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文档简介

专题十五生物技术与工程

考纲要求:1.果酒、果醋与泡菜的制作2.微生物的分离和培养3.培养基对微生

物的选择作用4.某种微生物数量的测定5.DNA的粗提取与鉴定6.基因工程

的诞生(I)7.基因工程的原理及技术(含PCR技术)(II)8.基因工程的应用(II)

9.蛋白质工程(I)10.植物的组织培养(II)11.动物细胞培养与体细胞克隆(H)

12.细胞融合与单克隆抗体(II)13.动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论

基础(I)14.胚胎干细胞的移植(I)15.胚胎工程的应用(II)16.转基因生物

的安全性(I)17.生物武器对人类的威胁(I)18.生物技术中的伦理问题(I)

培养基

水、碳源、氮源、无机盐果酒制作所需微生物一醉母菌

的构成发辞加工|果鹏制作所包也醋酸菌

微生物

消毒和灭菌无菌技术

培养食品的方法限制作所需三礴生物.毛霉

计算•称量-溶化•①额+倒平板一接种.培养■培梵术

—所需微生物-⑥乳酸菌

Wifi-

选择培养理地」*探讨加酶洗衣粉的洗涤效果

基的制将联系应所L酵母细胞的固定化

与对照组器爵⑦水蒸气蒸慵法

以②醒作为唯一叙培养基分解尿充

设置植物有

源的选择培养基曲细斌一效成分橘皮精油提取方法叱田“

--------►压榨法

出微生的提取

③稀释涂布平板法和

计公

物胡萝卜素提取

及涵

内和鉴定方法

式显微镜宜接计数法

V、:1⑧萃取法提取、⑨纸层析法鉴定

富含④红鲜的选择培■培养基,巨野£今

…螂手善海/芯豪而远居写芬薪

比较两种

联系…--{⑤刚果红染色斗瞿肉、鉴定・原理

刚果红染血红蛋白的

提取及分离过程

色法提取与分离

“纯度鉴定

①限制席、②DNA连接酸、载体包产物广工⑦细胞的全能性、细胞膜的流动性

目的基因的获取一)细坦巨植物组织培养、⑧植物体细胞杂交

典也植物繁殖的新途径、培育作法新品种、

③基因型甥体的构建•一工

操作程序一*细胞产物的工厂化生产

克程

将目的基因导入受体细胞

隆动物细胞培养广区⑨期第埴缜

④目的基因的检测和鉴定•—技

发术

一^获得新细胞,不形成个体

展动2

转期植物、转期4动物I-]应用现

物动物体细胞核移植产⑩动物体细胞核的全能性

基因工程药物、基因治疗"<I

⑤基因心塔代细

获得克隆动物个体

生动物细第融合舞⑪细蛔的流动性

可产生⑥自然界中没有的蛋白质一3工

物理法、化学法、生物法

物程

e加杵inN仃胚胎发育的场所首要步骤

⑬输卵管和壬宫1~[就]体内受精和早.给小白鼠注射抗原

科单克隆抗所需细胞

⑭O.胚胎史的移植期1期胚胎发齐已免疫的B淋巴细胞和滑面痛细胞

体的制备叁昼迪里能产生⑫生二蚣的杂交痛细胞

培养法和化学诱导法体外受桁碉技

“两盐”“两索”一早期胚质期胚胎培养安全性向JM•食宿安全、生物安全、环境安全

“两酸”,外加曲清培养液成分伦理问题

克隆人、设计试管婴儿、班因身份证

早期胚胎在空间位置上的转移3^胚胎

充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能3麻生物产致病菌、病毒、生化毒剂、经过基因取组的致病菌

