临床病理基本知识及病理学常用技术

王卓中山大学病理教研室中山大学附一院病理科2021-0607级临床本科病理学的研究范围〔一〕人体病理学尸体解剖〔Autopsy〕活体组织检查〔Biopsy〕诊断病理学细胞学检查〔Cytology〕〔二〕实验病理学动物实验〔AnimalExperiment〕组织和细胞培养〔TissueandCellCulture〕诊断病理学的概念临床实际工作中，许多病例的疾病诊断有赖于对病变器官或组织的病理检查，这种检查称为活体组织检查(biopsy)。病理学关于这方面的实践和理论范畴称诊断病理学(diagnosticpathology)或外科病理学。一、病理诊断的重要性与局限性3．提供疾病严重程度及预后的信息有方案的定期活检有助于了解疾病的动态变化和疗效判断；恶性肿瘤的组织学类型不同，预后不同；肿瘤有无转移，预后不同；有无激素受体，对治疗的敏感性和效果不同。4．帮助临床判断疗效如：肝穿刺－－判断肝炎的治疗效果移植后穿刺－－判断移植物情况、有无排斥骨髓穿刺－－白血病治疗疗效，骨髓移植后情况5．其它如：系统、完整的病理资料为科研积累资料；尸体解剖有助于认识新的疾病或疾病类型。〔二〕病理诊断的局限性1．形态学的局限性只能对有形态学改变的疾病，尤其是对有特征改变的疾病作出诊断。对无明显形态学改变的功能性或代谢性疾病，病理学检查不能确诊。同形异病同病异形2．小块活检组织的“代表性〞有限3．取材、标本固定及制作的影响4．病理医生的主观性病理诊断受病理医师的经验和思维方式影响，带主观性和经验性。5．局部特殊病例成为疑难病例二、病理标本的采集和送检〔一〕活检小标本1．淋巴结活检当一组淋巴结肿大时，各个淋巴结的病变常常是不同步的。假设一组多个淋巴结肿大，勿取最小淋巴结；尽可能将淋巴结完整取出；假设多组淋巴结肿大，勿取腹股沟淋巴结；假设疑为淋巴瘤，勿要求冰冻报告。

肿物或器官切开的方法：

肿块：沿最长径线切第一刀，以后切面与第一刀平行，切忌横一刀，竖一刀。脂肪组织、骨组织、大量钙化组织不能做冰冻！！！冰冻切片冰冻切片(四)体液(胸腹水、尿、脑脊液、痰)的送检：新鲜〔2小时内〕送检或冰箱储存；勿加固定液；沉淀物必须送检；指导病人取痰。三、标本的固定〔一〕固定的意义保存细胞结构：使各种酶灭活，防止组织自溶；促进各种化学成分在原位凝固沉淀。〔二〕固定的时机越快越好，最好不要超过离体后2小时四、病理标本的长期保存根据不同的目的采用不同的标本保存方法：液体保存：如大体标本石蜡包埋：所有活检标本，最常用塑料包埋：如骨髓穿刺标本液氮保存：如需提取DNA、RNA的标本低温冰箱〔低于-20℃保存〕取材固定、脱水、浸蜡包埋切片贴片HE染色封片阅片诊断4.描述性诊断：如血块、坏死物、仅见少许上皮成分等；5.否认性报告：如组织过小、严重变形导致无法诊断疾病〔病变〕肿瘤非特异性炎症特异性炎症(肉芽肿性炎)原发间叶性上皮性良性恶性继发上皮性良性恶性间叶性肿瘤七、病理报告阴性或过失的原因1〕取材失当2〕制片质量差3〕病理医生经验缺乏或阅片匆忙草率4〕疾病形态的复杂性和病理检查的局限性假设病理报告与临床不符，临床与病理医生必须沟通、讨论。正确评价病理科的功过。1.组织化学2.免疫组织化学〔IHC〕3.电子显微镜4.基因芯片、蛋白芯片、组织芯片5.激光显微切割〔LMD〕6.原位分子杂交〔ISH〕、荧光原位分子杂交〔FISH〕7.比较基因组杂交〔CGH〕一、组织化学原理：利用组织或细胞内的化学成分与外加的化学试剂进行化学反响或酶底物反响(显色反响)。普鲁士蓝反响Masson三色嗜银染色

特异性抗体在适当条件下与组织切片中的抗原结合后，通过标记在抗体分子上的酶将显色剂氧化，显色物质沉淀在抗原抗体结合的部位从而显示抗原所在的位置(细胞膜、细胞核、胞浆)，并根据染色的强弱判断抗原的多寡。根本原理与方法标记物类别抗体名称阳性标记的常见肿瘤铬粒素A(Cg.A)突触素(Syn)s-100蛋白神经元特异性烯醇化酶NSE胶质纤维酸性蛋白GFAP神经内分泌标记胶质瘤神经内分泌肿瘤波形蛋白〔Vimentin〕间叶组织标记肌动蛋白(actin)HHF35结蛋白(desmin)肌源性肿瘤间叶组织肿瘤间皮间皮瘤CEA腺癌上皮性肿瘤细胞角蛋白〔CK〕上皮组织标记常用免疫组化标志HBV感染HBsAgHBcAgCMV感染CMVHPV感染HPV-Ag某些微生物标记胃肠间质瘤CD117〔C-kit〕抑癌基因突变或过表达P53，P21肿瘤增殖活性Ki-67,PCNA生殖细胞肿瘤胎盘硷性磷酸酶(PLAP)前列腺癌PSA，P504S肝癌，内胚窦瘤AFPPR，ER，CerbB2某些肿瘤相关标记淋巴瘤B淋巴瘤T淋巴瘤霍奇金淋巴瘤NK/T淋巴瘤白细胞共同抗原〔LCA〕CD20CD79αCD3CD45RO〔UCHL1〕CD30CD15CD56淋巴造血组