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文档简介
脑脊液检验
脑脊液(CSF)是存在于脑室和蛛网膜下腔内的一种无色透明的液体,70%来自脑室脉络丛主动分泌和超滤
所形成的液体,30%由大脑和脊髓细胞间隙所产生。生理情况下,正常成人脑脊液总量为120〜180ml(平均
150ml)。
脑脊液具有重要的生理作用:
①缓冲、减轻或消除外力对脑组织和脊髓的损伤。
②调节颅内压。
③供给中枢神经系统营养物质,并运走代谢产物。
④调节神经系统碱贮量,维持脑脊液pH在7.31~7.34。
⑤转运生物胺类物质,参与神经内分泌调节。
一、标本采集与处理
(-)脑脊液检验的适应证和禁忌证
脑脊液检验需要进行腰椎穿刺采集标本。脑脊液穿刺的时机与疾病有关,化脓性脑膜炎于发病后1〜2
天、病毒性脑膜炎于发病后3〜5天、结核性脑膜炎于发病后1〜3周、疱疹性脑膜炎于流行性感冒前驱症
状期开始后5〜7天穿刺采集标本。由于脑脊液标本采集有一定的创伤性,因此,临床应用中必须要严格掌
握其适应证和禁忌证。脑脊液检验的适应证和禁忌证见下表。
脑脊液检查的适应症和禁忌症
适应证禁忌证
有脑膜刺激征者颅内高压者
可疑颅内出血者、脑膜白血病和肿瘤颅内转移者颅后窝占位性病变者
原因不明的剧烈头痛、昏迷、抽搐或瘫痪者处于休克、全身衰竭状态者
脱髓鞘疾病者穿刺局部有化脓性感染者
中枢神经系统疾病推管内给药治疗、麻醉和椎管造影者
(-)标本采集与处理
腰椎穿刺成功后立即测定脑脊液压力,然后留取脑脊液标本于3个无菌试管中,每个试管1〜2ml。第
一管作病原牛物学检验,第二管作化学和免疫学检验,第二管作理学和细胞学检验。标本采集后应立即送
检,并于lh内检验完毕。
因标本放置过久,可造成细胞破坏、葡萄糖等物质分解、细菌溶解等,影响检验结果。脑脊液标本应
尽量避免凝固或混入血液,若混入血液应注明,进行细胞计数时应做校正。
二、理学检查
(一)颜色
肉眼观察脑脊液颜色变化,分别以无色、乳白色、红色、棕色或黑色、绿色等描述。正常脑脊液无色
透明,新生儿胆红素较多可呈黄色。当中枢神经系统有炎症、损伤、肿瘤或梗阻时,破坏了血-脑脊液屏障,
使脑脊液成分发生改变,而导致其颜色发生变化。脑脊液的颜色变化及其常见的原因见表1;脑脊液新鲜出
血与陈旧性出血的鉴别见表2;脑脊液呈黄色称为黄变症,其原因及临床意义见表3。
表1脑脊液常见的颜色变化及临床意义
颜色原因临床意义
无色正常脑脊液、病毒性脑炎、轻型结核性脑膜炎、脊髓灰质炎、神
经梅毒
红色出血穿刺损伤出血、蛛网膜下腔或脑室出血
出血、黄疸、淤滞和梗阻、黄色素、胡萝卜色素、黑色素、脂色
黄色黄变症
素增高
乳白色白细胞增高脑膜炎球菌、肺炎球菌、溶血性链球菌引起的化脓性脑膜炎
淡绿色脓性分泌物增多铜绿假单胞菌性脑膜炎、急性肺炎双球菌性脑膜炎
褐色或黑色色素增多脑膜黑色素肉瘤,黑色素瘤
表2脑脊液新鲜性出血与陈旧性出血的鉴别
项目新鲜性出血陈旧性出血
外观浑浊清晰、透明
易凝性易凝不易凝
离心后上清液无色、透明红色、黄褐色或柠檬色
