临床检验基础课件

臨床檢驗基礎

胃液及十二指腸引流液的檢驗要求：

1、瞭解胃液和十二指腸引流液的含義，標本的採集、適應症與禁忌症

2、熟悉檢驗的專案、檢驗方法及臨床意義第一節胃液檢驗一、胃液成分

胃液（Gastricjuice）是胃粘膜各種不同細胞所分泌的消化液。純淨的胃液是一種無色透明的酸性液體。主要成份有鹽酸，各種酶，粘液，內因子，電解質及一些肽類激素等。1、鹽酸（hydrochloric）：由壁細胞所分泌，其主要功能是啟動胃蛋白酶原轉化為胃蛋白酶，消化蛋白質，鹽酸還能抑菌，殺菌，促進胰液分泌和有助於鈣鐵的吸收。2、胃蛋白酶（pepsin）：由主細胞分泌，是胃液內最主要的消化酶，其含量代表胃液的消化能力。3、粘液（mucus）：由胃粘膜表面上皮細胞和粘液細胞所分泌，其主要功能是形成粘液屏障，保護胃粘膜免受酸、胃蛋白酶及其他有害物質的損傷等。4、碳酸氫鹽：由粘液細胞所分泌，構成覆蓋於胃壁表面的粘液－碳酸氫鹽屏障，對胃粘膜起保護作用。5、內因子（intrinsicfactor）：胃粘膜分泌的一種糖蛋白，其主要功能是促進腸道對Vit

B12的吸收，內因子缺乏可引起惡性貧血。6、胃泌素（gastrin）：由胃粘膜G細胞分泌，其主要作用是促進胃酸分泌。還有刺激胃蛋白酶和內因子分泌及營養胃腸粘膜的作用。7、前列腺素（PG）：人體胃腸組織均能合成PG，以胃粘膜最豐富。PG能防止胃內有害物質對粘膜的損傷及整體性刺激對胃粘膜的傷害。

胃液成分極其複雜，除以上成分外，還有許多電解質和非消化酶等，如乳酸脫氫酶（LDH）、天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、鹼性磷酸酶（ALP）等。除胃粘膜分泌的物質外，還有少量唾液中的物質如澱粉酶等。若有十二指腸液，胃液中還可出現膽汁酸等。二、胃液檢查的適應症與禁忌症1、胃液檢查的適應症有：（1）疑有低胃酸分泌或無胃酸分泌的疾病，如惡性貧血，胃粘膜巨大肥厚症等、血管活性腸肽瘤等。（2）疑有高胃酸分泌的疾病，如胃沁素瘤等。（3）用胰島素試驗迷走神經切除術的可能性。（4）確定有無胃液瀦留並測定胃排空速度。（5）觀察某些藥物的治療效果。（6）決定胃潰瘍手術的方式等。2、胃液檢查的禁忌症有：

（1）食管V曲張，食管狹窄，食管腫瘤等；（2）嚴重心臟病，高血壓，主動脈瘤等；（3）休克或妊娠晚期；（4）胃大出血患者。三、胃液標本的採集

一般由臨床醫師或有經驗的護士採集。採用插胃管法，檢驗前12小時禁食，禁水和禁服抗酸分泌的藥物，插管成功後抽胃液，連續抽１小時的胃液，全部作為空腹胃液送檢，然後再給五肽胃泌素刺激劑連續采胃液１小時，（每１５分鐘留一份，共４份）用於測MAO與PAO。四、胃液的檢驗主要包括理學檢查，化學檢查及顯微鏡檢查（一）理學檢查：包括量，色，粘液，氣味，食物殘渣，組織碎片，PH,分層等。1、量正常情況下日分泌量為2.5~3.0L，夜間400~500ml，空腹F為1.2~1.5L、正常空腹12h的胃液殘餘量約50ml，正常基礎胃液量為10~100ml。

1）、大於100ml為胃液增多，見於十二指腸。胃泌素瘤；幽門梗阻，胃蠕動功能減退；十二指腸液反流等。

2）、小於10ml為胃液減低，主要見於萎縮性胃炎或胃蠕動功能亢進。

2、顏色正常胃液為無色透明液體或略帶乳白色，含液及粘液多時可呈灰白色．有膽汁返流液時呈黃綠色，見於幽門關閉不全或十二指腸狹窄，紅色表示有鮮血，少量紅色絲多由插管或抽吸時損傷粘膜所致．咖啡渣樣則為胃癌，胃潰瘍及胃炎等病的陳舊性出血．３粘液正常胃液有少量分佈均勻的粘液．若出現大量粘液提示胃有炎症，特別是慢性胃炎．4氣味正常胃液可略帶酸味。5食物殘渣正常胃液在１２小時後胃內無食物殘渣．若有食物殘渣或呈食糜樣，表示胃蠕動功能減退，幽門狹窄或梗阻，胃擴張，胃下垂等引起的胃排空延長，有胃滯留．6組織碎片正常胃液中無組織碎片，若出現組織碎片可見於胃癌，胃潰瘍患者．7

