLJY-WSW-PF-6-102微生物检验标本标签程序YLJY-WSW-PF-6-203微生物标本采样前病人识别程序YLJY-WSW-PF-6-304微生物标本接收标识程序YLJY-WSW-PF-6-405微生物标本检验信息输入程序YLJY-WSW-PF-6-506微生物标本检验前储存程序YLJY-WSW-PF-6-607微生物标本拒收程序YLJY-WSW-PF-6-708临床微生物标本采集和送检程序YLJY-WSW-PF-6-8〔1〕标本采集和运送的根本原那么YLJY-WSW-PF-6-8-1〔2〕微生物标本运输中发生意外的处理程序YLJY-WSW-PF-6-8-2〔3〕血液标本采集程序YLJY-WSW-PF-6-8-3〔4〕痰和呼吸道标本采集程序YLJY-WSW-PF-6-8-4〔5〕尿标本采集程序YLJY-WSW-PF-6-8-5〔6〕粪便标本采集程序YLJY-WSW-PF-6-8-6〔7〕眼、耳、鼻、咽喉标本采集程序YLJY-WSW-PF-6-8-7〔8〕伤口及脓肿标本采集程序YLJY-WSW-PF-6-8-8〔9〕泌尿生殖道标本采集程序YLJY-WSW-PF-6-8-9〔10〕体液标本采集程序YLJY-WSW-PF-6-8-10〔11〕组织标本采集程序YLJY-WSW-PF-6-8-11〔12〕厌氧菌培养标本采集程序YLJY-WSW-PF-6-8-12〔13〕真菌培养标本采集程序YLJY-WSW-PF-6-8-13〔14〕分枝杆菌标本采集程序YLJY-WSW-PF-6-8-14〔15〕院内感染检测标本采集程序YLJY-WSW-PF-6-8-15〔16〕支原体、衣原体检测标本采集程序YLJY-WSW-PF-6-8-16七微生物室临床标本检验程序YLJY-WSW-PF-701接种技术与培养基的选择程序YLJY-WSW-PF-7-102血液标本检验程序YLJY-WSW-PF-7-203痰及呼吸道标本检验程序YLJY-WSW-PF-7-304尿液标本检验程序YLJY-WSW-PF-7-405粪便标本检验程序YLJY-WSW-PF-7-506眼、耳、鼻、咽喉标本检验程序YLJY-WSW-PF-7-607伤口及脓肿标本检验程序YLJY-WSW-PF-7-708泌尿生殖道标本检验程序YLJY-WSW-PF-7-809体液标本检验程序YLJY-WSW-PF-7-910组织标本检验程序YLJY-WSW-PF-7-1011中心静脉导管标本检验程序YLJY-WSW-PF-7-1112院内感染标本检验程序YLJY-WSW-PF-7-1213支原体培养检验操作程序YLJY-WSW-PF-7-1314沙眼衣原体检测操作程序YLJY-WSW-PF-7-1415细菌鉴定标准操作程序YLJY-WSW-PF-7-1516药物敏感性试验标准操作程序YLJY-WSW-PF-7-16八微生物室临床标本检验后程序YLJY-WSW-PF-801微生物室结果报告程序YLJY-WSW-PF-8-102检验后标本保存程序YLJY-WSW-PF-8-203菌株保存程序YLJY-WSW-PF-8-3九微生物室质量控制程序YLJY-WSW-PF-901微生物室室内质量控制根本要求YLJY-WSW-PF-9-102微生物室质量管理程序YLJY-WSW-PF-9-203微生物室室间质评标准操作程序YLJY-WSW-PF-9-304微生物质控品管理程序YLJY-WSW-PF-9-405微生物室室内质量控制标准操作程序YLJY-WSW-PF-9-5(1)微生物室室内质量控制规那么YLJY-WSW-PF-9-5-1(2)药敏纸片质控程序YLJY-WSW-PF-9-5-2(3)微生物室仪器设备维修、校验质控程序YLJY-WSW-PF-9-5-3(4)革兰氏染液质控程序YLJY-WSW-PF-9-5-4(5)抗酸染液质控程序YLJY-WSW-PF-9-5-5(6)墨汁染液质控程序YLJY-WSW-PF-9-5-6(7)成品或自制培养基质控程序YLJY-WSW-PF-9-5-7(8)血浆凝固酶、触酶、氧化酶、β-内酰胺酶等常用酶学试验质控程序YLJY-WSW-PF-9-5-8(9)诊断抗血清试验质控程序YLJY-WSW-PF-9-5-9(10)微生物室生化和血清学试验工程的质控程序YLJY-WSW-PF-9-5-10(11)X、V、X+V因子纸片质控程序YLJY-WSW-PF-9-5-11(12)厌氧产气袋和厌氧指示剂质控程序YLJY-WSW-PF-9-5-12(13)真菌药敏纸片质控程序YLJY-WSW-PF-9-5-13(14)万古霉素E-test药敏试验质控程序YLJY-WSW-PF-9-5-14(15)超净台及生物平安柜质控程序YLJY-WSW-PF-9-5-15(16)微生物室冰箱、孵箱的质控程序YLJY-WSW-PF-9-5-16(17)高压锅的质控程序YLJY-WSW-PF-9-5-17(18〕标本采集盒的质控程序YLJY-WSW-PF-9-5-1806微生物室质量改进程序YLJY-WSW-PF-9-5-607微生物室仪器设备校准程序YLJY-WSW-PF-9-5-708微生物室仪器比对程序YLJY-WSW-PF-9-5-809微生物室人员比对程序YLJY-WSW-PF-9-5-9十微生物室平安管理程序YLJY-WSW-PF-10十一微生物室消毒液配制程序YLJY-WSW-PF-11十二微生物室与临床沟通程序YLJY-WSW-PF-12榆林市第一医院检验科微生物室程序文件一微生物实验室设置及管理程序文件编号：YLJY-WSW-PF-1版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-01微生物实验室设置及管理程序1目的标准微生物实验室设置及管理程序，确保检验结果的准确性和可靠性。2适用范围适用于临床微生物实验室设置和日常管理。3职责实验室负责人参与本实验室设置和管理。 4程序4.1实验室设置4.1.1微生物室分为污染区、半污染区和清洁区。污染区为已被病原微生物污染的区域，如标本接种室、常规检验室、真菌检验室、杂项检测室、仪器室、菌种保存室等；半污染区为可能被微生物污染的区域，如培养基配置室、走廊、工作服放置区等；清洁区为未被病原微生物污染的区域，如办公室、休息室等。4.2实验室管理4.2.1严格遵守院科室规定的各种规章制度〔见检验科规章制度手册〕。4.2.2严格遵守微生物室规定的各种规章制度〔见微生物室规章制度手册和生物平安手册〕。4.2.3非本实验室工作人员，未经许可不得进入实验室内；进修生、实习生及其他外来人员经实验室负责人同意，并做登记前方能进入实验室；禁止穿着工作服进入清洁区。4.2.4试验完毕后做好清洁消毒工作。4.2.5实验室质量管理参见〔质量管理手册，细菌室质量控制程序，微生物室规章制度手册和生物平安手册等〕。4.2.6污染处理参见〔生物平安手册〕。4.2.7实验室生物平安管理参见〔生物平安手册〕。4.2.8菌株的管理参见〔微生物室规章制度手册〕。参考文献：1.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL31:2007医学实验室质量和能力认可准那么在临床微生物学检验领域的应用说明.2007.2.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2023医学实验室质量和能力认可准那么(ISO15189:2007).2023.3.周庭银，倪语星主编.临床微生物检验标准化操作〔ISO15189认可指导书〕.上海.上海科学技术出版社.2023,5.微生物室工作人员职责设置程序1目的标准工作人员职责设置程序。2适用范围适用于临床微生物实验室人员的管理及考核。3职责微生物实验负责人和所有工作人员执行本程序。4程序4.1微生物实验室负责人职责参见≤微生物室规章制度手册≥。4.2高级职称人员职责参见≤微生物室规章制度手册≥和≤检验科质量手册≥。4.3中级职称人员职责参见≤微生物室规章制度手册≥和≤检验科质量手册≥。4.4初职称人员职责参见≤微生物室规章制度手册≥和≤检验科质量手册≥。参考文献：1.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL31:2007医学实验室质量和能力认可准那么在临床微生物学检验领域的应用说明.2007.2.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2023医学实验室质量和能力认可准那么(ISO15189:2007).2023.3.周庭银，倪语星主编.临床微生物检验标准化操作〔ISO15189认可指导书〕.上海.上海科学技术出版社.2023,5.榆林市第一医院检验科微生物室程序文件四微生物室环境监测和控制程序文件编号：YLJY-WSW-PF-4版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-01微生物室环境监测和控制程序1.目的：标准实验室在常规工作中的空间及环境控制活动，使科室空间和环境满足医学实验室工作和活动的需要。2.负责人：马静华，王茂3.范围：微生物实验室在常规工作中的空间及环境控制活动。4.职责：科室负责人规定实验室在常规工作中的空间及环境控制活动。本室各组人员应熟知和执行本程序。5.程序5.1科室负责人确定实验室具体空间的划分，保证各种物品及资源放置合理有序。5.1.1划分污染区和非污染区。严禁污染区的物品未经消毒处理进入非污染区；禁止患者和非实验室工作人员在未采取隔离措施的情况下进入污染区；所有标本均为污染源，直接接触标本和病原菌的区域为污染区。5.1.2标本接收区域、标本处理区域、标本贮存区域应严格划分，不得混淆。5.1.3科室规定检验工作区域，非工作人员未经许可严禁入内。5.1.4保证仪器室适合仪器工作的需要，防止各种干扰。5.2采集或检验原始样本的环境不影响检验结果，或对任何测量步骤的质量产生不利的影响。5.3实验室环境应采光、通风良好，有良好的供能、供水，以利于废弃物的处理。5.4实验室应制定相应的程序和规定，用于检查其环境对实验、设备运行有无不利影响。5.5当环境因素可能影响检验结果的质量时，实验室应监测、控制和记录环境条件。应注意微生物、气溶胶、电磁、辐射、温度、湿度、电压、震动等环境因素对检验结果的影响，适当的时候应考虑相关的技术活动以排除环境干扰。5.6每日上班后实验室相关人员对室内温度、湿度进行登记，并对仪器和设备运行的状态进行记录。5.7对生物平安柜和净化工作台应每月进行一次细菌检测〔如有条件可请厂家来检测粒子数量，每半年一次〕。5.8如日常监测发现问题及时向主管报告，及时解决，如解决不了请及时向室负责汇报6记录表格≤微生物室温度、湿度记录本或表≥。参考文献：1.周庭银，倪语星主编.临床微生物检验标准化操作〔ISO15189认可指导书〕.上海，上海科学技术出版社，2023.4.第2版.2.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2023医学实验室质量和能力认可准那么(ISO15189:2007).2023.3.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL31:2007医学实验室质量和能力认可准那么在临床微生物学检验领域的应用说明.2007.榆林市第一医院检验科微生物室程序文件五微生物室工作区域相关操作程序01标本处理区工作程序文件编号：YLJY-WSW-PF-5-1版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-0101标本处理区工作程序

