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文档简介

第4讲动物细胞工程一、动物细胞培养续表【例1】动物细胞培养和植物组织培养的主要区别是(

)A.动物细胞培养所用的培养基的成分与植物的不同B.动物细胞培养是培养单个细胞,植物组织培养是培养组织C.动物细胞培养可以传代培养,而植物组织培养不能传代培养D.动物细胞培养过程中可发生遗传物质的改变,而植物组织培养不能A

【解析】动物细胞培养通常用液体培养基,成分中糖类用葡萄糖,还必须含有动物血清;植物组织培养通常用固体培养基,成分中含有蔗糖及植物激素等物质。

【友情提醒】(1)在细胞融合时,可出现多种杂种细胞,如B细胞—B细胞,骨髓瘤细胞—骨髓瘤细胞,B细胞—骨髓瘤细胞。(2)各项技术在使用中一般要借助于其他某种技术的协助,如动物细胞融合、单克隆抗体的制备、胚胎移植、核移植等,其中动物细胞培养是动物细胞工程技术的基础。续表【例2】下列关于单克隆抗体制备过程的叙述,正确的是(

)A.制备过程中不需要动物细胞培养技术B.杂交瘤细胞具有浆细胞与癌细胞的所有特点C.经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产D.单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂D 【解析】单克隆抗体的制备是将骨髓瘤细胞与浆细胞结合,经过选择培养基的筛选得到杂交瘤细胞并经单一抗体检测后,培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞即可得单克隆抗体,杂交瘤细胞能无限繁殖但不具有癌细胞的转移能力。

三、动物体细胞核移植与克隆动物1.原理

动物细胞核的全能性。动物细胞核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。2.供核细胞

一般选优良动物的传代10代以内的细胞。

3.受体细胞

去核的MⅡ期卵母细胞。

4.过程【例3】在克隆多利羊的过程中,下列哪项技术没有运用到(

)A.细胞培养技术B.细胞核移植C.胚胎移植技术D.基因工程技术【解析】克隆技术需利用核移植以产生重组细胞,重组细胞经细胞培养形成早期胚胎后,需移植到母体子宫发育成个体。

D 动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较续表

1.(2010·四川)某实验室做了下图所示的实验研究,下列相关叙述,正确的是()A.与纤维母细胞相比,过程①形成的诱导干细胞的全能性较低B.过程②是诱导干细胞的结构和遗传物质发生稳定性差异的过程C.每个Y细胞只产生一种抗体,故过程③不需要选择性培养基进行筛选D.过程④产生的单抗,不需细胞膜上载体蛋白的协助就能释放到细胞外D【解析】本题考查细胞分化及细胞工程相关知识,考查学生的综合应用能力。过程①形成的诱导干细胞全能性高,A错。过程②是细胞的分化过程,分化时遗传物质不会发生变化,B错。过程③要用选择培养基才能选出杂交瘤细胞,C错。过程④分泌抗体蛋白,是胞吐过程,不需载体蛋白协助。

2.(2010·浙江)下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是()A.培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B.克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变C.二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的D.恶性细胞系的细胞可进行传代培养D【解析】本题主要考查细胞工程的有关知识,动物细胞培养可以分为原代培养和传代培养,原代培养到一定程度后要进行传代,因为细胞有接触抑制现象,当细胞接触时就会停止分裂(在细胞培养过程中进行的是有丝分裂,所以培养出来的多数细胞基因型相同),但是细胞在培养过程中,传代次数也是有限的,一般为50次就会死亡,留下来的细胞就是发生了癌变的细胞,遗传物质发生改变,具有不死性,但是细胞膜表面糖蛋白减少,细胞易转移,可以无限增殖,即可以进行传代培养,这个也就是人体中癌细胞会转移的原因。

3.(2009·江苏)动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。(1)肝脏切成小薄片,这有利于肝脏细胞