PH值正常為０.９～１.８，PH３.５～７.０為低酸，PH＞７.０為無酸．１）胃酸減低見於萎縮性胃炎，胃癌，繼發性IDA．胃擴張，甲亢等．２）胃酸增多：見於十二指腸球部潰瘍，胃泌素瘤，幽門梗阻，慢性膽囊炎等．8分層正常分兩層，上層為粘液，下層為胃液．病理時則下層混濁不清或有食物殘渣及其他可見成分於下層．（二）化學檢查檢查的專案很多，常做的有：胃酸分泌量測定，尿素測定，乳酸測定等．１，胃酸分泌測定－－五太泌素法檢測BAO,PAO和MAO

BAO為刺激前的基礎胃酸分泌量

MAO為最大胃酸分泌量（為注射五肽胃泌素後的４次胃酸分泌量的總和．）PAO為高峰胃酸分泌量（為兩次最高胃酸分泌量之和的２倍．）參考值：

BAO(3.9+-1.98)mmol/l

MAO(3~23)mmol/l

PAO(20.6+-8.37)mmol/l

BAO/MAO=0.2臨床意義：１）胃酸分泌增多見於十二指腸潰瘍，胃泌素瘤．２）胃酸分泌減低見於胃潰瘍，胃炎，胃癌，惡性貧血等．２尿素測定原理：幽門螺旋桿菌是人胃內唯一產生大量尿素酶的細菌，而尿素酶非胃粘膜本身所固有，它可分解尿素（urea），故尿素測定是檢查胃內有無HP感染的方法之一。３乳酸測定－－FeCl3法參考值陰性臨床意義：用於觀察胃內食物滯留及協助診斷胃癌．４隱血試驗參考值：陰性５膽汁檢查參考值：陰性（三）顯微鏡檢查

吸取胃液沉澱物鏡檢，必要時染色鏡檢，鏡檢內容同糞便檢查．臨床意義第二節十二指腸引流液檢查十二指腸引流液（duodenalfluiddrainge）包括十二指腸液（D液）、膽總管液（A膽汁）、膽囊液（B膽汁）和肝膽總管液（C膽液）；實際上，是十二指腸液、胰液、膽汁、少量胃液的混合物。檢查的適應症有：1）疑有肝膽系統感染者；2）疑有傷寒帶菌者；3）檢查胰腺外分泌功能者；4）疑有腫瘤時進行細胞學檢查者；5）低張十二指腸X線造影者。檢查的禁忌症：同胃液檢查標本採集空腹12小時狀態下，插入十二指腸引流管採集，儘量避免胃液的影響。插管成功後首先引流出D液，然後給予330g/L溫硫酸鎂刺激Oddi括約肌使之鬆弛，依次引流出A膽汁，B膽汁和C膽汁，採集D、A、B、C液後立即送檢。檢查內容：理學檢查、顯微鏡檢查、化學檢查、細菌學檢查理學檢查正常人十二指腸引流液的理學特性專案D液A膽汁B膽汁C膽汁量(ml)10~2010~2030~60隨引流時間而異顏色無色或淡黃色金黃色深褐色檸檬黃色透明度透明或微混透明透明透明粘稠度較粘稠略粘稠粘稠略粘稠pH7.67.06.87.4比密1.009~1.0131.026~1.0321.007~1.010絮狀物少量無無無1、膽汁排出異常1）無任何膽汁排出；2）無B膽汁排出；3）B膽汁流出增多。2、膽汁粘稠度異常引流出異常粘稠膽汁，多見於膽石症；引流出稀薄膽汁，多見於慢性膽囊炎。3、膽汁透明度異常膽汁混濁：見於大量胃液混入。出現較多絮狀物：見於十二指腸炎、膽管炎、膽結石、消化性潰瘍、胰頭癌等。4、顆粒沉澱物和膽砂見於膽石症5、顏色異常

1）出現血絲：多因插管損傷。

2）血性：見於急性十二指腸炎症、消化性潰瘍，膽囊癌等。

3）污穢陳舊血塊：見於膽囊癌。

4）白色：粘液增多所致。

5）膿性：見於化膿性膽囊炎。

6）綠色或黑褐色：見於膽管擴張伴感染或膽石症。顯微鏡檢查由於胰酶有迅速消化和破壞細胞的作用，因此，最好在引流液中加入40%甲醛溶液6~8滴以固定其細胞形態直接將標本沉渣塗片或者離心沉澱塗片鏡檢一、細胞類：