1目的：规定在标本制备区内所进行的工作及其操作。

2适用范围：所有在本区内进行的工作。

3职责：

3.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本程序。

3.2本程序的改动，可由任一工作人员提出，假设整改意见合理，报经室负责人、科主任批准签字后执行。4程序：

4.1

实验人员进入该区须穿工作服，实验中须使用一次性鞋套，戴手套和帽子。

4.2记录恒温箱的温度计读数。

4.3记录温湿度计读数。

4.4从试剂贮存和准备区取出的试剂放入即用室区存放或暂存。4.5临床标本的接收、保存，细菌手工鉴定或上机前处理在本区内进行。

4.6标本的接收处理和保存按室内相关的管理规程进行〔如微生物室检验有关操作规程〕。4.7不同检验工程的标本按相应检验工程的SOP进行。

4.8标本接种或涂片在本区的标本处理台〔生物平安柜〕内进行，接种后培养基按要求进行培养。菌落观察和处理在生物平安柜内进行。

4.9详细做好实验记录和仪器使用记录。

4.10保持室内空气流通，且在实验完毕后，按实验室清洁消毒规程进行清洁、消毒工作。

5支持文件5.1临床微生物标本采集和送检程序YLJY-WSW-PF-6-85.2临床微生物标本检验程序YLJY-WSW-PF-7

5.3微生物室消毒灭菌管理制度YLJY-WSW-QM-4-5

5.4微生物室规章制度YLJY-WSW-QM-4

6记录表格6.1微生物室临床标本接收登记本6.2不合格标本拒收登记本6.3恒温箱温度记录表

6.4室内温湿度记录表

6.5生物平安柜使用登记本6.6紫外线灯消毒使用登记本6.7微生物室常规消毒登记本6.8临床沟通登记本榆林市第一医院检验科微生物室程序文件五微生物室工作区域相关操作程序02别离培养鉴定区(常规工作区)工作程序文件编号：YLJY-WSW-PF-5-2版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-0102别离培养鉴定区(常规工作区)工作程序1目的：规定在常规工作区内所进行的工作及其操作。2适用范围：所有在本区内进行的工作。3职责：

3.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本程序。

3.2本程序的改动，可由任一工作人员提出，假设整改意见合理，报经室负责人、科主任批准签字后执行。4标准操作：

4.1

实验人员进入该区须穿工作服，实验中须使用一次性鞋套，戴手套和帽子。

4.2记录恒温箱的温度计读数。

4.3记录温湿度计读数。

4.4从试剂/培养基贮存柜取出细菌鉴定和药敏试验需要的试剂或药敏纸片放入即用室区存放或暂存。4.5工作人员按本职工作职责进行。

4.6标本的处理和保存按室内相关的管理规程进行〔如微生物室检验有关操作规程〕。4.7不同检验工程的标本按相应检验工程的作业指导书(SOP)进行。

4.8重要病原菌的别离应在生物平安柜内进行，接种后培养基按要求进行培养。

4.9做好及保证室内的质量控制工作和详细做好实验记录。

4.10保持室内空气流通，且在实验完毕后，按实验室清洁消毒规程进行清洁、消毒工作。

5支持文件5.1临床微生物标本检验程序YLJY-WSW-PF-7

5.2微生物室消毒灭菌管理制度YLJY-WSW-QM-4-5

5.3微生物室规章制度YLJY-WSW-QM-45.4细菌各种属检验操作规程作业指导书YLJY-WSW-SOP-17

6记录表格6.1恒温箱温度记录表

6.2温湿度计记录表

6.3冰箱温度登记本6.4生物平安柜使用登记本6.5紫外线灯消毒使用登记本6.6微生物室常规消毒登记本6.7微生物室内常规质控登记表榆林市第一医院检验科微生物室程序文件五微生物室工作区域相关操作程序03杂项检测区工作程序文件编号：YLJY-WSW-PF-5-3版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-0103杂项检测区工作程序1目的：规定在杂项检测区内所进行的工作及其操作。2适用范围：所有在本区内进行的工作。3职责：

3.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本程序。

3.2本程序的改动，可由任一工作人员提出，假设整改意见合理，报经室负责人、科主任批准签字后执行。4标准操作：

4.1实验人员进入该区须穿工作服，实验中须使用一次性鞋套，戴手套和帽子。

4.2从试剂贮存柜取出试验需要的试剂放入即用区存放。4.3按本组的工作(制度)职责进行工作。4.4.仪器主要使用者负责仪器的质量控制管理,做好及保证室内的质量控制工作和详细做好实验记录。4.5仪器主管负责对各类仪器的管理〔定期维护保养、校准及维修〕。4.6医院感染监测标本由相关人员负责检验。4.7保持室内空气流通，且在实验完毕后，按实验室清洁消毒规程进行清洁、消毒工作。