。(2)气室中充入5%CO2气体的主要作用是

。(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长,但要注意选择抗生素的_____________,以保证抗生素对肝脏无害。(4)有机物X有毒性,可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具,探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。吸收氧气维持培养种类和剂量和营养物质、排出代谢废物液适宜的pH

材料用具:

肝脏小块,外周血淋巴细胞,淋巴细胞培养液,植物凝集素(刺激淋巴细胞分裂);显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿,滴管;吉姆萨染液(使染色体着色),有机物X溶液等。

实验过程:①在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞,取4等份,备用。②利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置,按下表步骤操作(“√”表示已完成的步骤)。甲乙丙丁步骤一:加入肝脏培养液√√√√步骤二:加入有机物X溶液√√步骤三:放置肝脏小块√上表中还需进行的操作是

。③培养一段时间后,取4组装置中的等量培养液,分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察_____________________,并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常,而甲组的淋巴细胞正常,则说明______________________________。向乙(或丁)组装置中染色体形态和数量肝脏小块对有机物X具有解毒作用放置肝脏小块【解析】本题考查动物细胞培养的相关知识。(1)把肝脏切成小薄片,有利于肝脏细胞吸收氧气和营养物质、排出代谢废物。(2)气室中充入5%CO2的作用是形成碳酸来维持培养液适宜的pH。(3)同时也要注意选择抗生素的种类和剂量来抑制细菌生长。(4)向乙(或丁)组装置中放置肝脏小块作为对照实验。有机物X有毒性,可诱发染色体断裂,所以要观察淋巴细胞的染色体形态和数量是否变化。甲组添加肝脏小块,淋巴细胞染色体正常,丙组没有添加出现染色体异常,说明肝脏小块对有机物X具有解毒作用。4.(2011·南京模拟)以H1N1病毒核衣壳蛋白为抗原,采用细胞工程制备单克隆抗体,下列叙述正确的是()A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内,产生的血清为单克隆抗体B.体外培养单个浆细胞可以获得大量针对H1N1病毒的单克隆抗体C.将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合,经诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D.利用该单克隆抗体与H1N1病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可以诊断该病毒感染体D【解析】单克隆抗体是相应的杂交瘤细胞产生的,单个浆细胞的培养不能获得单克隆抗体;用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内,血清中的抗体不是单一抗体,还含有体内已存在的其他抗原的抗体;等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合,只考虑两个细胞融合,可以形成三种杂交细胞,但只有浆细胞和骨髓瘤细胞融合而成的细胞称为杂交瘤细胞。5.(2011·郑州模拟)英国科学家威尔穆特首次用羊的体细胞、乳腺细胞成功地培育出一只小母羊,取名为“多利”,这种方法被称之为“克隆”。以下四项中与此方法在本质上最相近的是()A.将兔的早期胚胎分割后,分别植入两只母兔的子宫内,并最终孕育成两只一样的兔B.将人的抗病毒基因嫁接到烟草的DNA分子上,培育出了具有抗病毒能力的烟草新品种C.将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞D.将人的精、卵在体外受精,待受精卵发育到囊胚期时,再植入女性子宫内发育成“试管婴儿”A6.(2011·大同模拟)单克隆抗体(单抗)实质上是单个效应B细胞通过克隆形成的细胞群产生的化学性质单一、特异性强的免疫球蛋白。下列有关叙述中,错误的是()A.单抗作为生物导弹能定向到达癌细胞所在部位B.单抗制备的过程要用到动物细胞培养和细胞融合技术C.在单抗制备的过程中必须经过至少两次细胞筛选D.只有用物理或化学方法诱导,才能促使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞

D【解析】诱导B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞的融合有三种方法:灭活病毒、物理方法、化学方法。7.请据图判断,下列说法不正确的是()

C

A.若a,b分别对应为骨髓瘤细胞和效应B细胞,则d能产生单克隆抗体是b的遗传物质选择性表达的结果B.若d形成有

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