红细胞形态无变化皱缩
上清液0B试验多为阴性阳性
白细胞不增高继发性或反应性增高
表3脑脊液黄变症的原因及临床意义
黄变
原因临床意义
症
出血
红细胞破坏、胆红素增加陈旧性蛛网膜下腔出血或脑出血
性
黄疸
胆红素增高黄疸性肝炎、肝硬化、钩端螺旋体病、胆管梗阻、新生儿溶血症
性
淤滞
红细胞渗出,胆红素增高卢页内静脉、脑脊液循环淤滞
性
梗阻
蛋白质含量显著增高髓外肿瘤所致的椎管梗阻
性
(二)透明度
肉眼观察脑脊液透明度变化,分别以“清晰透明”、“微浑”、“浑浊”等描述。正常脑脊液清晰透
明。脑脊液的透明度与其所含的细胞数量和细菌多少有关,当脑脊液白细胞超过300X10”/L时、可呈浑浊;
脑脊液中蛋白质明显增高或含有大量细菌、真菌时;也可使脑脊液浑浊。结核性脑膜炎的脑脊液可呈毛玻
璃样的浑浊,化脓性脑膜炎的脑脊液呈脓性或块样浑浊,穿刺损伤性脑脊液可呈轻微的红色浑浊。
(三)凝固性
正常脑脊液放置12〜24小时后不会形成薄膜、凝块或沉淀。脑脊液形成凝块或薄膜与其所含的蛋白质,
特别是与纤维蛋白原的含量有关,当脑脊液蛋白质含量超过10g/L时,可出现薄膜、凝块或沉淀。化脓性
陋膜炎的脑脊液在1〜2小时内呈块状凝固;结核性脑膜炎的脑脊液在12-24小时内呈薄膜或纤细的凝块;
神经梅毒的脑脊液可有小絮状凝块;蛛网膜下腔梗阻的脑脊液呈黄色胶样凝固。
脑脊液同时存在胶样凝固、黄变症和蛋白质细胞分离(蛋白质明显增高,细胞正常或轻度增高),称
^Froin-Norme综合征,这是蛛网膜下腔梗阻的脑脊液特点。
(四)比密
脑脊液比密为:①腰椎穿刺:1.006〜1.008。②脑室穿刺:1.002-1.004«③小脑延髓池穿刺:1.004-
1.008»
凡是脑脊液中的细胞数量增加和蛋白质含量增高的疾病,其比密均增高。常见于中枢神经系统感染、
神经系统寄生虫病、脑血管病、脑肿瘤、脑出血、脑退行性变和神经梅毒等。
三、显微镜检查
1.检测原理
(1)清亮或微浑的脑脊液标本,可以直接计数细胞总数,或稀释后再直接计数,将结果乘以稀释倍数。
(2)可采用直接计数法计数白细胞,或稀释后再直接计数,将结果乘以稀释倍数。
(3)白细胞直接计数后,在高倍镜下根据白细胞形态特征进行分类计数。也可采用"right染色后,
油镜下分类计数。
2.方法学评价
细胞总数计数和分类计数常用显微镜计数法。白细胞直接分类法简单、快速,但准确性差,尤其是陈
旧性标本,细胞变形,分类困难,误差较大。
涂片染色分类法细胞分类详细,结果准确可靠,尤其是可以发现异常细胞如肿瘤细胞,故推荐使用此
法。该法不足之处是操作较复杂,费时。
脑脊液细胞收集有几种方法,离心涂片法常影响细胞形态及分类。目前,玻片离心沉淀法和细胞室沉
淀法已用于脑脊液细胞的浓缩和收集,其优点是收集的细胞形态完整(尤其是细胞室沉淀法),分类效果
好。另外,玻片离心沉淀法阳性率高。
血细胞分析仪进行脑脊液计数和白细胞分类,此法简单、快速,可以自动化。但病理性、陈旧性标本
中的组织、细胞的碎片和残骸以及细胞变形等都可以影响细胞分类和计数,故重复性、可靠性有待进一步