发育良好、形态正常的选材我国政府的观点.⑱完全禁止生产生物武器

⑮桑棋胚或囊胚**~胚胎分一生

态L概念

加快繁殖速度出L

工-------原理:物种多样性原理、物质循环再生原理、

程⑲整体性原理、⑳协蠲与平衡原理、

早期胚胎或原始性腺・一胚胎「细胞

⑯系统学和工程学原理

具有发育的⑰全能性•功能特点L

L-生态工程的实例和发展前景

教材回归

1.在缺氧、呈酸性的发酵液中,酵母菌可以生长繁殖,而绝大多数其他微

生物都因无法适应这一环境而受到抑制。

2.当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸;当缺少糖

源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。

3.加盐可以析出豆腐中的水分,使豆腐块变硬,在后期的制作过程中不会

过早酥烂。同时,盐能抑制微生物的生长,避免豆腐块腐败变质。

4.在寻找目的菌株时,要根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻

找。

5.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌后,如

果pH升高,指示剂将变红。

6.艾弗里等人通过不同类型肺炎双球菌的转化实验,不仅证明了生物的遗

传物质是DNA,还证明了DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体。

7.目的基因主要是指编码蛋白质的基因,也可以是一些具有调控作用的因

子。

8.在植物的组织培养过程中,由于培养细胞一直处于不断的分生状态,因

此容易受到培养条件和外界压力(如射线、化学物质等)的影响而产生突变。

9.2,4-D常用于植物愈伤组织的诱导和生长,但它趋向于抑制植物形态的

发生,所以在分化培养基中很少利用。

10.定期更换培养液,以便清除代谢产物,防止细胞代谢产物积累对细胞自

身造成危害。

11.通过显微操作去除卵母细胞中的核,由于MH期卵母细胞核的位置靠近

第一极体,用微型吸管可一并吸出细胞核与第一极体。

12.在选择性培养基上,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会

死亡,只有融合的杂种细胞才能生长。

13.胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。

14.ES细胞具有胚胎细胞的特性,在形态上,表现为体积小、细胞核大、

核仁明显;在功能上,具有发育的全能性。

15.由于ES细胞可分化为胚胎的内胚层、中胚层和外胚层中任何一类细胞,

于是可以将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔,通过组织化学染色,

了解ES细胞的分化特点。

微生物的培养、分离与计数

1.微生物培养中的无菌操作技术

「煮沸消毒法

提一巴氏消毒法

无-化学药剂消毒法

「灼烧灭菌一接种环、接种针等金属用具

笑兰--干热灭菌一主要针对玻璃器皿等

菌方法

L高压蒸汽灭菌一主要针对培养基等

2.培养基制备与微生物纯化技术

流产(计算-称心融•灭菌•蚯^

(通过接种环在琼脂固体培养基表

平板面连续划线的操作,将聚集的菌

划线法种逐步稀释分散到培养基的表面

〔不宜计数

r将菌液进行一系列的梯度稀释,

然后将其分别涂布到琼脂固体培

稀释涂布,养基的表面,进行培养,聚集在

平板法一起的微生物将被分散成包呦

胞,从而能在培养基表面形成单

I个的菌落适宜计数

3.筛选目的微生物的原理与实例

(1)原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),

同时抑制或阻止其他微生物生长。因此,可以通过配制选择培养基、控制培养条

件等选择目的微生物。

⑵实例

[提醒](1)图甲是利用平板划线法进行微生物接种,图乙是利用稀释涂布平板

法进行微生物接种。对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是灼烧灭菌和

酒精消毒。

w

甲乙

(2)用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,这是因为当

两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。

(3)关注两种对照组与一种重复组

①将一未接种的选择培养基与接种的选择培养基一起培养——用于确认培

养基灭菌是否彻底(制备是否合格)。

②将一接种的普通培养基与接种的选择培养基一起培养——用于确认选择

培养基是否起到''筛选”作用。

③进行微生物计数时,每一稀释度下涂布三个平板,即设置重复组,是为了

求平均值,提高计数准确度。

新题素养训练

1.(2020・高考全国卷I)某种物质S(一种含有C、H、N的有机物)难以降解,

会对环境造成污染,只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥

中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基,甲的

组分为无机盐、水和S,乙的组分为无机盐、水、S和Y。

接种混罐多次筛选

无菌水甲乙甲

回答下列问题:

(1)实验时,盛有水或培养基的摇瓶通常采用的方法

进行灭菌。乙培养基中的Y物质是o甲、乙培养基均属于培

养基。

(2)实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2X107个/mL,若要在每个平板

上涂布100RL稀释后的菌液,且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个,

则至少应将摇瓶M中的菌液稀释倍。

(3)在步骤⑤的筛选过程中,发现当培养基中的S超过某一浓度时,某菌株

对S的降解量反而下降,其原因可能是(答出1点即可)。

⑷若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数,请写出主要实验步骤:

(5)上述实验中,甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同,但都能为细菌

的生长提供4类营养物质,即________________________________________________

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

解析:(1)实验过程中,对盛有水或培养基的摇瓶进行灭菌时,常采用高压

蒸汽灭菌法。据题图分析可知,乙培养基为固体培养基,与甲培养基相比,其特

有的组分Y物质应是凝固剂琼脂。甲、乙培养基均只允许能利用物质S作为氮

源和碳源的微生物生长,因此均为选择培养基。(2)据题意可知,假设至少将摇

瓶M中的菌液稀释X倍,才能保证稀释后的100piL菌液中的细菌细胞数不超过

200个,初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2X107个/mL,则稀释之前100匹菌

液中有2X106个细菌,可得2X1()6X(1/X)=200,则X=10、因此至少应将摇瓶

M中的菌液稀释IO4倍。(3)在筛选过程中,若培养基中S浓度过高,可能会导

致细胞失水,进而抑制菌株的生长。(4)将含有能降解S的细菌的淤泥加入无菌

水中,进行适当稀释后,利用稀释涂布平板法,取适量的菌液涂布到乙培养基上,

在适宜条件下进行培养,一段时间后,统计菌落数,即可估算出淤泥中能降解S

的细菌细胞数。(5)本实验中,甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同,但都

能为细菌的生长提供的营养物质是水、碳源、氮源和无机盐。

答案:(1)高压蒸汽灭菌琼脂选择(2)104(3)S的浓度超过某一值时会

抑制菌株的生长(4)取淤泥加入无菌水中,涂布(或稀释涂布)到乙培养基上,培

养后计数(5)水、碳源、氮源和无机盐

2.(2019・高考全国卷I)已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解,

会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标

菌)。

I号培养基:在牛肉膏蛋白族培养基中加入X(5g/L)o

II号培养基:氯化钠(5g/L),硝酸铉(3g/L),其他无机盐(适量),X(15g/L)o

III号培养基:氯化钠(5g/L),硝酸镂(3g/L),其他无机盐(适量),X(45g/L)o

回答下列问题。

(1)在I号培养基中,为微生物提供氮源的是oII、III号

培养基中为微生物提供碳源的有机物是o

(2)若将土壤悬浮液接种在H号液体培养基中,培养一段时间后,不能降解X

的细菌比例会_____________________________,其原因是

(3)n号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基,若要以该固体培养基培养

目标菌并对菌落进行计数,接种时,应采用的方法是。

(4)假设从in号培养基中得到了能高效降解x的细菌,且该菌能将x代谢为

丙酮酸,则在有氧条件下,丙酮酸可为该菌的生长提供和

_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

解析:(1)在I号牛肉膏蛋白陈培养基中,牛肉膏、蛋白陈为微生物提供了

氮源,而II、III号培养基中除X外的其他物质均不含碳,所以能为微生物提供

碳源的有机物是Xo(2)因为n号培养基中的碳源只有x,相当于选择培养基,

只有能降解X的细菌才能增殖,而不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖。(3)

