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第第页植物类黄酮（Flavonoid）试剂盒说明书植物类黄酮（Flavonoid）试剂盒说明书微量法100管/96样注意：正式测定之前选择23个预期差别大的样本做猜测定。测定意义：类黄酮是一类多苯化合物，属于植物次生代谢物，对人体具有消炎，抗菌，降血脂，清除体内羟自由基，防备癌症等作用。测定原理：在碱性亚硝酸盐溶液中，类黄酮与铝离子形成在510nm处有特征汲取峰的红色络合物，测定样品提取液在510nm处的吸光值，即可计算样品类黄酮含量。自备试验用品及仪器：天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声碎裂仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。试剂构成和配制：提取液：60%乙醇，自备。试剂一：液体1mL×1管，4℃保管。试剂二：液体1mL×1管，4℃保管。试剂三：液体10mL×1瓶，4℃保管。类黄酮提取：将样本烘干至恒重，粉碎，过40目筛之后，称取约0.02g，加入2mL提取液，60℃振荡提取2h，10000g，25℃，离心10min，取上清待测。测定操作表：1、分光光度计/酶标仪预热30min，调整波长至510nm，蒸馏水调零。2、操作表空白管测定管样本待测液（L）108蒸馏水（L）108试剂一（L）66混匀，25℃静置6min试剂二（L）66混匀，25℃静置6min试剂三（L）8080混匀，25℃静置15min，测定510nm处吸光值。ΔA=A测定A空白，空白管只要做一管。类黄酮含量计算公式：a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线：y=5.02x+0.0007，R2=0.9996类黄酮含量（mg/g干重）=（ΔA0.0007）÷5.02÷（W÷V样总）=0.398×（ΔA0.0007）÷WV样总：加入提取液体积，2.5mL；V样：反应中样品体积，0.108mL；W：样品质量，gb.用96孔板测定的计算公式如下标准曲线：y=2.51x+0.0007，R2=0.9996类黄酮含量（mg/g干重）=（ΔA0.0007）÷2.51÷（W÷V样总）=0.797×（ΔA0.0007）÷WV样总：加入提取

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