探讨。另外,蛋白质含量高,尤其有凝块的脑脊液标本容易使仪器发生堵孔现象,故不推荐使用。
3.质量控制
(1)细胞计数:①标本采集后应在lh内进行细胞计数。标本放置过久,细胞可能凝集成团或被破坏,
影响计数结果。②标本必须混匀后方可进行检查,否则会影响计数结果。
(2)校正与鉴别:①因穿刺损伤血管,引起血性脑脊液,白细胞计数结果必须校正,以消除因出血带
来的白细胞。②细胞计数时,应注意红细胞、白细胞与新生隐球菌的鉴别。新生隐球菌不溶于乙酸,加优
质墨汁后可见未染色的荚膜;白细胞也不溶于乙酸,加酸后•细胞核和细胞质更加明显;红细胞加酸后溶解。
(3)检查方法:白细胞直接计数法的试管与吸管中的冰乙酸要尽量去尽,否则结果偏低。若标本陈旧、
细胞变形时,白细胞直接分类法误差大,可采用涂片染色分类法分类计数。
(4)染色固定:涂片染色分类计数时,离心速度不能太快,否则会影响细胞形态,可采用玻片离心法、
沉淀室法收集细胞。涂片固定时间不能太长,更不能高温固定,以免使细胞皱缩,影响检验结果。
4.参考值
无红细胞。白细胞极少,成人(0〜8)X106/L,儿童(0~15)X106/L,主要为单个核细胞,淋巴
细胞与单核细胞之比为7:30
5.临床意义
脑脊液白细胞达(10〜50)XIO'/L为轻度增高,(50〜100)X106/L为中度增高,大于200X10$/
L为显著增高。血细胞增高的程度及临床意义见下表。
如表:脑脊液血细胞增高的临床意义
增高程度细胞临床意义
中性粒细胞化脓性脑膜炎
显著
红细胞蛛网膜下腔出血或脑出血,穿刺损伤
轻度或中度早期中性粒细胞,后期淋结核性脑膜炎,且有中性粒细胞、淋巴细胞、浆细胞同时
巴细胞存在的现象
嗜酸性粒细胞寄生虫感染
正常或轻度淋巴细胞浆液性脑膜炎、病毒性脑膜炎、脑水肿
(二)细胞学检查
近年来,常采用玻片离心法、沉淀室法、微孔薄膜筛滤法、纤维蛋白网细胞捕获法等收集细胞,并进
行染色。
常用的染色方法有May-Grunwald-Giemsa染色法、PAS染色法、过氧化酶染色法、脂类染色法、硝基四
氮噗蓝(NBT)染色法和口丫嚏橙荧光染色法等,重点检查脑脊液腔壁细胞、肿瘤细胞和污染细胞。见下表。
如表:脑脊液细胞学检查及临床意义
细胞细胞类型临床意义
脉络丛室管膜细胞脑积水、脑室穿刺、气脑、脑室造影或椎管内给药
腔壁细胞
蛛网膜细胞气脑、脑室造影或腰椎穿刺后,多为蛛网膜机械性损伤所致
肿瘤细胞恶性细胞原发性肿瘤、转移性肿瘤、白血病和淋巴瘤
骨髓细胞穿刺损伤将其带入脑脊液中所致
污染细胞
红细胞穿刺损伤脊膜血管所致
四、化学与免疫学检查
(一)酸碱度
正常脑脊液pH为7.31〜7.34,且相对稳定。中枢神经系统炎症时,脑脊液pH低于正常,化脓性脑膜
炎时脑脊液的pH明显减低,在测定脑脊液的pH的同时测定脑脊液中乳酸含量,对判断病情变化更有参考
价值。
(二)蛋白质
1.检测原理
脑脊液蛋白质的检验有定性和定量两种方法,并可根据需要计算蛋白商(球蛋白/清蛋白)和脑脊液清
蛋白指数(Ralb)。
(1)定性法
1)Pandy试验:脑脊液中的蛋白质与苯酚结合形成不溶性蛋白盐而出现白色浑浊或沉淀。
