替米考星肠溶微丸的制备及体外释药特性研究

替米考星肠溶微丸的制备及体外释药特性研究

季美沙是泰乐菌素处理产物的半合成。它对预防和治疗由胸膜肺炎、巴氏杆菌和杆菌引起的肺炎、鸟类感染和乳头生成的乳腺炎非常有效。由于替米考星在酸性环境中不稳定,目前国内外上市的替米考星剂型仅有替米考星预混剂、注射液等［２］,这些剂型不仅成本高,而且给药不方便。微丸属于口服多剂量剂型,不仅给药方便,而且药物的体内吸收速度均匀且个体间生物利用度差异较小［３］。为了解决替米考星在酸性环境中不稳定［４］口服在胃中易被破坏以及药物味苦［１］的问题,本实验将替米考星制备成肠溶微丸制剂,并对其进行了表征和初步评价。1替米考星微丸的制备与释放度测定1.1材料替米考星和花生壳粉(河南官渡兽药制造有限公司)、微晶纤维素(安徽山河药辅料股份有限公司)、药用淀粉和药用糊精(曲阜市药用辅料有限公司)、十二烷基硫酸钠(山东聊城安信药用辅料有限公司)、欧巴代®肠溶薄膜包衣预混剂(上海卡乐康包衣技术有限公司)。1.2仪器设备E-50挤出滚圆设备(重庆英格造粒包衣技术有限公司)、MiniDPL0.2型流化床(重庆精工机械)、RCZ-8B溶出仪(天大天发科技有限公司)、NikonEclipse80i型荧光显微镜(日本Nikon公司)、UV-2450紫外分光光度计(日本岛津)、Nicolet380-红外分光光度计(美国赛默飞世尔科技)、DSC-200F3差示扫描量热仪(德国耐驰科学仪器贸易上海有限公司)。1.3制备方法1.3.1微丸的制备按处方量称取药物与辅料,过100目筛,混合均匀,以1%羟丙基甲基纤维素为粘合剂制软材,用孔径1.0mm的筛网以30r/min的挤出速度挤出,挤出后在滚圆机内以800r/min的速度滚转1.5min,微丸于60℃流化床干燥1h,筛分后取16~24目的微丸作为合格的微丸。1.3.2微丸的包衣用80%的乙醇配制浓度为10%的肠溶包衣液,磁力搅拌1h,使其充分溶解,过100目筛备用。将合格的微丸置于流化床中,设置进风温度为70℃,物料温度为60℃。风机频率25Hz,雾化压力0.06MPa,蠕动泵流速2mL/min,包衣结束后,固化30min［５］,得替米考星肠溶微丸。1.4替米考星含量测定紫外分光光度计扫描替米考星溶液,结果显示其在292nm波长处有最大吸收。在此波长下测系列浓度的供试品溶液和各供试品溶液的吸光度［６］。以样品吸光度(A)对浓度(C)进行线性回归,得直线方程A=0.0559C-0.0045(R２=0.9999)。结果显示替米考星浓度在6~45μg/mL范围内与吸光度有良好的线性关系,可用于替米考星的含量测定。取替米考星微丸适量,研细,精密称取适量(约相当于替米考星25mg),置于100mL容量瓶中,加水至使其完全溶解,定容至刻度。量取10mL稀释至100mL,作为供试品溶液。同法称取原料药适量,制得25μg/mL的替米考星作为对照品溶液,在292nm的波长下,分别测定吸光度,计算得到替米考星微丸相对含药量为103.00%。1.5替米考星微丸释放度的测定参照2010版《中国药典》附录XD释放度测定法第二法［７］,以900mL0.lmol/L盐酸溶液作为溶出介质,设置温度(37士0.5)℃,各取1g微丸投入溶出杯中,采用桨法,转速100r/min,分别于20、40、60、80、100、120min取样,取样量2mL,10mL容量瓶定容。结束后,弃去酸液,立即加入pH6.8的磷酸钠缓冲溶液继续运转,分别于130、140、150、160min取样,取1mL溶出液至10mL容量瓶定容,紫外测定吸光度,计算药物的累积释放量［８］。