1）紅細胞；

2）白細胞；

3）上皮細胞；

4）腫瘤細胞；二、結晶

正常無結晶膽石症時可出現相應的結晶：常見為膽固醇結晶、膽紅素結晶和膽紅素鈣結晶等。三、粘液正常引流液中可有少量粘液：粘液增多可見於十二指腸卡他性炎症和膽管炎。四、病原體1、寄生蟲及蟲卵：病理下常在B膽汁中發現藍氏賈第鞭毛蟲滋養體、華支睾吸蟲卵、鉤蟲卵、蛔蟲卵、糞圓線蟲蚴蟲、阿米巴滋養體等。2、細菌：正常膽汁中無細菌。膽管感染的主要致病菌是革蘭氏陰性桿菌，也可有混合感染。常用的檢查方法有直接塗片法和培養法。化學檢查主要是對胰腺外分泌功能進行檢查，為促胰酶素－促胰液素試驗。檢查原理：給患者注射促胰酶素和促胰液素，通過十二指腸引流管採集胰液，檢查胰液流出量，胰液中HCO3－濃度和澱粉酶的排出量用於評價胰腺的外分泌功能。參考值：1）胰液流出量：70~230ml/h。2）最高HCO3－濃度：70~125ml/L。3）澱粉酶：880~7400U/kg體重。臨床應用1、協助診斷某些寄生蟲病2、判斷膽石性質3、診斷傷寒帶菌者4、診斷胰腺疾病。精液和前列腺液的檢驗要求：１.瞭解精液、前列腺液的含義、成分、標本的採集、檢驗專案及目的。

2.熟悉精液、前列腺液常規檢驗的專案、方法及臨床意義。

第一節精液檢驗一.精液檢驗標本採集（一）採集方法１.手淫法２.體外排精法（二）注意事項１.標本採集的時機２.標本採集的次數３.標本轉運４.不完整的精液標本不宜進行精液分析二、精液常規檢驗主要專案：理學檢查（顏色、量、液化時間、粘稠度、ＰＨ）；鏡檢（精子活率、精子活力、精子密度、精子形態檢查、其他細胞、病原體等）。（一）理學檢查１．外觀和氣味正常剛射出的精液有一股腥味，呈乳白色或灰白色．２．精液量３．精液液化４．精子粘稠度５．ＰＨ（二）顯微鏡檢查１精子活力分析１）精子活動率檢查精子活動率（％）＝活動精子數／（活動精子數＋不活動精子數）*１００２）精子活動力檢查０級不活動，死精子．

Ⅰ級活動不良，活動遲鈍，原地轉動．

Ⅱ級活動較好，精子活動，但方向不定．

Ⅲ級活動良好，精子呈直線運動．正常精液於排精後１小時Ⅲ級活動精子≥６０％，若０級和Ⅰ級的精子≥４０％視為異常．２．精子密度與精子總數檢查１）粗略估計法２）精子計數原理試劑操作計算精子數／Ｌ＝５個中方格的精子數＊稀釋倍數＊５＊１０＊１０６精子總數：精子密度＊精液量（ml）／１０３３）臨床意義參考值：正常精子密度（２０～２００）＊１０９／Ｌ一次精子總數為（４０～６０）＊１０９３.精子形態學檢查①正常精子（見圖）②異常精子（見圖）③未成熟的生殖細胞（見示意圖）４.其他細胞：ＲＢＣ、ＷＢＣ、腫瘤Ｃ三.精子穿透試驗１.體內穿透試驗２.體外穿透試驗四.化學檢查精液中某些生化指標的改變對男性病的診斷及治療有主要意義．如ＡＣＰ、ＬＤＨ－Ｘ、精子頂體酶、Zn、精漿檸檬酸、精漿果糖等。五.免疫學檢查近年來免疫學檢查迅速發展，如：１.抗精子抗體（AsAb）：①混合抗免疫球蛋白試驗（MAR）②免疫珠試驗③精子凝集試驗２.精漿免疫抑制物質３.精漿免疫球蛋白測定六.微生物學檢查１.細菌２.支原體３.病毒４.原蟲七.精子分析系統第二節前列腺液檢查