5.引用文件5.1微生物室杂项检测方法作业指导书YLJY-WSW-SOP-15

5.2微生物室仪器操作作业指书YLJY-WSW-SOP-195.3微生物室消毒灭菌管理制度YLJY-WSW-QM-4-5

5.4微生物室规章制度YLJY-WSW-QM-4

5.5微生物室质量控制程序YLJY-WSW-PF-96.记录表格6.1室内温湿度记录表

6.2冰箱温度登记本6.3紫外线灯消毒使用登记本6.4微生物室常规消毒登记本榆林市第一医院检验科微生物室程序文件五微生物室工作区域相关操作程序04仪器自动分析区工作程序文件编号：YLJY-WSW-PF-5-4版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-0104仪器自动分析区工作程序1目的：规定在本区进行的工作，确保仪器使用的准确性和有效性。2适用范围：血液培养仪、全自动细菌鉴定仪。3职责：

3.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本程序。

3.2本程序的改动，可由任一工作人员提出，假设整改意见合理，报经室负责人、科主任批准签字后执行。4标准操作：

4.1实验人员进入该区须穿工作服，实验中须戴手套、帽子，手套需常更换。

4.2本实验室采取VITEK2全自动细菌鉴定分析仪和全自动血培养分析仪，因此，细菌自动鉴定和和快速血培养等均在本区内进行。

4.3鉴定板在标本处理区配制菌液后带入该区上机，废弃菌液连同试管放入消毒桶中消毒，由辅医负责消毒洗涤处理。

4.4每月必须进行至少一次所有试卡的质控，每新到的批号试剂要进行质控，过关方能投入使用。

4.5依据不同检测工程SOP要求设定微生物检验工作规程，并记录备案；未经实验室负责人允许，不得随意更改。

4.6检测报告的签发依据检测结果报告规程。

4.7做好仪器和实验记录。

4.8保持室内空气流通，且在实验完毕后，清洁、消毒工作台面。

5引用文件

5.1微生物室仪器操作作业指导书YLJY-WSW-SOP-19

5.2微生物室规章制度YLJY-WSW-QM-45.3微生物室消毒灭菌管理制度YLJY-WSW-QM-4-5

5.5微生物室质量控制程序YLJY-WSW-PF-96记录表格6.1温湿度计记录表6.3血培养仪使用登记本6.4VITEK2全自动细菌鉴定仪使用登记本6.5血培养仪质控登记本6.6VITEK2全自动细菌鉴定仪质控登记本榆林市第一医院检验科微生物室程序文件五微生物室工作区域相关操作程序文件编号：YLJY-WSW-PF-5-5版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-0105培养基室工作程序1目的：规定在本区进行的工作，确保试剂正确贮存和制备，确保各种培养基正确贮存和制备。2适用范围：各种试剂、培养基的贮存和制备。3职责：