要对菌落进行计数,应采用稀释涂布平板法进行接种。(4)在有氧条件下,丙酮

酸参与细菌的有氧呼吸,可以为该菌的生长提供能量和合成其他物质的原料。

答案:(1)牛肉膏、蛋白陈X

(2)下降不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的细菌能够

增殖

(3)稀释涂布平板法

(4)能量合成其他物质的原料

3.(2019・高考全国卷H)物质W是一种含氮有机物,会污染土壤。W在培

养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解

W的细菌(目标菌)。回答下列问题。

(1)要从土壤中分离目标菌,所用选择培养基中的氮源应该是o

(2)在从土壤中分离目标菌的过程中,发现培养基上甲、乙两种细菌都能生

长并形成菌落(如右图所示)。如果要得到目标菌,应该选择菌落进一步

纯化,选择的依据是。

(3)土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进

一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源,请简要写出实验思路、预期

结果和结论,即_____________________________________________________________

(4)该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌,使大肠杆菌产生能降解W

的酶(酶E)。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异,该小组拟进行如下实验,

请完善相关内容。

①在含有一定浓度W的固体培养基上,A处滴加含有酶E的缓冲液,B处

滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液,C处滴加,三处滴加量相同。

②一段时间后,测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈,说明

;若A、B处形成的透明圈直径大小相近,说明

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________0

解析:(1)要从土壤中分离出能降解含氮有机物W的目标菌,所用选择培养

基应以该特定物质W为氟源。(2)据图可知,在乙菌落周围出现透明圈,说明乙

菌能降解W,若要得到目标菌,应该选择乙菌落进一步纯化。(3)若要通过设计

实验确定甲、乙两种细菌能否利用空气中的氮气作为氮源,需将甲、乙菌分别接

种在无氮源的培养基上,若某细菌能生长,则说明该细菌能利用空气中的氟气作

为氮源。(4)①实验应遵循单一变量原则,故C处应滴加缓冲液。②一段时间后,

测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈,说明缓冲液不能降解W;若A、B

处形成的透明圈大小相近,说明酶E与天然酶降解W的能力相近。

答案:⑴W

(2)乙乙菌落周围出现透明圈,说明乙菌能降解W

(3)将甲、乙菌分别接种在无氮源的培养基上,若细菌能生长,则说明该细

菌可以利用空气中的氮气作为氮源

(4)①缓冲液②缓冲液不能降解W酶E与天然酶降解W的能力相近

4.据图回答下列问题:

(1)生牛奶在饮用前一般要经过_________________(填具体方法)处理.,以保证

人体健康。

(2)培养微生物时必须进行无菌操作,实验前所需的各种器材如培养皿等常

用法灭菌。

(3)牛奶是微生物生长的良好培养基,为检测消毒前后牛奶中细菌含量的变

化情况,依图甲所示操作:用无菌吸管从锥形瓶中吸取1mL生牛奶稀释液移至

盛有9mL无菌水的试管中,混合均匀,如此再重复2次后,得到的溶液稀释度

为o

(4)配制的培养基在接种之前需进行无菌检测,具体做法是

(5)图乙中统计的菌落数比实际活菌数,

原因是o

(6)从培养基的作用来看,图丙所示的培养基称为,能起

到分离微生物作用的原因是_________________________________________________

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

解析:(1)牛奶常用巴氏消毒法进行消毒处理。(2)培养微生物过程中,吸管、

培养皿等玻璃器皿常用干热灭菌法进行灭菌。(3)由题图可知,从锥形瓶中吸取1

mL生牛奶稀释液移至盛有9mL无菌水的试管中,稀释了10倍,又重复了2次,

因此得到的溶液稀释度为10\(4)对配制的培养基在接种之前进行无菌检测的常

用方法是将未接种的培养基置于适宜条件下一段时间,如果没有形成菌落说明灭

菌彻底,反之,有菌落生长则说明灭菌不彻底。(5)图乙是通过稀释涂布平板法

接种得到的菌落,由于两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌

落,因此统计的菌落数比实际活菌数要少。(6)图丙用的是含尿素的培养基,只

有能分解尿素的微生物才能生长,其他微生物因不能利用尿素而不能生长,因此

含尿素的培养基属于选择培养基。

答案:(1)巴氏消毒法(2)干热灭菌(3)103(4)将未接种的培养基置于适宜

条件下一段时间,若没有菌落形成,则说明灭菌彻底(5)少当两个或多个细

胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落(6)选择培养基这种培养基允

许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长

新题长句训练

1.[2018.全国HT37(2)]牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,

与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是o

答案:在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少

2"2014.全国HT39(2)]某小组采用平板划线法分离水样中的细菌,操作时,

接种环通过________灭菌。在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端

开始划线。这样做的目的是________________________________________________

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

答案:灼烧将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面,以便获得单个菌

3.[2015.江苏T31(2)]在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过

多的原因是_______________________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

答案:培养基表面的菌悬液会出现积液,导致菌体堆积,影响分离效果

4.[2017•全国IT37(2)]为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应

选择(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择

其他两组的原因是_________________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

答案:尿素其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素

的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用

5.[2018.全国IHT37(1)]分离培养酵母菌通常使用(填“牛

肉膏蛋白陈”“MS”或“麦芽汁琼脂”)培养基,该培养基应采用

灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上,培养一段时间后

可观察到菌落,菌落的含义是_________________________________________________

答案:麦芽汁琼脂高压蒸汽由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群

6.[2014•全国IT39(3)]为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的

单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):

酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水

培养基甲++++—++

培养基乙+++—+++

注:“+”表示有,“一”表示无。

据表判断,培养基甲(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素

分解菌,原因是________________________________________________________________

____________________________________________________________________________;

培养基乙_________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原

因是____________________________________________________________________________

答案:不能液体培养基不能用于分离单菌落不能培养基中没有纤维

素,不会形成CR-纤维素红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤维素

分解菌

7.[2018•全国IT37(4)]甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样

品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以下结果:

甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值

133;

乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。

有人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其原因是

答案:乙同学的结果中,1个平板的计数结果与另2个相差悬殊,结果的重

复性差

8.已知金黄色葡萄球菌的最适生长温度为37℃,并且有高度的耐盐性,可

以在10%〜15%NaCl肉汤培养基中生长,某同学想快速培养大量的金黄色葡萄

球菌,应该如何操作?o该同学分

离得到金黄色葡萄球菌后,将其接种到固体斜面培养基上进行临时保存,该保存

方法的缺点是o

答案:挑取金黄色葡萄球菌接种在高盐的肉汤培养基中,置于37°C条件下

培养保存时间不长,菌种易被污染或产生变异

9.采用下表配方配制的培养液分离果胶酶产生菌时,该表X处的成分应是

(填"葡萄糖"或“果胶”),不选另一种成分的原因是

K2HPO4MgSO4NaNO3FeSO4XH2O

0.1g0.5g3g0.01g2g加至1L

答案:果胶大多数微生物以葡萄糖作为碳源,不具有选择作用

10.在实验中,研究者每隔24h统计一次菌落数目,并选取菌落数目稳定

时的记录作为结果,这样可以防止___________________________________________

_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

答案:因培养时间不足导致遗漏细菌数目

11.对细菌计数时往往会产生实验误差,稀释涂布平板法计数的值比实际值

,原因是_________________________________________________________

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________;