前列腺液為前列腺外分泌功能分泌的前列腺液占精液的３０％，為乳白色液體。前列腺液的主要成份：電解質、酶、免疫物質、有形成份及其他一些物質。檢查目的：用於慢性前列腺炎、病原性微生物及性傳播疾病的診斷。一.標本的採集二.理學檢查量、色、粘稠度、ＰＨ三.鏡檢１.直接塗片鏡檢①卵磷脂小體②血細胞１）ＲＢＣ２）ＷＢＣ３）上皮Ｃ③前列腺顆粒細胞④澱粉樣體⑤精子⑥結石⑦其他２.塗片染色鏡檢①腫瘤細胞檢查②細菌學檢查四.化學檢查五.微生物學檢查——細菌培養六.小結陰道分泌物及羊水的檢查要求：

1、瞭解陰道分泌物（白帶）及羊水的概念及及標本的採集。

2、掌握陰道分泌物常規檢查的專案、方法及結果報告與臨床意義。

3、瞭解羊水檢驗的內容及臨床意義。第一節、陰道分泌物檢查陰道分泌物（Vaginaldischarge）是女性生殖系統分泌的液體，主要由聯接關係粘膜，宮頸腺體，前庭大腺及子宮內膜的分泌物混合而成，俗稱“白帶”（Leucorrhea)。陰道結構與功能：

1、新生兒到青春期；

2、青春期後；

3、幼女期、絕經期。標本的採集：通常由婦產科醫師採集檢查的主要專案：一般性狀檢查、清潔度、寄生蟲、微生物等。（一）、一般性狀檢查：正常陰道分泌物為白色稀糊狀，無氣味、量多少不等。異常的有下列情況：

1、大量無色透明粘性白帶；

2、膿性白帶

3、豆腐渣樣白帶；

4、血性白帶；

5、黃色水樣白帶；

6、奶油狀白帶。（二）清潔度檢查：陰道清潔度（cleaningdegree）是根據高倍鏡下所見的上皮細胞、白細胞（或膿細胞）、陰道桿菌與雜菌的數量判斷劃分清潔度為I~IV級。參考值：I、II度（無致病菌和特殊細胞）臨床意義：（三）寄生蟲檢查

1、直接塗片檢查：多見TV，其他：阿米巴、絲蟲。

2、乳膠凝集試驗。（四）微生物學檢查

1、真菌

2、淋病奈瑟菌

3、陰道加德納菌

4、衣原體

5、梅毒螺旋體

6、其他細菌：杜克雷嗜血桿菌、杜諾凡菌

7、病毒（1）、單純皰疹病毒（HSV）（2）、人巨細胞病毒（HCMV）（3）、人乳頭狀病毒（HPV）五、小結第二節羊水檢驗一、概論：羊水：為婦女妊娠期間羊膜腔中的液體。

1、羊水的來源：主要是由母體血漿通過胎膜進入羊膜腔的漏出液，亦有少量由胎兒皮膚透析而來。

2、羊水的代謝：母體－胎兒－羊水間不斷進行液體交換，使羊水量保持相對恒定，羊水每3h可更新一次。3、羊水量：隨胎齡而增加。妊娠8W時為5~10ml；

12W：50ml；

16W:150~250ml；

20W:300~400ml；

36~38W：800~1200ml；以後逐漸減少，足月時為500~800ml。4、羊水成分：羊水中，水分占98~99%，1~2%是溶質，其中半數是有機物和無機鹽，尚有少量為WBC和上皮細胞。5、羊水檢驗的目的（臨床應用）6、適應症