2)硫酸钱试验:包括Ross-Jone试验和Nonne-Apelt试验。饱和硫酸镂能沉淀球蛋白,出现白色浑浊
或沉淀。若球蛋白增多则Ross-Jone试验阳性;Nonne-Apelt试验可检测球蛋白和清蛋白。
3)Lee-Vinson试验:磺基水杨酸和氯化高汞均能沉淀脑脊液蛋白质,根据沉淀物的比例不同,可鉴别
化脓性和结核性脑膜炎。
(2)定量法:利用比浊法、染料结合比色法和免疫学方法检测脑脊液蛋白质含量。常用的方法为磺基
水杨酸-硫酸钠比浊法。
2.方法学评价
脑脊液蛋白质检验方法较多,不同的方法由于所选用的试剂、条件不同,其灵敏度和特异性也不相同。
其方法学评价见下表。
如表:脑脊液蛋白质检验的方法学评价
分类方法优点缺点
定性操作简便,标本量少,易于观察,灵敏
Pandy试验假阳性率高
法度高
Ross-Jone试验检测球蛋白,特异性高灵敏度低
Nonne-Apelt试
检测球蛋白和清蛋白,特异性高操作繁琐
验
标本用量大,重复性差,影响因
比浊法操作简便、快速,无需特殊仪器
素多
定量
操作快速,灵敏度高,标本量少、重复
法染料结合比色法要求高,线性范围窄
恒:好
免疫学方法标本用量少对试剂要求高
3.质量控制
(1)因穿刺出血,脑脊液可有血液蛋白质混入,可出现假阳性。
(2)试验中所用试管和滴管需十分洁净,否则易出现假阳性。
(3)苯酚不纯可引起假阳性;室温低于10℃、苯酚饱和度减低也可引起假阴性。
(4)人工配制含球蛋白的溶液作阳性对照,可在正常脑脊液或配制与正常脑脊液基本成分相似的基础
液中力同量的球蛋白。
4.参考值
定性:阴性(或弱阳性)。
定量:腰椎穿刺0.2O-O.40g/L;
小脑延髓池穿刺0.10~0.25g/L;
脑室穿刺穿05-0.15g/L;
蛋白商0.4〜0.8;
Ralb:7X103
5.临床意义
脑脊液蛋白质含量增高是血-脑脊液屏障功能障碍的标志。由于脑脊液清蛋白只来自血清,因此,上加
更能反映血-脑脊液屏障完整性。脑脊液蛋白质增高可见于中枢神经系统的感染、梗阻和出血等多种疾病,
其常见的原因见下表1。导致血-脑脊液屏障功能障碍的原因见下表2。
表1:脑脊液蛋白质增高常见的原因
原因临床意义
感染以化脓性、结核性脑膜炎脑脊液蛋白质增高最明显,病毒性脑膜炎则轻度增高
神经根病变常见于急性感染性多发性神经根神经炎,有蛋白质-细胞分离的现象
梗阻脊髓肿瘤、肉芽肿、硬膜外脓肿造成的椎管部分或完全梗阻,可有脑脊液自凝现象
出血脑血管畸形、高血压病、脑动脉硬化症以及全身出血性疾病等
其他肺炎、尿毒症等出现中枢神经系统症状时,脑脊液蛋白质含量也可增高
蛋白商反映了脑脊液球蛋白与清蛋白的比例变化。
①蛋白商增高:提示脑脊液球蛋白含量增高,见于多发性硬化症、神经梅毒、脑脊髓膜炎、亚急性硬
化性全脑炎等。
②蛋白商减低:提示脑脊液清蛋白含量增高,见于化脓性脑膜炎急性期、脑肿瘤、脊髓压迫症等。
表2:导致血-脑脊液屏障功能障碍的原因
屏障障碍的程度可能的原因
多发性硬化、慢性IIIV脑炎、带状疱疹神经节炎、乙醇性多发神经病、