显微计数法计数的结果比实际值________,原因是

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________0

答案:偏小当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落

偏大显微镜下无法区分细胞的死活,计数时包括了死细胞

12.把菌种接种到液体发酵培养基上,持续振荡培养链霉菌比静置培养时的

抗生素产量高,其原因是__________________________________________________

答案:振荡培养能提高培养液溶氧量,利于菌体与培养液充分接触,促进菌

体的生长与代谢

13.为研究发酵罐中酿酒酵母菌的生长情况,常要取样统计分析,并测定

pH。若某研究人员将样品的次序搞乱了,那么判断取样顺序的主要依据是

(填“酵母菌的数量”或“发酵液的pH”)。

答案:发酵液的pH

14.我国的卫生标准是每1000mL饮用水中大肠杆菌不得超过3个,在培

养基上每1000mL合格饮用水形成的菌落数却大于了3个,原因是

答案:饮用水中还有其他细菌,在伊红美蓝固体培养基上形成的紫黑色菌落

不超过3个,但形成的菌落数远大于3个

15.某同学计划统计污水池中目的菌的总数,他选用IO4、1()5、106稀释液

进行平板划线,每种稀释液都设置了3个培养皿,从设计实验的角度看,还应设

置的一组对照实验是,此对照实验的目的是

O

答案:不接种的空白培养基检验培养基灭菌是否合格

16.经多次规范操作、重复实验,血平板上均出现

的菌落,初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌,但鲜牛奶供应商仍认为此菌并

非鲜牛奶所携带,因此,要对本操作进行完善,完善的方案是

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

答案:金黄色葡萄球菌为增强实验结论的严谨性,应增加空白对照组

二传统发酵技术

1.果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的比较

项目制作泡菜并检测亚

果酒和果醋的制作腐乳的制作

内容硝酸盐含量

果酒:酵母菌;果

作用菌种毛霉乳酸菌

醋:醋酸菌

(1)酵母菌在无氧毛霉等微生物产生

乳酸菌在无氧条件

条件下将葡萄糖转的酶将豆腐中的蛋

原理下,将葡萄糖分解

化成乙醇;白质、脂肪分解成

成乳酸

(2)醋酸菌在有氧小分子有机物

条件下将乙醇变为

乙醛,再将乙醛变

为醋酸

新鲜葡萄(或苹果大白菜、花椰菜等

原料选择豆腐

等)新鲜干净的蔬菜

挑选葡萄

让豆腐上

;

长出毛霉

冲洗

(选树[配,1盐水)

♦(加调;料,装坛)

榨汁加盐腌制

实验流程

1

国助测定亚

醋酸

psWl加卤汤装瓶一硝酸盐

1发酵1一发酵

1

密封腌制

果酒果醋

充气口

排气口

制作装置令

接种毛霉后

出料口出息加盐腌制

[提醒]微生物发酵过程中灭菌措施的分析

微生物发酵过程应该从原料、装置和实验过程三个层次进行无菌操作。

(1)果酒与果醋制作中原料的消毒

①榨汁前葡萄应先冲洗再除去枝梗,因为若先除去枝梗则会使一些微生物侵

入果实内部,影响果酒的制作。

②体积分数为70%的酒精杀菌效果最强,若酒精浓度过低,杀菌效果弱,而

浓度过高,又会使菌体表面蛋白质凝固形成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中,

从而使杀菌效果受到影响。

新题素养训练

1.(2020•高考全国卷II)研究人员从海底微生物中分离到一种在低温下有催

化活性的a-淀粉酶A3,并对其进行了研究。回答下列问题:

(1)在以淀粉为底物测定A3酶活性时,既可检测淀粉的减少,检测应采用的

试剂是,也可采用斐林试剂检测的增加。

(2)在A3的分离过程中可采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其纯度,通常会在凝

胶中添加SDS,SDS的作用是_____________________________________________

和0

(3)本实验中,研究人员在确定A3的最适pH时使用了三种组分不同的缓冲

系统,结果如下图所示。某同学据图判断,缓冲系统的组分对酶活性有影响,其

判断依据是o

—0O

9O

58O

起7O

赃6O

5O

遵4O

玄3O

毋2O-口NazHPO^KH2PO,缓冲系统

1O•Tris-HCl缓冲系统

oGly-NaOH缓冲系统

06.07.08.09.010.0

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