3.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本程序。

3.2本程序的改动，可由任一工作人员提出，假设整改意见合理，报经室负责人、科主任批准签字后执行。4

规程：

4.1实验人员进入该区须穿本区专用工作服。实验中须戴手套、工作鞋。

4.2实验室所购试剂经验收登记后，按说明书中的要求贮存。

4.3记录温湿度计读数。

4.4记录冰箱的温度计读数。根据当天的标本验收登记表，取出当天实验须配制和使用的试剂放置于即用冰箱，其余试剂要立即收好放回贮藏冰箱内。

4.5不同厂家的试剂勿混用，同厂家的不同检测工程试剂盒中的相同试剂也不宜混用，除非厂家有特别说明。

4.6做好详细实验记录。

4.7实验完毕，清洁实验台面。

4.8每周一清点库存试剂，看有无过期或将近到期的试剂，或作报废处理或排列优先使用，防止浪费，然后记录试剂的详细保存情况。

5引用的文件5.1细菌学培养基的制备作业指导书YLJY-WSW-SOP-165.2微生物室规章制度YLJY-WSW-QM-4

5.3微生物室消毒灭菌管理制度YLJY-WSW-QM-4-5

5.4微生物室质量控制程序YLJY-WSW-PF-96记录表格6.1冰箱温度记录表6.2温湿度计记录表

6.3高压锅使用记录本6.4精密天平使用登记本6.5培养基配制登记本6.6培养基质控登记本6.7紫外线灯消毒登记本榆林市第一医院检验科微生物室程序文件六微生物室临床标本检验前程序01微生物检验工程申请程序文件编号：YLJY-WSW-PF-6-1版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-0101微生物检验工程申请程序1．目的标准临床医师微生物检验工程申请程序。2．范围微生物实验室所有检验工程。3．职责申请临床微生物检验工程的医生应遵守本程序。4．程序4．1临床医师根据病人病情需要和检验工程的敏感性、特异性正确选择检验工程。临床申请检测工程可参照≤医院检验科标本采集手册送检标准进行。4．2必要时需与病人签订“知情同意书’’，如进行尚未完全明确检验工程意义的科研检查工程时，需与病人签订“知情同意书"。4．3登陆临床医生检验申请系统申请微生物检验工程。4．4输人病人一般信息及申请的检验工程要求的信息。4．5条码和手工申请单要求含有病人信息、检测要求及开单医师姓名。必需内容：病人姓名、性别、住院号、病室科别、床号、标本种类、标本来源、检测工程、采样及送检日期时间等，必要时需填写感染类型和(或)预期的微生物类型及是否使用抗生素等信息。4．6特殊情况下医师需要口头申请检验，可记录口头申请的检验要求、必要的病人信息、申请医师及记录人员的姓名或工号。条件许可时，及时补齐所有微生物检验申请相关信息。4．7包含微生物检验申请单的医嘱交当班护士或医师，进入标本采集程序。参考文献：1.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL31:2007医学实验室质量和能力认可准那么在临床微生物学检验领域的应用说明.2007.2.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2023医学实验室质量和能力认可准那么(ISO15189:2007).2023.3.周庭银，倪语星主编.临床微生物检验标准化操作〔ISO15189认可指导书〕.上海.上海科学技术出版社.2023,5.榆林市第一医院检验科微生物室程序文件六微生物室临床标本检验前程序02微生物检验标本标签程序文件编号：YLJY-WSW-PF-6-2版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-01微生物检验标本标签程序1．目的标准微生物标本检验标签程序。2．范围所有微生物检验标本。3．职责临床各科室采集标本工作人员应遵守本程序。4．程序4．1当班护士将医生所开医嘱输入各临床科室病人管理系统，核对病人信息和检验申请信息后，生成微生物检验工程标签和申请单(包括电脑和手工微生物检验申请单)。4．2微生物检验标本申请单内容应包括：病人姓名、性别、住院号、床位、诊断、标本种类、采样部位、采样方式、检验工程及检验单据号等。4．3打印微生物检验工程标签及检验工程清单。4．4经双人核对检验工程清单、标本容器及医嘱后，将标签正确地贴在标本容器上，不可贴在标本容器盖上，不可覆盖容器自带的条形码。4．5如有需要标本容器上应贴上生物危害标志〔对特殊感染患者〕。参考文献1.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL31：2007医学实验室质量和能力认可准那么在临床微生物学检验领域的应用说明.20072.中国合格评定国家认可委员会..CNAS-CL02：2023医学实验室质量和能力认可准那么(ISO15189:2007).20233.PatrickR.Murray.ManualofClinicalMicrobiology.8thed.Washington:ASMPress,20074.周庭银，倪语星主编.临床微生物检验标准化操作〔ISO15189认可指导书〕.上海.上海科学技术出版社.2023,5.榆林市第一医院检验科微生物室程序文件六微生物室临床标本检验前程序03采样前病人识别程序文件编号：YLJY-WSW-PF-6-3版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-01采样前病人识别程序1．目的标准采集标本前确认病人程序。2．范围所有申请微生物检测工程的病人。3．职责临床各科室采集标本工作人员应遵守本程序。4．程序4．1样本采集前，采样人员必须核对病人信息、标本容器和微生物检验申请工程。4．2病人清醒时，让病人说出自己的姓名，并根据病人标识核对检验申请单上或条形码上病人姓名、性别、病员号、病室科别、床号、检测工程等病人信息。4．3如果病人登记身份与实际信息不匹配，那么与病人信息登记处联系，采集前解决不匹配问题。4．4如果病人不能提供信息，那么从病人家属处获取信息。4．5如果病人缺少身份标识，通知相关工作人员对病人做进一步确认后再采集标本。参考文献：1.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL31:2007医学实验室质量和能力认可准那么在临床微生物学检验领域的应用说明.2007.2.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2023医学实验室质量和能力认可准那么(ISO15189:2007).2023.3.周庭银，倪语星主编.临床微生物检验标准化操作〔ISO15189认可指导书〕.上海.上海科学技术出版社.2023,5.榆林市第一医院检验科微生物室程序文件六微生物室临床标本检验前程序04微生物接收标识程序文件编号：YLJY-WSW-PF-6-4版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-01微生物接收标识程序1．目的标准微生物标本接收及标本唯一检验标识程序，保证实验室不误检、漏检。2．范围微生物试验室所有标本3．职责微生物室接种岗位检验人员应遵守本程序4．程序4.1各种微生物标本送至接收室后，接收人员与标本运送人员共同核对标本清单及标本信息，并在清单上签上标本运输、接收人员的姓名及接收日期和时间。4.2根据微生物检测工程分别进入标本接收登记编号记录4.3LIS“微生物培养报告〞系统适用所有细菌培养标本的录入，标本编号规那么为年份+阿拉伯数字组合流水号。例如：20230123，2023表示2023年，01表示改年1月，23表示该月第23份送检样本。榆林市第一医院检验科微生物室程序文件六微生物室临床标本检验前程序05微生物标本检验信息输入程序文件编号：YLJY-WSW-PF-6-5版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-01微生物标本检验信息输入程序1．目的标准微生物标本检验信息输人的程序，及时发现标本采集、处理和接收过程中的不符合项，保证标本符合检验工程的要求，同时留存记录方便后续检验及查询。2．范围微生物实验室所有标本。3．职责微生物实验室标本接收接种组检验人员应遵守本程序。4．程序4．1有条形码的微生物检验标本编好检验号后，在LIS系统相应编号位置直接用条形码扫描器将检验信息录入LIS系统，并记录收到标本的日期和时间、标本接收者的签名〔LIS系统自动生成检验者姓名〕。核对、保存信息后，打印实验室检验申请单。4．2有需要改动信息者翻开病人信息修改窗口修改信息。核对、保存修改的信息后，打印检验申请单。4．3手工开单的微生物检验标本编好检验号后，手工输入检验单的检验相关信息，包括病人姓名、性别、年龄、住院号、病区床号、标本种类来源、采集日期时间、接收日期时间及检测工程等。核对、保存信息后，打印实验室检验申请单或在原始申请单上编写检验号。4．4信息录入时发现标本的病人信息、标本信息及标本采集运输不符合时，及时与相关人员及临床科室联系，消除过失。参考文献：1.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL31:2007医学实验室质量和能力认可准那么在临床微生物学检验领域的应用说明.2007.2.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2023医学实验室质量和能力认可准那么(ISO15189:2007).2023.3.周庭银，倪语星主编.临床微生物检验标准化操作〔ISO15189认可指导书〕.上海.上海科学技术出版社.2023,5.榆林市第一医院检验科微生物室程序文件六微生物室临床标本检验前程序06微生物标本检验前储存程序文件编号：YLJY-WSW-PF-6-6版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-01微生物标本检验前储存程序1．目的标准微生物标本处理前的储存程序，保证未能立即送检或未能及时处理的微生物标本质量。2．范围微生物实验室所有标本。3．职责微生物实验室接种岗位检验人员应遵守本程序。4．程序4．1微生物实验室接收到标本后须及时接种，不能及时接种的，可按下表所列条件暂时储存。微生物标本暂时储存的条件标本类型储存条件标本类型储存条件尿标本、痰标本、粪便标本4℃脓、伤口标本常温血、骨髓标本常温生殖道标本常温无菌体液标本常温眼、耳部标本，褥疮标本常温鼻咽部标本常温留置针、心脏起搏器标本常温4．2细菌培养标本储存时间不应超过24小时。4．3志贺菌(应立即处理)、淋球菌、脑膜炎双球菌和流感嗜血杆菌(对低温敏感)对环境温度敏感，因此脑脊液、生殖系统、眼或内耳标本不能冷藏。参考文献：1.