轻度(RAlbl0X10-3)
肌萎缩性侧索硬化
中度(RAlb20X10-3)病毒性脑炎、机会致病菌性脑膜脑炎、糖尿病性多发神经病、脑梗死、
_____________________皮质萎缩_________________________________________________________
_Guillain-Barre综合征、单纯性疱疹脑炎、结核性脑膜炎、化脓性脑膜
重度(RAlb>20X10-3)%
|炎
(三)葡萄糖
1.检测原理
脑脊液葡萄糖含量大约为血糖的50%〜80%(平均60%),其高低与血糖浓度、血-脑脊液屏障的通透性、
葡萄糖的酵解程度有关。脑脊液葡萄糖检验多采用葡萄糖氧化酶法和己糖激酶定量法。
2.参考值
腰椎穿刺:2.5〜4.4mmol/L;小脑延髓池穿刺:2.8~4.2mmol/L;脑室穿刺:3.0~4.4mmol/L»
3.临床意义
(1)葡萄糖减低:①细菌性脑膜炎和真菌性脑膜炎,以化脓性脑膜炎早期减低最明显;②脑寄生虫病
等;③脑肿瘤;④神经梅毒;⑤低血糖昏迷、胰岛素过量所致的低血糖状态。
(2)葡萄糖增高:①新生儿及早产儿;②糖尿病或静脉注射葡萄糖;③脑或蛛网膜下腔出血所致的血
性脑脊液;④病毒性脑膜炎或脑炎;⑤急性颅脑外伤、中毒、缺氧、脑出血等所致丘脑下部损伤等。
(四)氯化物
1.检测原理
由于脑脊液中蛋白质含量较少,为了维持脑脊液和血浆渗透压的平衡(Dorman平衡),氯化物含量约
为血浆的1.2〜1.3倍。氯化物定量检验方法与血清氯化物检验方法相同,测定方法有硝酸汞滴定法、电量
分析法、离子选择性电极法和硫氟酸汞比色法。临床常用电极法。
2.方法学评价
几种脑脊液氯化物检测的方法学评价见下表。
如表:脑脊液氯化物检测的方法学评价
方法优点缺点
硝酸汞滴定操作简便,应用广泛、不需要特影响因素多,准确度差、效率低、多被电极法和
法殊仪器电量法取代
硫氟酸汞比
准确度、精密度良好不适合体液标本检测
色法
电量分析法精密度和准确度高,为参考方法
准确度和精密度良好,为常规方
电极法专用仪器
法
3.参考值:
成人:120〜130mmol/L;
婴儿:110~130mmol/L;
儿童:111〜123mmol/L。
4.临床意义
(1)氯化物减低:①细菌或真菌感染,特别是化脓性、结核性和隐球菌性脑膜炎的急性期、慢性感染
的急性发作期。②细菌性脑膜炎的后期,由于脑膜有明显的炎症浸润或粘连,局部有氯化物附着,使脑脊
液氯化物减低。③呕吐、肾上腺皮质功能减退时,由于血氯减低,使脑脊液氯化物含量亦减低。
(2)氯化物增高:主要见于尿毒症、肾炎、心力衰竭、病毒性脑膜炎或脑炎。
(五)酶学
脑脊液中含有多种酶,如乳酸脱氢酶(LD)、肌酸激酶(CK)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、腺昔脱
氨酶(ADA)、溶菌酶(Lys)等。正常情况下血清酶不能透过血脑屏障,因此脑脊液中各种酶的含量远低
于血清。血脑屏障通透性增高、各种原因引起的脑组织损伤、脑肿瘤、颅内压增高等均可导致脑脊液各种
