依替米星的体外抗菌活性及联合抑菌效果研究

依替米星的体外抗菌活性及联合抑菌效果研究

依米星是庆大霉素c1a的乙基化衍生物。本研究比较了依替米星与其他抗菌药物对临床常见病原菌的体外抗菌活性,并测试了依替米星与β-内酰胺类抗菌药物对甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)和铜绿假单胞菌(PAE)的体外协同作用,目的在于指导临床医生合理应用依替米星治疗病原菌感染。1材料和方法1.1药敏试验检测共收集2005年1-8月北京协和医院门诊及各病房分离出的连续非重复菌株1559株,其中ESBLs通过美国临床实验室标准化研究所/美国临床实验室标准化委员会(CLSI/NCCLS)推荐的四纸片确证试验检出,耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)、甲氧西林敏感葡萄球菌(MSS)通过纸片法药敏中头孢西丁的敏感性检出。所有菌株均经常规生化鉴定或BBLCrystal及BDPhoenix自动化鉴定系统鉴定。进行联合抑菌试验的30株MSSA和30株铜绿假单胞菌为临床分离的随机选取菌株。1.2菌株来源及标本来源此次研究菌株的科室分布来自儿科、重症监护病房(ICU)、门诊和急诊、呼吸内科及外科病房等科室。菌株的标本来源为:痰液、尿液、血液等标本。具体见表1。1.3抗菌药物胶片依替米星(杭州爱大制药有限公司,纯度0.66),头孢他啶(葛兰素史克制药有限公司,纯度0.8945),哌拉西林(齐鲁制药厂,纯度0.894)。抗菌药物纸片:依替米星(中国药品生物制品检定所)、青霉素、哌拉西林、氨苄西林、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松、左氧氟沙星、庆大霉素、阿米卡星、头孢噻肟/克拉维酸、头孢他啶/克拉维酸、头孢西丁纸片均为英国Oxoid公司的产品。M-H琼脂,阳离子调整的M-H肉汤(Ca2+浓度为22.5mg/L,Mg2+浓度为11.25mg/L)。1.5联合抑菌试验首先依照CLSI/NCCLS推荐的方法进行微量肉汤稀释法,测定依替米星、哌拉西林对30株MSSA的单药最低抑菌浓度(MIC)值,以及依替米星、头孢他啶对30株铜绿假单胞菌的单药MIC值。棋盘法联合抑菌试验在调整阳离子浓度的M-H肉汤(CAMHB)中进行,分别测定依替米星/哌拉西林对MSSA的抑菌效应以及依替米星/头孢他啶对铜绿假单胞菌的抑菌效应。接种菌量为5×105CFU/ml。抗菌药物设置浓度为(1/32~4)×MIC,37℃孵育24h,以肉眼未见菌生长的两药最低浓度组合读取各药的联合MIC。药物相互作用效应通过计算最小部分抑菌浓度(FIC)指数来判断:FIC=(A药联合用时的MIC/A单药用时的MIC)+(B药联合用时的MIC/B单药用时的MIC);FIC≤0.5为协同效应,0.5<FIC≤1为相加效应,1<FIC≤2为无关作用,FIC>2为拮抗效应。2结果2.1抗病性的分离率2.2基糖苷类药物的敏感性大肠埃希菌对3种氨基糖苷类药物的敏感性依次为阿米卡星>依替米星>庆大霉素。克雷伯菌属对3种氨基糖苷类药物的敏感性依次为阿米卡星>依替米星>庆大霉素。肠杆菌属对3种氨基糖苷类药物的敏感性依次为阿米卡星>依替米星>庆大霉素。铜绿假单胞菌对3种氨基糖苷类药物的敏感性依次为阿米卡星>依替米星≈庆大霉素,依替米星敏感率为59.8%,略高于左氧氟沙星(57.8%)。鲍氏不动杆菌对所有测试抗菌药物的敏感性均较低,依替米星的敏感率为14.9%,略高于庆大霉素。