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL31:2007医学实验室质量和能力认可准那么在临床微生物学检验领域的应用说明.2007.2.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2023医学实验室质量和能力认可准那么(ISO15189:2007).2023.3.周庭银，倪语星主编.临床微生物检验标准化操作〔ISO15189认可指导书〕.上海.上海科学技术出版社.2023,5.榆林市第一医院检验科微生物室程序文件六微生物室临床标本检验前程序07微生物标本拒收程序文件编号：YLJY-WSW-PF-6-7版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-01微生物标本拒收程序1．目的标准标本拒收程序。2．范围微生物实验室所有标本。3．职责微生物实验室检验人员应遵守本程序。4．程序4．1微生物实验室检验人员应根据各类标本的送检要求评估标本的合格性，具体参见《标本采集、运送程序》。4．2检验人员必须严格执行标本的接收、拒收制度和标准，拒收所有可能导致错误结果的标本。4．3下表1列举了常见微生物标本拒收原因及处理方式。表1常见微生物标本拒收原因及处理方式拒绝原因处理方式无标签非损伤方法获得的标本(例如：痰、粪便等标本)，重新送检损伤方法获得的标本(例如血、脑脊液或组织等)，与取样医师协商后，再处理标本。并在申请单上注明问题所在，记录所采取的措施送检延迟(超过规定时间)提示送检者拒收原因，并要求重新送检。病人申请单上注明“标本送检延迟〞容器不适宜或标本泄漏通知送检者，并要求重新送检。病人申请单上注明问题所在及所采取的措施标本运送条件不适宜(例如厌氧条件送检的标本却用需氧条件送检)与送检者联系，说明检测要求，指出不符合之处，并要求重新送检同一天内同一检测条件的重复标本(皿除外)通知送检者．指出重复标本。在申请单上注明问题所在标本污染重新采样标本量不够重新采样4．4表2列举了一些不适合微生物学检查的标本及替代处理方法或建议。4．5在《不合格标本处理记录表》登记相关信息，至少包括：标本唯一标识、病人唯一标识、标本采集人姓名、标本采集时间、不合格原因及性状描述、识别者签名及时间。表2不适合微生物学检查的标本及替代处理方法或建议标本类型替代方法或建议烧伤，伤口(拭子)送交组织或抽吸物结肠造口术排出物不处理褥疮(拭子)送交组织或抽吸物Foley导管头不处理坏疽损伤(拭子)送交组织或抽吸物牙周损害(拭子)送交组织或抽吸物直肠周围脓肿(拭子)送交组织或抽吸物5．生物平安防护：参见《生物平安手册》。参考文献：1.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL31:2007医学实验室质量和能力认可准那么在临床微生物学检验领域的应用说明.2007.2.中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2023医学实验室质量和能力认可准那么(ISO15189:2007).2023.3.周庭银，倪语星主编.临床微生物检验标准化操作〔ISO15189认可指导书〕.上海.上海科学技术出版社.2023,5.榆林市第一医院检验科微生物室程序文件六微生物室临床标本检验前程序08临床微生物标本采集和送检程序〔1〕标本采集和运送的根本原那么文件编号：YLJY-WSW-PF-6-8-1版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-01标本采集和运送的根本原那么1.概述：病原微生物学诊断对感染性疾病具有重要诊断价值，医院感染病原体监测也是医院感染管理的一项重要内容。快速准确的病原诊断与监测，不但有助于指导临床用药，合理选用抗生素，降低耐药菌的产生和提高感染的治愈率，而且对预测和及时发现医院感染的爆发流行，杜绝感染蔓延，以及研究医院感染的发生机制和环节，制定有效的感染控制措施等，均具有十分重要的意义。对于细菌培养的标本，正确的采取处理与运送是临床细菌检验成功的关键。标本采取与处理的标准化是准确、及时地向临床提供重要的临床感染信息的根底。为准确、快速鉴定病原微生物，提供合理的抗生素选择和治疗，必须严格控制实验过程的每一个环节。微生物分析前的标本采集和运送，对获得可信的结果非常重要，临床医护人员必须了解其中的知识和原理，掌握标本采集的根本原那么，认识标准化的标本采集对微生物鉴定的重要性。2.目的：标准微生物标本采集和运送的根本原那么，以保证标本采集和运送中的正确性。3.范围：临床医务人员微生物标本采送者。4.程序：4.1发现医院感染应及时采集微生物标本作病原学检查，三级医院微生物标本送检率不应低于70%。4.2尽量在抗菌药物使用前采集标本,因为药物将影响微生物的检出，在使用药物后24小时内采集的标本，往往得不到阳性结果。如已经使用，须在申请单上注明。4.3标本采集时应严格执行无菌操作，减少或防止机体正常菌群及其杂菌污染。4.4标本采集后须防止他人被感染，并立即送至实验室(常规培养应在1h内送到实验室，如果进行厌氧菌检验要在15-30min内送达)，不能送达可放室温保存20-24h。4.5拭子应选用对微生物无毒的纤维素拭子,因采集的标本量有限，极易枯燥，须将拭子最好装入有运送培养基的试管内送检。4.6疑心厌氧菌感染一定要采用标准无菌隔氧采集器，如：注射器收取后插入橡皮塞中、特制的采集器深部取样；必须保证全程与氧隔离运送；如果不能及时送检，绝不可冷冻，宁可放室温保存。4.7盛标本容器须经灭菌处理或无菌卫材收集标本，并且巩固密闭，但不得使用消毒剂。4.8标本应置于有适当的标识、有助疑似病原菌生存、不易泄露及防止潜在性生物危险的容器中。4.9标本采集后由临床护士三查、四对〔查标本种类、送检时间、送检目的；对姓名、科别、住院号、送检联号〕，检查送检标本是否合格,合格后由卫勤人员签收运送至实验室。4.10实验室间或社区到实验室的标本运送要严格执行病原微生物标本运送规定，无论距离远近。应该有生物危险标志，完整的包装和运送箱，指定的运输工具和人员。4.11对拒收的〔不合格〕标本应作好登记，说明原因，并通知临床。榆林市第一医院检验科微生物室程序文件六微生物室临床标本检验前程序08临床微生物标本采集和送检程序〔2〕微生物标本运输中发生意外的处理程序文件编号：YLJY-WSW-PF-6-8-2版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-01微生物标本运输中发生意外的处理程序1.目的：标准微生物标本运输中的平安及发生意外的处理程序，以保证标本运输中的平安性和发生意外的处理方法。2.范围：临床医务人员微生物标本采送者。3.程序：3.1标本容器应使用金属的或塑料材质的二级容器，应该可以耐高压灭菌或耐受化学消毒剂的作用。3.2标本容器应巩固，不易破碎，盖子或塞子盖好后不应有液体渗漏，所有标本都应存放在容器内。3.3容器应正确地贴上条码、标本种类、科别、采集日期、姓名、编号等必要的信息。3.4标本采集后应尽快送到实验室(2小时内，做厌氧培养的标本应在30分钟内送检)，运送过程中应注意保温。3.5如在运送中发生感染性物质的溢出时，应及时用化学消毒剂从溢出区外围至中心进行消毒处理，标本容器用消毒液浸泡(30分钟)，将所处理物清理掉(高压灭菌)。3.6如果含有碎玻璃或其他锐器，要使用簸箕或厚纸板来收集处理过的物品，并将它们置于可防刺透的容器中以待高压处理。3.7将其它污染材料置于防漏、防穿透的废弃物处理器中(高压灭菌处理)。3.8如有其它情况及时向上级管理部门报告。榆林市第一医院检验科微生物室程序文件六微生物室临床标本检验前程序08临床微生物标本采集和送检程序〔3〕血液标本采集程序文件编号：YLJY-WSW-PF-6-8-3版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-01血液标本采集程序1.概述：当微生物侵入血液迅速繁殖超出免疫系统去除这些微生物的能力时形成菌血症或真菌菌血症。一过性菌血症常发生于对感染灶的外科处理、黏膜的创伤操作和易污染的外科手术，亦可发生于全身或局部感染的早期；间歇性菌血症常发生于腹腔等部位未能及时引流的脓肿；持续性菌血症常见于感染性心内膜炎等血管内膜感染，亦常发生于伤寒和波浪热的最初几周。标本采集质量直接关系到血液培养的阳性率,而标本采集质量受多种因素影响,如采血的时间、部位、容量和采血的频率，因此严格掌握各种因素都可提高血液培养的阳性率。2.目的：标准微生物血液标本采集程序，以保证血液标本的正确采集方法。3.范围：临床医务人员。4.程序：4.1采集指征入院危重或发热患者未进行系统性抗生素治疗前，应及时进行血液培养，患者出现以下体征时可作为采集血培养的重要指征：发热〔≥38℃〕或低温〔≤36℃〕、寒战〔注意在休克早期体温正常或低于正常〕、白细胞增多〔＞10×109/L，特别有“核左移〞，未成熟的或杆状核白细胞增多〕、粒细胞减少(成熟的多核白细胞＜1×109/L)、血小板减少、皮肤黏膜出血、血压降低,CRP升高及呼吸快、昏迷。多器官功能衰竭。或同时具备上述几种体征时。在评估可疑新生儿败血症时，除发热或低烧外，很少培养出细菌，应该补充尿液和脑脊液培养。肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症的患儿〔特别是2岁以下的幼儿〕一般多见于门诊，常伴有明显发热〔≥38.5℃〕和白细胞增多〔≥20×109/L〕。老年菌血症患者，可能不发热或低热，如伴有身体不适，肌痛或中风可能是感染性心内膜炎的重要指征。4.2皮肤消毒程序4.2.1先用70%酒精擦拭静脉〔从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达3cm以上〕穿刺部位30s以上。4.2.2再用1%～2%碘酊作用30s〔操作同上〕。对碘过敏的患者,用70%酒精消毒60s，待酒精挥发枯燥后采血。4.2.3后用70%酒精脱碘。4.3培养瓶消毒程序4.3.170%酒精擦拭血培养瓶橡皮塞，作用60s。4.3.2用无菌棉签去除橡皮塞子外表剩余酒精，然后注入血液。4.4静脉穿刺和培养瓶接种程序4.4.1在穿刺前或穿刺期间，为防止静脉滑动，可戴乳胶手套固定静脉，不可接触穿刺点。4.4.2用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头〔如果行第二次穿刺，应换针头〕直接注入血培养瓶，或严格按厂商推荐的方法采血。4.4.3血标本接种到培养瓶后，轻轻颠倒混匀以防血液凝固。4.5采血量成人:8～10ml儿童1～5ml血液和肉汤之比为1：5～1：104.6采血部位：肘静脉。切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本。