酶含量增高。脑脊液酶学检查及其增高的临床意义见下表。
如表:脑脊液酶学检查及其增高的临床意义
参考值临床意义
①中枢神经系统感染,以化脓性脑膜炎最明显。②脑出血、蛛
CK(U/L)0.5-2.0
网膜下腔出血。③进行性脑积水、脱髓鞘病、继发性癫痫
Lys(mg/L)无或含量甚微①细菌性脑膜炎,以结核性脑膜炎增高最明显。②脑肿瘤
成人<40,新生儿〈
LD(U/L)①脑组织损伤、感染。②细菌性脑膜炎
70,LD/血清<0.1
AST(U/L)<20脑血管病、脑萎缩、中毒性脑病、中枢神经系统转移癌等
ADA(U/L)0〜8结核性脑膜炎(可作为诊断和鉴别诊断结核性脑膜炎的指标)
(六)蛋白电泳
脑脊液中蛋白质的特点为:
①有较多的前清蛋白。
②B球蛋白较多,且高于血清,而Y蛋白仅为血清的50猊
③清蛋白主要来自血清。
1.方法学评价
脑脊液蛋白质电泳通常用醋酸纤维薄膜或琼脂糖凝胶作为载体,标准电泳条件同血清蛋白电泳。若采
用等电聚焦电泳可提高电泳图谱的分辨率。由于脑脊液中蛋白质含量少,因此在电泳前须将脑脊液标本在
高分子聚乙二醇或右旋糖醉透析液中浓缩。近年来应用高效毛细管电泳法进行脑脊液蛋白质电泳分析可进
一步提高分辨率且脑脊液标本无需浓缩。
2.参考值
前清蛋白3%~6%
清蛋白50%〜70%
a।球蛋白4%〜6%
a2球蛋白蜴〜9%
距球蛋白7%~13%
y球蛋白7%〜8%。
3.临床意义
脑脊液蛋白质电泳的变化及临床意义见下表。
如表:脑脊液蛋白质电泳的变化及临床意义
原因临床意义
前清蛋白脑细胞退行性病变脑萎缩、脑积水和中枢神经系统变性疾病等
脑组织供血不足或脑血管通
清蛋白脑血管病变、椎管梗阻等
透性增高
急性化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、脑膜肿瘤浸润、脑肿
a球蛋白炎症损伤或占位性病变
瘤转移
P球蛋白脂肪代谢障碍或脑组织萎缩动脉硬化、脑血栓、脑组织萎缩退行性变者
免疫、占位性病变或暂时性脱髓鞘病(多发性硬化症、视神经脊髓炎)、中枢神经系
Y球蛋白
脑功能失调统的肿瘤和感染
(七)免疫球蛋白
免疫球蛋白的测定方法有免疫扩散法、免疫电泳法、免疫散射比浊法。经典的凝胶沉淀试验操作繁琐、
灵敏度低,耗时长且不能自动化操作•免疫比浊测定法具有灵敏、快速且能自动化检测的优点。脑脊液免
疫球蛋白为:IgG:10〜40mg/L,IgM:0~0.22mg/L,IgA:0-6mg/L»正常脑脊液免疫球蛋白含量极少,
主要为IgG。免疫球蛋白变化的临床意义见下表。
如表:脑脊液免疫球蛋白变化的临床意义
免疫球蛋白临床意义
多见于细菌性脑膜炎、亚急性硬化性全脑炎、多发性硬化症、急性感染性多发性神
IgG增高
经根神经炎,且结核性脑膜炎IgG增高较化脓性明显
IgG减低癫痫、放射线损伤和服用类固醉药物等
多见于化脓性脑膜炎,也见于多发性硬化症、肿瘤和血管通透性改变等。1咖明显增
IgM增高
高可排除病毒性感染
IgA增高多见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎和病毒性脑膜炎等