MRSA和MRCNS对依替米星敏感率高于庆大霉素,其敏感率为18.9%和85.1%;MSSA和MSCNS对依替米星活性>95.0%,高于庆大霉素、左氧氟沙星。肠球菌属对依替米星的敏感率较低,为9.4%。见表3。2.3菌株协同试验结果30株MSSA对依替米星MIC分布:1株为0.064μg/ml、17株为0.25μg/ml、8株为0.5μg/ml,1、4、16、32μg/ml各1株;30株MSSA对哌拉西林MIC分布:18株为1~16μg/ml、9株为32~64μg/ml、3株为128~256μg/ml。30株铜绿假单胞菌对依替米星MIC分布:19株为1~8μg/ml、6株为16μg/ml、3株为32μg/ml、2株为>256μg/ml;30株铜绿假单胞菌对头孢他啶MIC分布:10株为2~8μg/ml、2株为16μg/ml、18株为32~256μg/ml。依替米星/哌拉西林对MSSA联合抑菌效果以及依替米星/头孢他啶对铜绿假单胞菌联合抑菌效果:两组协同率均达90.0%,相加率均为10.0%。抗菌药物组合中联合MIC的分布及与单药MIC的比较,联合后各药的MIC50、MIC90及MIC均值均有显著的降低。抗菌药物联合用药与单药MIC的分布比较见表4。3依替米星的临床疗效氨基糖苷类抗菌药物为临床常用的广谱抗菌药物,目前由于病原菌耐药性的发展,特别是各种氨基糖苷钝化酶的出现,使得临床迫切需要对酶更稳定、毒性更低的新氨基糖苷类抗菌药物。依替米星为乙基庆大霉素C1a,根据此次样本量较大的纸片法药敏分析,发现依替米星对克雷伯菌属、ESBLs阴性大肠埃希菌、肠杆菌属、变形菌属、MSSA、MRCNS、MSCNS均保持了较高的体外抗菌活性,且对铜绿假单胞菌也有较好的抗菌活性;在氨基糖苷类药物中,其敏感率高于庆大霉素,稍逊于阿米卡星。李家泰等对依替米星体外药效研究时发现,依替米星对耐药菌感染的疗效可能优于庆大霉素和小诺米星,特别是对MRSA,有66.0%的菌株可被依替米星≤8μg/ml抑制。但在本次药敏纸片法显示,依替米星对ESBLs阳性大肠埃希菌和MRSA的活性较低(敏感率:ESBLs阳性大肠埃希菌为37.1%,MRSA为18.9%)。鲍氏不动杆菌和肠球菌属对氨基糖苷类药物耐药率普遍较高,依替米星也不例外。在对依替米星的体内抗菌疗效观察中,陈雪华等组织上海市11所医院共350例进行了依替米星治疗细菌性感染的临床研究,发现其治疗细菌性感染有效率为87.7%,痊愈率为52.7%;其中治疗下呼吸道感染有效率为88.3%,痊愈率49.0%;细菌清除率90.1%,不良反应率为3.43%。宋毅等对使用依替米星的患者进行了不良反应调查分析,发现总不良反应率为5.03%,其中听力平衡异常发生率为0.567%,肝功异常发生率为0.140%,肾功异常发生率为0.425%。说明依替米星是一个高效、安全、具有较高临床推广价值的药物。国内外对氨基糖苷类药物和β-内酰胺类药物联合的研究起步较早,目前认为此组合对大部分菌株体现协同效应。其机制可能为β-内酰胺类药物对细菌细胞壁的破坏作用,促进氨基糖苷类药物进入细菌体内。依替米星与哌拉西林对MSSA的联合抑菌效应以及依替米星与头孢他啶对铜绿假单胞菌的联合抑菌效应均十分理想,两个抗菌药物组合的协同率均达90.0%,联合后各抗菌药物的MIC50及MIC90MIC50、MIC9075.0%~87.5%。因此,依替米星与β-內酰胺类药物联合治疗病原菌特别是耐药菌的感染有较好的应用前景。共分离病原菌1559株