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文档简介
1/1一、产品应用ND-2000是目前国内外实验室中使用最为广泛的一款微量分光光度计,其优越的性能、准确的结果赢得了广大用户的好评。该产品可用于以下几个方面:*紫外检测:常规xx波长下检测样品吸光值;*核酸检测:可检测dsDNA、ssDNA、RNA等不同类型核酸的浓度及其在260nm、280nm处的吸光值;*探针检测:检测荧光标记探针的吸光值,可用于去除未能标记探针的样品;*细胞培养物检测:检测细胞培养物在600nm处的吸光值;*蛋白检测:检测普通纯化后蛋白的浓度和280nm处的吸光值;*蛋白标记检测:可检测被BCA、Bradford或Lowry标定的蛋白样品,自动画出标准曲线并计算出待测蛋白质浓度。二、产品简介NanoDrop2000超微量分光光度计是NanoDrop的最新产品,应用液体的表面张力特性,样品体积只需要0.5~2ul,在检测台上,经上下臂的接触拉出固定的光径达到快速、微量、高浓度、免石英管、免毛细管等耗材检测吸收值的优点。此产品设计受专利保护,并在全世界广受欢迎,其准确度与便利性让科学家得以更有效率进行各项研究。NanoDrop2000使用高能量氙灯(pulsedxenonflashlamp)可提供190~840nm的全光谱检测,且不需要暖机,开机后立即使用。搭配高感度CCDarray检测器,检测吸收值可高达300Abs(dsDNA浓度2~15000ng/ul),大部分纯化后的核酸几乎都不需要稀释即可检测。待测样品的均质性是NanoDrop2000的最高要求,一般核酸、蛋白质样品能在检测前以vortexmixer震匀为最佳,若无vortexmixer也应以pipette吸放数次混匀。若担心genomicDNA可能因前述动作而断裂,则改以55?C加热约一分钟,使样品在侦测前呈现均匀状态,以确保2ul具有代表性。检测时选择不同检测模式,可以得到最快速的结果:●NucleicAcid?C吸收光谱、230nm,260nm,280nm吸收值(换算成10mm光径吸收值)、、及核酸浓度。●UV-Vis?C190~840nm间所有波长的吸收值及光谱(以1mm光径吸收值呈现)。●A280蛋白质定量法?C280nm吸收值(换算成10mm光径吸收值)、ratio及蛋白质浓度。仅适用于纯化后的蛋白质,须具有已知的质量消光系数(massextinctioncoefficient)方可计算。●BCA、Bradford及Lowry?C依不同呈色剂提供不同波长吸收值结果,自动画出标准曲线并计算Rsquare,待测蛋白质浓度。*蛋白质检测模式目前提供BCA、Bradford及Lowry三种常见定量呈色剂,因呈色剂随时间会逐渐加深,使用前请详阅试剂说明书并制备不同浓度的标准品,在最佳时间内完成检测,以得到良好的标准曲线。每个标准曲线最多可有七个标准品,每个标准品最多可做五重复。*测蛋白质时样品体积需使用2ul,每个样品检测后需以Kimwipes低尘擦拭纸(编号:34155)擦拭15~20回,以避免呈色剂与蛋白质的残留。BCAmodifiedBradfordMini样品核酸纯BSALowryBradford种类最低浓度2ng/ul0.10mg/ml0.2mg/ml0.2mg/ml100ug/ml最高浓度15000ng/ul(dsDNA)12000ng/ul(RNA)100mg/ml8.0mg/ml4.0mg/ml8000ug/ml15ug/ml100ug/ml浓度范围在浓度范围2-100ng/ul在时,SD为±0.05-102ng/ulCV:±2%(在可侦测的浓度mg/ml范围内皆时,SD为然)±0.10mg/mlCV:±2%浓度范围(在可侦测在的浓度范围100-500内皆然)ug/ml时,SD为±25ug/ml浓度范围在15-50ug/ml时,SD为±4ug/ml浓度大于50ug/ml时,CV为±5%浓度范围大于100ng/ul时,CV为±2%浓度大于10mg/ml时,CV为±2%浓度大于500ug/ml时,CV为±5%三、技术参数:1、波长范围:190-840nm;2、波长精度:1nm;3、分辨率:<1.8nm(FWHMatHg253.7nm);4、其它:1mm光程长度(可自动调整到0.05mm);5、检测下限:2ng/μl(dsDNA);6、检测上限:15000ng/μl(dsDNA);7、吸光率精确度:0.002absorbance(1mm光程);8、吸光率准确性:2%(at0.76at257nm);9、吸光率范围:0.02-300(相当于10mm光程);10、核酸检测周期:<5s;11、体积:14cm×20cm。四、使用方法举例:dsDNA:在主画面点选NucleicAcid,计算机与仪器自动完成联机。依照DNA所溶于之液体准备该溶液(务必确认DNA溶于二次水、TEbuffer或哪一组kit的elutionbuffer)取出1.5ul点在侦测台上,放下上臂后再按Blank。在右上方拉选SampleType选DNA-50,在SampleID位置输入样品名称,将样品混匀,取出1.5ul点在侦测台上,放下上臂后再按Measure。五、结果整理:NanoDrop2000软件在侦测一开始会询问档案欲存至何处,若未指定,则档案会存在上一个使用者的档案内。六、注意事项:1.侦测后立即使用拭镜纸(Kimwipe类)擦拭台面。先取一张将上下台面的液体吸走,再将此laboratorywipe吸过样品的面反折到内部,折迭四次后以单方向多次擦拭台面(DNA擦5次,Protein擦20次)。2.同一滴液体只能做一次侦测,欲重复定量同一样品,请擦掉前一滴,重新取出一滴进行侦测。3.基本上核酸样品可使用1~2ul做测量,随各液体体积特性之不同会有不同体积需求,原则上不超过2ul。并请使用2ulpipette避免体积不足导致液柱无法完整形成。唯蛋白质样品因呈色剂与蛋白质本身特性,务必使用2ul进行侦测。4.当软件跳出错误讯息时,请详细阅读并依指示进行障碍排除。最常发生的情形是在侦测过程液柱并未正确形成,软件会出现以下讯息。可先用肉眼观察液柱是否未完整连接上下台面,或样品内有泡泡,将上臂拉起后,擦掉该滴样品,再重新进行侦测,必要时可将样品体积加大至2ul。5.不可使用含有HydrofluoricAcid(HF)之腐蚀样品,其它无腐蚀性之液体皆可使用。品牌:NanoDrop2000c同一仪器整合了NanoDrop2000的所有特性以及比色皿功能高级微底座座技术双模式——选择比色皿或基座更宽的浓度范围,可以测量很低或很高的浓度比色皿功能可以进行动力学(时间或时间/
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