4.7采血时间4.7.1一般在病人发热初期或发热顶峰期时采集，在24h内采集2～3份血培养〔一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养〕。原那么上应选择在抗菌药物应用之前，对已应用药物而病情不允许停药的患者应在下一次用药前采血。

4.7.2对间歇性寒战或发热应在寒战或体温顶峰到来之前0.5～1h采集血液，或于寒战或发烧后1h进行。采血最正确时间与频率：急性败血症应在治疗前24小时内抽血3次或者更屡次，分别做厌氧、需氧培养以及内毒素检测；急性心内膜炎在治疗前1-2小时内分别在3个不同部位抽血样，在24h内取血3次，每次间隔不少于30min，必要时次日再做血培养2次；疑心伤寒病人，在病程第1-2周内采静脉血液；肺炎链球菌感染在寒战、高热或者休克时；布鲁杆菌感染除在发热期采血，还要屡次采血，一般24小时抽3-4次；分枝杆菌感染早期采血样阳性率高。对疑为细菌性骨髓炎或伤寒病人，在病灶部位或髂前(后)上棘处严格消毒后抽取骨髓lmL作增菌培养。疑心菌血症因尽早采血，体温上升阶段采血可提高阳性率，两次抽血间隔60min；必要时于24～48h后再抽血2次。因为1次血培养缺乏以说明问题，且会遗漏阳性结果。4.8关于厌氧血培养“血培养操作标准〞规定每次接种1个需氧培养瓶+1个厌氧培养瓶需做厌氧血培养的高危人群1)肠脓毒症、女性生殖道感染、褥疮及呼吸道感染患者。2)ICU患者或近期做过腹部外科手术的患者。3)严重烧伤和外伤患者。4)伴有严重心血管疾病、糖尿病、恶性肿瘤、移植和免疫抑制患者。5)新生儿、儿科及老年患者。6)临床高度疑心有厌氧菌感染的患者。7)临床厌氧菌血症呈现上升趋势。8)厌氧菌血症死亡率更高。9)厌氧血培养瓶除严格厌氧菌外，可提高某些兼性菌的别离率和早期报告时间。厌氧血培养的作用1)不仅培养厌氧菌,可帮助提高兼性厌氧菌的阳性率。2)临床资料显示仅厌氧瓶报告阳性：16%链球菌；17%肠杆菌科细菌。3)将“只送需氧瓶〞列入不标准血培养操作。4)每位临床医师都应该对患者负责任，实验室工作人员发现不标准的血标本后，应该即刻通知临床医生以便重复采集血培养进行补救。4.9考前须知采血部位的局部皮肤应严格消毒。将采集的血液注入血培养瓶前应，护士应认真识别相应培养瓶的颜色，并仔细检查培养瓶有无变色或混浊。撕掉血培养瓶塑料盖后，瓶口用75%酒精消毒。4.9.2血液标本量要符合要求，如果采血量缺乏，仪器报告结果时间就会滞后。同时做需氧和厌氧培养时，应先将标本接种到厌氧瓶中，然后再注入需氧瓶，尽量减少接触氧气时间。切忌在输液一侧手臂静脉取血。4.9.3血培养瓶务必立即送至临床微生物室，如因故不能立即送检时，应将已接种的瓶放在室温，切勿放在冰箱存放。

4.9.4对于延迟送检的血培养瓶注意肉眼观察微生物生长可视信号：培养瓶内是否有絮状物、混浊、溶血、凝块、薄膜、产气、白色颗粒等。如发现可视信号提示有微生物生长，应该立即直接涂片镜检和划线转种。4.9.5其他无菌体液：胸腹水、脑脊液、心包积液、胆汁等穿刺取得后都可按照无菌操作注入血培养瓶内送检。

