DB34∕T 3649-2020 水产品中磺胺类药物残留量的测定 酶联免疫吸附法

65.150

52DB34

水产品中磺胺类药物残留量的测定酶联免疫吸附法Determination

of

residues

of

in

aquatic

Products

安徽省市场监督管理局

DB34/T

2020前 言

DB34/T

2020水产品中磺胺类药物残留量的测定 酶联免疫吸附法

本标准规定了水产品中磺胺类药物残留量的测

酶联免疫吸附法的原理、试剂和材料、仪器和设

农业部

1077号公告-1-2008

水产品中17种磺胺类及15种喹诺酮类药物残留量的测定

液相色谱-

板上包被的磺胺类药物的二抗结合，加

TMB

底物后的颜色与试样中磺胺类药物的含量成反比，用酶标仪在

450

除另有说明外，所用试剂均为分析纯；用水应符合

GB/T

6682

4.1

4.2

4.3

4.4

4.5

氯化钠溶液[2

4.6

——2℃～8℃保存，组成参见附录

A。

96

孔酶标板：包被有抗磺胺类药物抗体的捕获抗体（二抗），8

孔/条12

DB34/T

2020

10

20

4.7

——按

10

个月。4.8

——按

20

个月。

5.1

5.2

5.3

5.4

5.5

5.6

5.7

氮气吹干装置：温控范围：室温～100℃。5.8

恒温培养箱：温控范围：0℃～60℃，温度均匀度：±0.5℃5.9

L、100

L、500

L；

L。

个月。

DB34/T

2020所有操作应在

20℃～25℃室温下进行。试剂盒及所有试剂，使用前应提前

60

min

以上取出，回

称取试样

0.02

50

mL

mL

10

离心力

4000

离心

10

mL

50

mL

离心管中，加入

mL

mL

离心

min；

10

mL

吹近干；加

mL

mL

min，离心

此最终试液体积（v）为

0.5

g。

录对应位置。每孔加

50

标准工作液或试液，50

HRP

标记的磺胺类药物抗原，50

物抗体，用一次性吸头上下吸附振荡

次，轻轻振荡微孔板混匀

min，盖板膜，放入恒温培养箱中

60

250

振荡

15

100

15

100

终止液（4.6.8），轻振荡混匀，稳定

min，用酶标仪于

450

nm

波长处测量吸光度值(读数前，使用无绒布擦拭微孔底部水分和指模)。

除不加试样外，其余均按

进行。

用所获得的标准工作溶液和试样溶液吸光度值的比值进行计算，见式(1)：相对吸光度值A(％)=

×100％

..............................

(1)

0——浓度为

以相对吸光度值(％)为纵坐标，标准点浓度（ng/mL）为横坐标建立标准曲线。算得试样中磺胺类

X=c×

..................................

(2)DB34/T

2020g/kg）；v——检测液最终体积，单位为毫升（mL）；

g/kg～10

g/kg的空白添加回收率范围为

本方法测定结果为阳性的样品，应按农业部

DB34/T

2020 A.1

96

12

A.3

A.4

A.5

A.6

终止液

.......................................

...................

6×0.8

ng/mL

.........................................

0.8

mL

(Sulfonamide

Antibody)

..........................................

mL

Conjugate)

.............................

mL

Buffer

E)

...................................

25

Solution) ..........................................

28

TMB底物(TMB

..........................................

14

Buffer) ..........................................

12