IgE增高脑寄生虫病
(A)其他检查
1.淋巴细胞亚群
正常脑脊液细胞总数为(0-10)X107L,多为淋巴细胞。中枢神经系统炎症时T淋巴细胞数量减少提
示细胞免疫功能减低;自身免疫性疾病如多发性硬化症时,辅助性T淋巴细胞及B淋巴细胞的绝对值均增
高。
2.抗结核抗体
醉联免疫吸附测定(ELISA)是目前检查脑脊液中抗结核抗体最为简便、最为敏感的方法。
脑脊液中抗结核抗体水平高于患者自身血清,对结核性脑膜炎的诊断及鉴别诊断有参考价值。
3.髓鞘碱性蛋白
髓鞘碱性蛋臼(MBP)是反映神经细胞有无实质性损伤的灵敏指标。
正常脑脊液MBP<4ug/L。90%以上的多发性硬化症的急性期表现为MBP明显增高,50%的慢性活动者
MBP增高,非活动者MBP不增氤因此,MBP是多发性硬化症病情活动的指标。MBP增高也可见于神经梅毒、
脑血管病、颅脑外伤等
4.谷氨酰胺
脑脊液中谷氨酰胺含量可以反映脑组织中氨的含量,正常为0.4〜0.96mmol/L,主要用于肝性脑病的诊
虹正常脑脊液中氨含量大约是动脉血中氨含量的1/3,谷氨酰胺含量为0.4〜0.96mmol/L,晚期肝硬化患
者脑脊液中谷氨酰胺含量明显增高,肝性脑病患者可高达3.4mmol/L以上。
5.乳酸
正常脑脊液乳酸为1.0〜2.9mmol/L。增高可见于:脑组织缺血、缺氧;出血性脑病;化脓性脑膜炎;
过度换气。
五、病原生物学检查
(一)细菌学检查
1.显微镜检查
脑脊液涂片革兰染色或碱性亚甲蓝染色检查致病菌。革兰奥色用于检杏肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、
葡萄球菌、铜绿假单胞菌、链球菌、大肠埃希菌等;碱性亚甲蓝染色用于检查脑膜炎球菌。显微镜检查对
化脓性脑膜炎诊断的阳性率为60%〜90缸如果怀疑为结核性脑膜炎,可采用抗酸染色,油镜下寻找抗酸杆
菌•新生隐球菌检查常采用印度墨汁染色法,若呈假阳性,可采用苯胺墨染色法。
2.细菌培养
主要适用于脑膜炎奈瑟菌、链球菌、葡萄球菌、大肠埃希菌、流感嗜血杆菌等。同时,也要注意厌氧
菌、真菌的培养。
3.ELISA
检测结核杆菌抗体:结核杆菌感染时,可产生特异性的抗结核抗体,可采用最简便、灵敏度高的ELISA
检测此抗体。如果脑脊液中抗结核抗体水平高于血清,这对结核性脑膜炎的诊断及鉴别诊断具有特殊价值。
(二)寄生虫检查
1.脑脊液涂片检查
可发现血吸虫卵、肺吸虫卵、弓形虫、阿米巴滋养体等。
2.脑囊虫检查
脑囊虫补体结合试验诊断脑囊虫的阳性率可达88%;致敏乳胶颗粒玻片凝集试验诊断脑囊虫的符合率为
90%;ELISA法对诊断脑囊虫病具有高度的特异性。
3.梅毒螺旋体检查
神经梅毒的诊断首选灵敏度、特异性均很高的螺旋体荧光抗体吸收试验(FTA-ABS);其次选用性病研
究实验室玻片试验(VDRL),其灵敏度为50%〜6(»,特异性为90%。现多使用快速血清反应素试验(RPR)
为筛检,梅毒螺旋体微粒凝集试验(TPPA)为梅毒确诊试验。
六、质量控制与临床应用