4.9.6采集标本用的针头、注射器及废弃培养瓶必须经高压灭菌后才能丢弃，因为菌血症患者血标本中的微生物可成为传染源。5参考文献5.1叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程.第三版南京：东南大学出版社，2006.105.2丁振假设,于文彬,苏明权，郝晓柯主编.现代检验医学.北京：人民军医出版社，2007.15.3张卓然主编.临床微生物学和微生物检验.第三版.北京：人民卫生出版社，2003.35.4中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL31:2007医学实验室质量和能力认可准那么在临床微生物学检验领域的应用说明.2007.5.5中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2023医学实验室质量和能力认可准那么(ISO15189:2007).2023.5.6周庭银，倪语星主编.临床微生物检验标准化操作〔ISO15189认可指导书〕.上海.上海科学技术出版社.2023,5.6记录表格6.1临床微生物标本接收登记本6.2不合格标本拒收登记本榆林市第一医院检验科微生物室程序文件六微生物室临床标本检验前程序08临床微生物标本采集和送检程序〔4〕痰和呼吸道标本采集程序文件编号：YLJY-WSW-PF-6-8-4版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-01痰和呼吸道标本采集程序1.概述：下呼吸道感染患者的细菌学检验能明确感染病原菌，并提供有关抗菌药物对别离菌的抗菌活性，有助于疾病的治疗、流行病学调查研究以及医院感染的监测。呼吸道标本来源有多种：痰、支气管肺泡灌洗吸出液〔PBAL〕，气管穿刺抽吸〔TTA〕及保护性标本刷洗液〔PSB〕。肺穿刺或活组织等应用保护性标本刷采取的标本最可靠，还可以做定量培养，由临床医生按相应操作规程采集，并且必须注意采集标本时尽可能防止咽喉部正常菌群的污染。但病人可接受性差，目前仍以自然咳痰留取标本为主。对可疑烈性呼吸道传染病〔如SARS、肺炭疽、肺鼠疫、霍乱等〕的患者采集检验标本时必须注意生物平安防护，最好在标本采集前与微生物室联系。2.目的：标准微生物痰标本采集程序，以保证痰标本的正确采集方法。3.范围：临床医务人员。4.程序：4.1标本的采集4.1.1自然咳痰：要求患者清晨留取，留取标本前用凉开水刷牙漱口，之后用力咳出。痰液直接吐入无菌、清洁、枯燥、不渗漏、不吸水的广口带盖的容器中，标本量应≥1ml。4.1.2气管穿刺法：仅用于昏迷患者，由临床医师进行。用l4号针头经环状与甲状软骨膜小心穿刺，再以聚乙烯导管经针管伸至气管，然后以针筒套住导管往后拉抽吸分泌物，采集标本适用于厌氧培养．4.1.3纤维支气管镜抽吸：通常用于给患者行纤维支气管镜检查时顺便抽取．支气管肺泡冲洗液也是用纤维支气管镜采集，不同的是须灌入生理盐水，使之达支气管、肺泡，再回收重复数次，目的是将肺泡内分泌物洗出来．此标本适用于厌氧茵的培养，诊断是否由厌氧菌引起的肺脓肿。4.1.4胃内采痰法：结核病人尤其婴幼儿患者不会咳痰，且有时会把痰咽入胃内，因此可以采胃内容物做结核鉴定。〔该法用清晨空腹时，将胃管从鼻腔进入胃内，用10－20ml注射器抽取〕。4.1.5小儿取痰法：用压舌板向后压舌，用棉拭子深入咽部。小儿经压舌刺激咳痰时，喷出肺部和气管分泌物，粘在棉拭子上。4.2标本的运送：标本采集后应立即送检，应争取在20min内送达检验科微生物室。特别是痰标本留取后要立即送检，不能立即送检的，室温保存≤2h，或置于4℃冰箱中保存但不能超过6个小时。因为有些细胞〔如纤毛柱状上皮细胞〕有些苛养细菌如脑膜炎奈瑟菌，肺炎链球菌、流感嗜血杆菌很容易自溶死亡，而影响培养结果。同时口咽部非致病细菌过度生长，也使检出率明显下降。采集好的标本放入专用密闭送检箱中，运送时要注意防止对环境空间的污染。4.3标本的质量检查：痰液质量考核是一项很重要的技术内容。根据痰液的外观可分为血丝痰、泡沫痰、脓痰、粘液水样痰等。根据所含细胞成分的不同，可区别其主要来源于何处：复层磷状上皮细胞大量存在表示含有唾液；假复层纤毛柱状上皮说明来自鼻、喉、气管、支气管、细支气管。还可见纤毛柱状细胞、粘液柱状细胞及多核纤毛柱状细胞：红细胞说明有出血；中性粒细胞说明呼吸道有炎症；淋巴细胞和浆细胞为慢性炎症的表现；吞噬细胞和称泡沫细胞来自深部支气管；肺泡巨噬细胞是肺慢性炎症，说明痰液来自呼吸道深部。4.3.1制成涂片行革兰染色4.3.2于显微镜低倍镜下检查(10×10)，观察白细胞及扁平上皮细胞存在情况〔见附表〕。附表痰涂片显微镜细胞学检查判别〔标本合格的推荐标准〕分类白细胞上皮细胞判断A>25<10合格可用于细菌培养B>2510～25尚合格可用于细菌培养C<10>25不合格，重送标本4.4呼吸道不合格细菌学培养标本拒收标准4.4.1厌氧菌培养：呼吸道定植有大量的正常菌群，咽拭子、咳痰、吸出的分泌物厌氧菌培养无意义。4.4.2标本标识错误：申请单必须填写完整。标本标识必须唯一，并与申请单相符，未标明采集时间、部位或检验要求等拒收。4.4.3肉眼观察：痰标本呈水样或唾液样，拒收。4.4.4标本涂片细胞学检查：白细胞数＜10/低倍镜和鳞状上皮细胞数＞25/低倍镜，提示该标本已污染正常菌群，建议重送标本。4.4.5容器不符合规定：标本容器必须符合规定，溢漏、无盖者拒收。4.4.6运送不符合规定：标本采集后送检时间超过2h拒收。4.4.7双份标本：同时同部位或同一天两份相同检测的标本〔应与申请医师及时协商处理〕。5参考文献5.1叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程.第三版南京：东南大学出版社，2006.105.2丁振假设,于文彬,苏明权，郝晓柯主编.现代检验医学.北京：人民军医出版社，2007.15.3张卓然主编.临床微生物学和微生物检验.第三版.北京：人民卫生出版社，2003.35.4中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL31:2007医学实验室质量和能力认可准那么在临床微生物学检验领域的应用说明.2007.5.5中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2023医学实验室质量和能力认可准那么(ISO15189:2007).2023.5.6.周庭银，倪语星主编.临床微生物检验标准化操作〔ISO15189认可指导书〕.上海.上海科学技术出版社.2023,5.6记录表格6.1临床微生物标本接收登记本6.2不合格标本拒收登记本榆林市第一医院检验科微生物室程序文件六微生物室临床标本检验前程序08临床微生物标本采集和送检程序〔5〕尿标本采集程序文件编号：YLJY-WSW-PF-6-8-5版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-01尿标本采集程序1.目的：标准微生物尿液标本采集程序，以保证尿液标本的正确采集方法。2.范围：临床医务人员。3.程序：3.1采集指征3.1.1有典型的尿路感染病症：尿频、尿急、尿痛等膀胱刺激病症多见泌尿系统细菌感染，可伴有不同程度的发热、乏力、腰痛等全身不适病症3.1.2肉眼脓尿或血尿3.1.3尿常规检查表现为白细胞或亚硝酸盐阳性3.1.4不明原因的发热，无其他局部病症3.1.5留置导尿管的患者出现发热3.1.6膀胱排空功能受损3.1.7泌尿系统疾病手术前3.2采集容器：应由不与尿液成份发生反响的惰性材料制成；洁净、无菌、加盖、密封、防渗漏；不含防腐剂和抑菌剂，一次性使用；容积应>50ml、开口直径应>4cm、具有较宽的底部、盒盖易于开启。采集尿标本必须防止杂菌污染，严格无菌操作，一般多采集中段尿。送检标本以晨起第一次尿液为佳，采集后立即送检，〔泌尿系感染大多病原菌，于室温放置时间较久，即可增殖〕并均应在用药之前培养。涂片检查结核分枝杆菌，应留取24小时尿液于一个有盖的玻璃瓶中送检。3.3标本的采集3.3.1中段尿采集方法：女性采样前应先用肥皂水清洗尿道口，再用0.1%高锰酸钾水溶液冲洗，然后排尿弃去前段尿，留取中段尿10毫升左右于无菌容器内，立即送检。男性须将包皮翻开冲洗，1：1000新洁尔灭消毒尿道，无菌生理盐水冲去消毒液，弃去前段尿，收集中段尿2～10ml盛于无菌容器内。儿童多数情况下仅冲洗外阴是不够的，故采集标本较为困难，如尿内细菌明显增多，可高度疑心尿路感染。3.3.2肾盂尿采集法：为确定菌尿是否来自肾脏，可用导尿管采集肾盂尿，充分冲洗膀胱，以最后一次冲洗尿作为对照，此后用导尿管插入输尿管，分别标记左右两侧收集3次尿，如输尿管菌数比对照尿菌数多或第三次比第一次多，该菌尿可能来自肾脏；反之，第一次尿菌数多于第三次尿菌数，那么可能来自膀胱。该方法一般请泌尿科医师协助进行。3.3.3膀胱穿刺采集法：采集中段尿完全防止污染是很困难的，培养结果与病情不符时，可采用耻骨上膀胱穿刺采集尿液。耻骨上膀胱穿刺法是评估膀胱内细菌感染的“金标准〞。此法用于厌氧菌培养或留尿困难婴幼儿。直接导尿法：是一种较好的无菌采集方法，可减少尿液标本污染，准确地反映膀胱感染情况。但因导尿管的使用，可引入下尿道细菌，导致继发感染，应慎重使用。采取导尿管留尿，取10～15亳升于灭菌容器内送检。3.4标本运送：采集的标本应立即送检，如不能立即送检，放4℃冰箱，但不能超过6个小时。采集好的标本放入专用密闭送检箱中，运送时要注意防止对环境空间的污染。3.5考前须知：正常人尿液是无菌的，但外尿道除有正常菌群外，还有条件致病菌〔如大肠杆菌，表皮葡萄球菌，肠球菌等〕，而这些细菌又是尿路感染中常见致病菌，故应该注意无菌采集以及在核收时注意标本是否符合本规定要求。多数抗生素通过尿液排泄，无论用何种方法采集，尿液均宜在用药前进行。尿液中不得加防腐剂或消毒剂。5参考文献5.1叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程.第三版南京：东南大学出版社，2006.105.2丁振假设,于文彬,苏明权，郝晓柯主编.