1）高危妊娠有引產指征，需瞭解胎兒成熟度及測定胎盤功能，以選擇分娩的有利時機，降低圍產兒的死亡率。

2）既往有多次原因不明的流產，早產或死胎，疑有胎兒遺傳性疾病者。

3）需除外染色體異常者。

4）性連鎖遺傳病攜帶者需確定胎兒性別時。

5）身經百戰有母兒血型不合，需檢查羊水中血型物質及膽紅素，確定治療措施及判斷預後。

6）妊娠早期接受過大劑量電離輻射或患過嚴重病毒感染性疾病。

7）檢查胎兒有無宮內感染。7、標本的採集：由婦產科醫師採集，一般選擇妊娠16~20W經羊膜穿刺，抽取羊水20~30ml送檢。二、羊水的理學檢查

1、一般性狀正常為無色透明或淡黃液體。

2、比密及pH。

3、滲透壓及粘度。

4、量。參考值：（1）B型超聲探測法AFV＞7cm為羊水過多

AFI＞18cm為羊水過多（2）直接法和間接法妊娠16W時約為250ml妊娠晚期約1000ml臨床意義：

1、羊水過多見於：（1）胎兒畸形（2）胎兒臍帶病變（3）孕婦及胎兒各種疾病（4）多胎妊娠（5）特發性羊水多

2、羊水過少見於：（1）胎兒畸形；（2）過期妊娠；（3）胎兒宮內發育遲緩三、羊水的化學檢查

1、電解質：K+、Na+、Cl-、Ca2+、Mg2+。

2、有機成份：蛋白、脂肪、膽紅素、葡萄糖、代謝產物、AFP、酶類、激素等。四、羊水細胞

1、胎膜的細胞

2、胎兒表皮脫落細胞五、胎兒成熟度檢查胎兒成熟度檢查的主要方法是通過檢測羊水中某種成份的消長來平價相關器官的功能狀況。（一）肺成熟度的檢查

1.羊水泡沫試驗

2.薄層色譜法

3.磷脂醯甘油測定

4.羊水吸光度測定

5.螢光偏振微粘度測定臨床意義檢查胎兒肺成熟對診斷新生兒特發性呼吸宭迫綜合征（IRDS）有重要價值。（二）腎成熟度檢查

1.羊水肌酐測定參考值：≥176.8µmol/L表示胎兒腎成熟

≤131.7µmol/L表示腎未成熟臨床意義羊水肌酐是一項反映胎兒腎成熟度的可靠指標。

2.羊水葡萄糖測定參考值：＜0.56，提示胎兒腎發育成熟。＞0.80，提示胎兒腎未發育成熟。臨床意義羊水葡萄糖（AFG）主要來源於母體血漿，部分來自胎尿。測定AFG可以反映胎兒腎發育情況。（三）肝成熟度檢查羊水中膽紅素濃度與肝酶系統發育成熟有關，可用分光光度計直接檢測羊水中膽紅素。

參考值：Ａ450<0.02，提示胎兒肝成熟，

>0.04，提示胎兒肝未發育成熟。臨床意義檢測羊水膽紅素作為判斷胎兒肝成熟度的一個指標，還可以還可以輔助診斷胎兒溶血及評估溶血進展情況，為臨床處置提供依據。（四）皮膚成熟度檢查計數羊水中脂肪細胞的百分率可作為胎兒皮膚成熟度的指標。將羊水沉澱物用硫酸化羅藍染色，鏡檢脂肪細胞的出現率。參考值：脂肪細胞百分率＞20%，提示胎兒皮膚成熟，＜10%，為胎兒皮膚未成熟。臨床意義羊水中的脂肪細胞，來自胎兒皮膚腺及汗腺的脫落細胞，可作為評價胎兒皮膚成熟度的指標。（五）唾液腺成熟度檢查羊水中唾液腺型澱粉酶活性在妊娠36周後顯著增高，其活性反映胎兒唾液腺成熟程度。參考值：＞120，為成熟臨床意義羊水中唾液腺型澱粉酶活性快速增高，妊娠36周後其活性顯著上升。可作為判斷胎兒唾液腺成熟的指標。

六先天性遺傳性疾病產前診斷（一）產前診斷和疾病種類

1.產前診斷

2.產前診斷疾病的種類

1）染色體病

2）單基因遺傳病

3）多基因遺傳病（二）染色體核型分析將羊水細胞進行染色體培養及核型分析。（三）先天性遺傳性疾病產前診斷

1.性連鎖遺傳病

1）羊水細胞性染色體檢查

2）性別基因診斷

2.神經管缺陷

1）AFP測定

2）羊水總膽鹼脂酶測定(TCHE)

3）羊水中真性膽鹼酶測定(ACHE)

3.粘多糖沉積病

1）甲苯胺藍定性試驗

2）糖醛酸定性試驗

4.胰腺纖維囊性變

1）r-GT

2）ALP

5.羊水細胞內酶分析

6.分子生物學技術在產前診斷中的應用

1）核酸分子雜交法

①點雜交②印跡雜交：限制酶圖譜法、核苷酸直接探測法、限制內徹酶片斷長度多太性連鎖法。

2）PCR＊小結

痰液和支氣管肺泡灌洗液檢驗要求：

1.瞭解痰標本採集的主要方法，實驗室的內容。

2.熟悉理學檢查、顯微鏡檢查的專案及臨床意義。第一節痰液檢查痰(sputum)是氣管和肺的分泌物。痰液檢查專案：一般性狀檢查、顯微鏡檢查、微生物檢查、生物化學檢查和免疫學檢查一標本採集自然咳痰法、氣管穿刺法、支氣管鏡抽吸法。二理學檢查

1.量

2.色正常人偶有少量白色或灰白色的粘液痰。（1）黃色、黃綠色見於肺炎、肺膿腫等（2）紅色、棕紅色見於肺癌、肺結核、支氣管擴張等（3）鐵銹色見於大葉性肺炎（4）爛桃