1.6替米考星微丸的确证将药物、药物与辅料的物理混合物和替米考星肠溶微丸进行红外扫描,比较其红外光谱图,可以判断药物在微丸中的变化,由替米考星主要官能团的特征峰的变化,进一步确定药物在制剂中的存在状态。另外,差示扫描量热仪分别测3组物质的熔点,根据其熔点的变化,可以推断药物在制备的过程中药物存在形式的变化。2替米考星微丸的表征根据预实验结果和文献报道［９］,影响微丸成型的因素主要是微晶纤维素的处方量,而包衣增重对微丸释放度影响较大。因此,本文就这两个因素进行考察,结果如下。2.1不同处方量的微晶纤维素对微丸成型性的影响保持其他因素不变,通过改变填充剂花生壳粉和微晶纤维素的量来制备微丸。结果如图1所示,微晶纤维素的处方量分别是15%、25%、30%时,在电子显微镜下观察,4倍镜下微丸的形状分别如图1中A、B、C所示;40倍镜下微丸的表面分别如图1中D、E、F所示。2.2包衣增重量对微丸释放度的影响肠溶微丸的溶出度主要受到肠溶包衣材料性质的影响,肠溶包衣材料的厚度在一定程度上决定着微丸的释放速率［１０］。固定处方中原辅料的量,考察不同包衣增重(5%、10%、15%)对药物释放的影响。由图2可知,在酸性介质中,包衣增重不同的微丸2h后释放度分别达到67.46%、9.98%、5.97%。在pH6.8的磷酸缓冲盐介质中,最终累积释放量分别达到94.00%、90.78%、69.60%。2.3替米考星微丸的确证2.3.1红外分析替米考星、替米考星与辅料的物理混合物、替米考星微丸红外光谱见图3所示。根据参考文献［１１］其中在特征区3450cm－１,指纹区1200cm－１是叔醇羟基的特征峰,2960cm－１、2920cm－１是甲基、亚甲基的伸缩振动峰,1650cm－１是叔胺中碳氮键的伸缩振动峰,1050~1100cm－１是六元单氧环中碳氧单键伸缩振动峰。2.3.2差示扫描量热分析替米考星、替米考星与辅料的物理混合物、替米考星微丸DSC图谱见图4所示。替米考星为单峰,熔点为101.2℃;替米考星和辅料物理混合物的熔点在105.1℃;替米考星微丸在100℃没有固定的熔点。3不同药物释放量释放的比较本实验考察微晶纤维素用量与替米考星微丸成型性的关系,15%的微晶纤维素成型性最差,滚圆后成不规则状,表面粗糙;30%的微晶纤维素成型性相对较好,微丸粒径也比较均匀,表面光滑。结果表明微晶纤维素用量越大,微丸越圆整、成型性越好、收率也越高。包衣膜增重对替米考星释放的影响显著,且随着包衣增重的增加,药物在酸性释放介质中的释放度逐渐降低,随着时间的延长,在缓冲盐释放介质中包衣膜出现不同程度的溶解,导致释放速率增大。包衣增重5%的处方在酸中释放较快,2h内药物释放量达到60%以上,140min后在磷酸盐中释放量达到90%以上;包衣增重15%的处方在酸中释放缓慢,在磷酸盐中释放不足70%;包衣增重10%的处方在酸中2h内释放不超过10%,在缓冲盐介质释放实验中,药物达到肠溶的效果,160min后药物释放达到90%以上。按照肠溶制剂的要求［７］,肠溶制剂在酸中释放量不超过10%,在磷酸盐中释放不低于70%。因此包衣增重10%的微丸在肠道中溶解释放的效果最好。挤出滚圆法是制备球形微丸一种比较理想的方法,其设备操作简单,生产能力强、成本低,制得的含药微丸载药量高［１２］。红外图谱结果显示:A、B在3450cm－１的位置出现强的-OH伸缩振动峰,但C中此特征峰消失,说明药物中的-OH被掩盖起来,同时在1050~1100cm－１处,A、B中有明显的药物中六元单氧环的特征峰,但在C中此官能团的特征峰消失,初步证明了替米考星制成微丸后是以固体分散体的形成存在［１３］。结合差示扫描量热分析实验结果,替米考星微丸图C与物理混合物图B相比,峰形发生比较大的变化,其中100℃左右的峰完全消失,也没有形成新峰,进一步证实替米考星以无定型固体共沉淀物的形式形成固体分