(-)质量控制
为了给临床诊断提供准确的依据,必须严格质量控制,以保证结果的准确性。因此,脑脊液检验的质
量控制应注意统一操作规程、加强室内质控等。
1.规范操作规程
由于操作方法和判断标准的不统一,不仅为临床诊断、观察疗效和判断预后带来困难,也不利于开展
脑脊液检验的室内评价。因此,脑脊液检验应统一操作规程,采用标准化的检验方法,并定期检查各种试
剂的质量及仪器的性能。
目前,脑脊液细胞计数和分类计数的室内质控尚无理想的方法。为了提高检验质量,应该:①严格操
作规程,控制各种影响因素。②白细胞分类采用染色分类法,采用玻片离心沉淀法或细胞室沉淀法收集细
胞。
2.设立阳性和阴性对照或质控物
①脑脊液化学和免疫学检验应选择灵敏度和特异性高、操作简便的方法。
②定性检验:每次都应做阳性和阴性对照,以保证结果的准确性和可靠性。定量检验:使用定值质控
物伴随常规检验做室内质控,提高检验结果的可靠性和可比性。
(二)临床应用
1.诊断与鉴别诊断中枢神经系统感染性疾病
对于脑膜炎或脑炎的患者,通过检查脑脊液压力、颜色,并对脑脊液进行化学和免疫学、显微镜检查,
不仅可以确立诊断,而且对鉴别诊断也有极大的帮助。另外,对细菌性和病毒性脑膜炎的鉴别诊断也可选
用乳酸脱氢酶、腺甘脱氨酶、溶菌酶等指标。
2.诊断与鉴别诊断脑血管疾病
头痛、昏迷或偏瘫的患者,其脑脊液为血性,首先要鉴别是穿刺损伤出血还是脑出血、蛛网膜下腔出
血。若脑脊液为均匀一致的红色,则可能为脑出血、蛛网膜下腔出血;若第1管脑脊液为红色,以后逐渐
变清,则多为穿刺损伤出血;若头痛、昏迷或偏瘫患者的脑脊液为无色透明,则多为缺血性脑病。另外,
还可选用乳酸脱氢酶、天冬氨酸氨基转移酶、磷酸肌酸激酶等指标诊断或鉴别诊断脑血管病。
3.辅助诊断脑肿瘤
大约70%恶性肿瘤可转移至中枢神经系统,此时的脑脊液中单核细胞增加,蛋白质增高,葡萄糖减少或
正常。因此,脑脊液细胞计数和蛋白质正常,可排除肿瘤的脑膜转移。若白血病患者脑脊液发现白血病细
胞,则可诊断为脑膜白血病。脑脊液涂片或免疫学检查发现肿瘤细胞,则有助于肿瘤的诊断。乳酸
脱氢酶(LD)、磷酸己糖异构酶(PHI)、溶菌酶等指标也有助于肿瘤的诊断。
4.诊断脱髓鞘病
脱髓鞘病是一类颅内免疫反应活性增高的疾病,多发性硬化症是其代表性疾病。除了脑脊液常规检查
外,髓鞘碱性蛋白、免疫球蛋白等检查也有重要价值。
常见脑或脑膜疾病的脑脊液检验结果见下表,脑脊液实验室检查对疾病的诊断灵敏度(S)和特异性(Sp)
见下表,脑脊液检查项目分类见下表。
如表:常见脑或脑膜疾病的脑脊液检验结果
疾病外观凝固蛋白质葡萄糖氯化物细胞增高细菌
化脓性脑膜炎浑浊凝块tt11II显著,多核细胞化脓菌
结核性脑膜炎浑浊薄膜t11I中性,淋巴结核菌
病毒性脑膜炎透明或微浑无t正常正常淋巴细胞无
隐球菌性脑膜炎透明或微浑可有tt11淋巴细胞隐球菌
流行性乙脑透明或微浑无t正常或t正常中性,淋巴无
脑出血而「性可有ttt正常红细胞
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