现代检验医学.北京：人民军医出版社，2007.15.3张卓然主编.临床微生物学和微生物检验.第三版.北京：人民卫生出版社，2003.35.4中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL31:2007医学实验室质量和能力认可准那么在临床微生物学检验领域的应用说明.2007.5.5中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2023医学实验室质量和能力认可准那么(ISO15189:2007).2023.5.6周庭银，倪语星主编.临床微生物检验标准化操作〔ISO15189认可指导书〕.上海.上海科学技术出版社.2023,5.6记录表格6.1临床微生物标本接收登记本6.2不合格标本拒收登记本榆林市第一医院检验科微生物室程序文件六微生物室临床标本检验前程序08临床微生物标本采集和送检程序〔6〕粪便标本采集程序文件编号：YLJY-WSW-PF-6-8-6版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-01粪便标本采集程序1.概述：关于腹泻患者粪便中肠道病原微生物的检测，根据世界卫生组织(WHO)腹泻病纲要和我国卫生部临床检验中心有关操作规程要求，粪便标本应取材得当，并严格按细菌别离培养操作规程进行各种病原微生物的鉴定。2.目的：标准微生物粪便标本采集程序，以保证粪便标本的正确采集方法。3.范围：临床医务人员。4.程序：4.1病症指征:常为侵袭性病原菌引起，如：志贺菌、沙门菌、霍乱弧菌、出血性大肠埃希菌等。急性腹泻——大便次数明显增多，腹痛，里急后重，往往伴有发热，大便性状为粘液便或脓血便。慢性腹泻——大便次数多，多为稀便，伴有全身乏力等病症霍乱腹泻——无痛性大量水样便或米泔样稀便。食物中毒——先吐后泻恶心、呕吐、腹痛、腹泻，有集体发病史，多为细菌性食物中毒所致。伪膜性肠炎——发生在抗生素治疗后，糊状便，排便次数增加。4.２采集方法自然排便采集法：自然排便后，挑取有脓血、粘液、组织碎片的粪便2～3g，液状粪便取絮状物盛于无菌容器内或置于保存液或增菌液中及时送检。直肠拭子法：如不易获得粪便时或排便困难的患者及幼儿，可用肥皂水将肛门周围洗净，用无菌盐水、保存液或增菌液湿润的棉拭子插入肛门，成人约4～5cm深处，儿童约2～3cm,与直肠粘膜外表接触，轻轻旋转拭子。直肠拭子采集的标本必须置入运送培养基，转运时间不宜超过2h。4.3．标本运送：粪便标本应尽快送检，室温条件下不能超过2h。如不能及时送检可参加pH7.0的磷酸盐甘油或使用转运培养基，而且不宜超过24h。4.4考前须知4.4.1标本采集尽可能在发病早期和使用抗生素治疗之前。在不同的时间采集2～3份标本可以提高致病菌的别离率。4.4.2为提高检出率，要采集新鲜粪便作培养。腹泻病人应在急性期采集，以提高阳性率。粪便含有多种杂菌，因此容器应尽量是清洁、带盖、广口的〔不宜使用纸盒〕。送检的标本中不能参加防腐剂。用于厌氧培养的标本应尽量防止与空气接触，最好为床边接种。4.4.6肠道致病菌多数为传染病原，采集和操作时需注意生物平安防护，防止污染环境。高度疑心霍乱弧菌、鼠疫杆菌感染的标本运送必须符合特殊标本的平安要求，最好提前与实验室联系。5参考文献5.1叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程.第三版南京：东南大学出版社，2006.105.2丁振假设,于文彬,苏明权，郝晓柯主编.现代检验医学.北京：人民军医出版社，2007.15.3张卓然主编.临床微生物学和微生物检验.第三版.北京：人民卫生出版社，2003.35.4中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL31:2007医学实验室质量和能力认可准那么在临床微生物学检验领域的应用说明.2007.5.5中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2023医学实验室质量和能力认可准那么(ISO15189:2007).2023.5.6周庭银，倪语星主编.临床微生物检验标准化操作〔ISO15189认可指导书〕.上海.上海科学技术出版社.2023,5.6记录表格6.1临床微生物标本接收登记本6.2不合格标本拒收登记本榆林市第一医院检验科微生物室程序文件六微生物室临床标本检验前程序08临床微生物标本采集和送检程序〔7〕眼、耳、鼻、喉标本采集程序文件编号：YLJY-WSW-PF-6-8-7版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-01眼、耳、鼻、喉标本采集程序1.概述：由于眼泪具有机械冲洗作用，同时又有杀菌物质〔溶菌酶〕，故泪囊、结膜、巩膜、角膜和前房等通常是无菌的。正常人的中耳及鼻窦内是无菌的。健康人的咽峡部有口腔正常菌群。耳、鼻、咽、喉细菌感染病原菌主要来自口腔，由于口腔中含有需氧菌和厌氧菌，因此其周围器官的感染在进行普通细菌检验时，应考虑厌氧菌的别离和培养。2.目的：标准眼、耳、鼻、喉标本采集程序，以保证眼、耳、鼻、喉标本的正确采集方法。3.范围：临床医务人员。4.程序：4.1标本采集4.1.1眼结膜标本：预先沾湿试子，在结膜上滚动采集标本。标本在15min送达实验室。脓性分泌物较多时，用灭菌棉球擦拭，再用灭菌拭子取结膜囊分泌物培养或涂片检查；分泌物少时，可作结膜刮片检查。4.1.2眼角膜标本采集：在麻醉下，用刮勺在溃疡或创伤边缘刮取碎屑，直接接种在培养基平板上并涂片。4.1.3口咽部标本采集：先用一个拭子揩去溃疡或创面外表的分泌物，用第二个拭子采集溃疡边缘或底部，插入运送培养基中，要在2h内送到实验室。咽拭子注意防止接触口腔和舌粘膜。检查脑膜炎奈瑟菌和白喉棒状杆菌时如在咽部肉眼见有明显发红和有假膜存在时，应在局部涂抹。4.1.4外耳炎标本采集：要用深部耳拭子，因为浅表拭子可能遗漏链球菌引起的蜂窝组织炎。4.1.5鼻腔标本采集：用一无菌棉拭子，伸进一侧鼻孔约2.5cm，与鼻黏膜接触，轻轻旋转拭子，蘸取黏膜上分泌物，缓慢抽出，置运送培养基或将拭子直接送检。4.1.6窦内标本及深部组织标本：在手术中采集，原那么是立即送检。4.2考前须知4.2.1应于抗菌药物治疗之前采集标本。咽部是呼吸和食物的通路，以晨起采集为宜。4.2.2用于采集标本的拭子应该是对微生物无毒的纤维素拭子，采集后立即送检，以防枯燥。5参考文献5.1叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程.第三版南京：东南大学出版社，2006.105.2丁振假设,于文彬,苏明权，郝晓柯主编.现代检验医学.北京：人民军医出版社，2007.15.3张卓然主编.临床微生物学和微生物检验.第三版.北京：人民卫生出版社，2003.35.4中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL31:2007医学实验室质量和能力认可准那么在临床微生物学检验领域的应用说明.2007.5.5中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2023医学实验室质量和能力认可准那么(ISO15189:2007).2023.5.6周庭银，倪语星主编.临床微生物检验标准化操作〔ISO15189认可指导书〕.上海.上海科学技术出版社.2023,5.6记录表格6.1临床微生物标本接收登记本6.2不合格标本拒收登记本榆林市第一医院检验科微生物室程序文件六微生物室临床标本检验前程序08临床微生物标本采集和送检程序〔8〕伤口及脓肿标本采集程序文件编号：YLJY-WSW-PF-6-8-8版本-修改号：1-01生效日期：2023-04-01伤口及脓肿标本采集程序1.概述：组织或器官的化脓性感染，其病原菌的来源可分内源性和外源性两类。内源性感染源是炎症局部周围器官中的正常菌群，由于损伤等因素造成正常菌群进入无菌的组织内，发生感染。外源性感染源是存在于人体外部自然界的微生物，由于外伤和直接接触，外界微生物通过人体外表进入人体，造成感染。2.目的：标准伤口及脓肿标本采集程序，以保证伤口及脓肿标本的正确采集方法。3.范围：临床医务人员。4.程序：4.１标本采集4.1.1开放性感染和化脓灶：标本采集前先用灭菌生理盐水冲洗外表污染菌，在患部附近的皮肤或粘膜，用灭菌纱布或棉球擦拭，使供培养用的标本，尽可能从深部流出，再用灭菌拭子采取脓液及病灶深部的分泌物。如为慢性感染，已形成肉芽或组织增生，可取感染部位下的组织，研磨成组织匀浆接种于适宜的培养基。4.1.2对已破溃脓肿一般以无菌棉拭采取脓液及病灶深部的分泌物，而瘘管那么以无菌方法采取组织碎片，置入无菌试管中送检。4.1.3对于未破溃的脓肿可严格消毒后，以无菌注射器抽取脓汁及分泌物，也可切开排脓用无菌棉拭采取。4.1.4对疑似放线菌感染的标本，常用无菌棉拭挤压瘘管，选取脓汁中“硫磺样颗粒〞，置于无菌管中送检，也可将无菌纱布塞入瘘管内，次日取出送检。4.1.5患者局部已用抗生素及磺胺类药物，应在培养基参加抗抗生素物质，防止假阴性结果出现。创伤出血，敷有药物在2h以内及烧伤12h内均不应采集标本。此时获得的阳性结果时机甚少。4.1.6采集标本时应注意观察脓汁及分泌物的性状，色泽，及有无恶臭等，为培养鉴定提供依据。脓汁呈绿色时可能有铜绿假单胞菌感染，有恶臭味时可能有厌氧菌感染。在培养检查时要注意厌氧菌的培养。4.1.7闭锁性脓肿：先用碘酊消毒皮肤和粘膜外表，然后用75％酒精脱碘，再用灭菌枯燥注射器穿刺抽取，将采集的标本置灭菌容器中。疑为厌氧菌感染时，应作厌氧菌培养，取出标本后应将注射器内空气排空，同时将针头插入灭菌胶塞内，以防空气进入。4.1.8大面积烧伤的创面分泌物：由于创面的部位不同，细菌种类也不尽相同，要用无菌拭子采集多个部位标本。4.2标本运送：采集的标本应立即送检，如不能立即送检，放4℃冰箱，但不能超过6个小时。采集好的标本放入专用密闭送检箱中，运送时要注意防止对环境空间的污染。4.3考前须知4.3.1尽可能在用药前采集标本，如